柱色谱法是最原始的色谱方法,这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中,将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端,以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种,一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱,一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法,一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液,另一种方法是烘干固定相后用机械方法分开各个色带,以合适的溶剂浸泡固定相提取组分分子。柱色谱法被广泛应用于混合物的分离,包括对有机合成产物、天然提取物以及生物大分子的分离。......阅读全文
柱色谱法是最原始的色谱方法,这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中,将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端,以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种,一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱,一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法,一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液
液相色谱柱上基本都有->标志,表示流动相的流动方向,有的在色谱柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字样,翻译成“决不能反冲”的意思,色谱柱可以反冲吗、色谱柱能不能反冲的问题争议很大,但在我们工作中,用色谱柱反冲技术修复色谱柱收到柱效提高、柱效恢
吸附的主要原因 反相硅胶柱填充介质(固定相)与样品间常常会发生下列吸附现象: (1) 残存硅醇基与碱性物质间的离子吸附;(2) 硅胶表面的金属杂质与金属配位物质间的吸附; (3) 疏水性极强的物质在柱中的蓄积。以上现象,会引起反相色谱柱柱效下降、拖尾、重复性不良等状况的发生 清洗
正确储藏预装色谱柱是保证其使用过程顺利和使用寿命延长的前提。正相色谱柱应该在填充正庚烷/异丙醇或者另一种不含其它调节组分的惰性溶剂后储藏。 反相固定相则应该储藏在不含任何期间可能沉淀析出的缓冲液、或其它调节组分的水/有机相混合溶剂内。因此,建议在色谱过程拟终止前的15分钟前切换到水/有机相50/5
1、正常使用的柱了,使用后用甲醇冲洗,建议反向冲洗,流速低一点;使用前,建议用甲醇冲洗至基线平衡。2、如果出现拖尾或者柱压升高,可考虑将正向进口端拆开,并将筛板超声清洗干净,有时候效果很好。3、如果还不行,建议反向使用。
保存操作1、如果流动相含有酸或无机盐,应当先用去离子水(20倍柱体积)冲洗干净。然后用用100%乙腈或甲醇保存色谱柱。最后用柱子的接头密封,并放在稳定的环境中存放。2、应避免色谱柱受到直接的机械冲击或摔落,避免造成色谱柱性能的降低。
吸附的主要原因 反相硅胶柱填充介质(固定相)与样品间常常会发生下列吸附现象: (1) 残存硅醇基与碱性物质间的离子吸附; (2) 硅胶表面的金属杂质与金属配位物质间的吸附; (3) 疏水性极强的物质在柱中的蓄积。以上现象,会引起反相色谱柱柱效下降、拖尾、重复性不良等状况的发生色谱柱清洗方法
吸附的主要原因 反相硅胶柱填充介质(固定相)与样品间常常会发生下列吸附现象: (1) 残存硅醇基与碱性物质间的离子吸附; (2) 硅胶表面的金属杂质与金属配位物质间的吸附; (3) 疏水性极强的物质在柱中的蓄积。以上现象,会引起反相色谱柱柱效下降、拖尾、重复
色谱柱的性能除了与固定相性能有关外,还与填充技术有关。 在正常条件下,填料粒度>20μm时,干法填充制备柱较为合适;颗粒
一、进样应注意问题 手不要拿注射器的针头和有样品部位、不要有气泡(吸样时要慢、快速排出再慢吸,反复几次,10ul注射器 金属针头部分体积0.6ul,有气泡也看不到,多吸1-2ul把注射器针尖朝上气泡上走到顶部再推动针杆排除气泡,(指10ul注射器,带芯子注射器平感觉)进样速度要快(但不易特快),