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柱色谱法是最原始的色谱方法，这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中，将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端，以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种，一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱，一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法，一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液，另一种方法是烘干固定相后用机械方法分开各个色带，以合适的溶剂浸泡固定相提取组分分子。柱色谱法被广泛应用于混合物的分离，包括对有机合成产物、天然提取物以及生物大分子的分离。......阅读全文
柱色谱法是最原始的色谱方法，这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中，将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端，以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种，一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱，一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法，一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液
液相色谱柱上基本都有->标志，表示流动相的流动方向，有的在色谱柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字样，翻译成“决不能反冲”的意思，色谱柱可以反冲吗、色谱柱能不能反冲的问题争议很大，但在我们工作中，用色谱柱反冲技术修复色谱柱收到柱效提高、柱效恢
吸附的主要原因 反相硅胶柱填充介质(固定相)与样品间常常会发生下列吸附现象： (1) 残存硅醇基与碱性物质间的离子吸附；(2) 硅胶表面的金属杂质与金属配位物质间的吸附； (3) 疏水性极强的物质在柱中的蓄积。以上现象，会引起反相色谱柱柱效下降、拖尾、重复性不良等状况的发生 清洗
正确储藏预装色谱柱是保证其使用过程顺利和使用寿命延长的前提。正相色谱柱应该在填充正庚烷/异丙醇或者另一种不含其它调节组分的惰性溶剂后储藏。 反相固定相则应该储藏在不含任何期间可能沉淀析出的缓冲液、或其它调节组分的水/有机相混合溶剂内。因此，建议在色谱过程拟终止前的15分钟前切换到水/有机相50/5
1、正常使用的柱了，使用后用甲醇冲洗，建议反向冲洗，流速低一点；使用前，建议用甲醇冲洗至基线平衡。2、如果出现拖尾或者柱压升高，可考虑将正向进口端拆开，并将筛板超声清洗干净，有时候效果很好。3、如果还不行，建议反向使用。
保存操作1、如果流动相含有酸或无机盐，应当先用去离子水（20倍柱体积）冲洗干净。然后用用100%乙腈或甲醇保存色谱柱。最后用柱子的接头密封，并放在稳定的环境中存放。2、应避免色谱柱受到直接的机械冲击或摔落，避免造成色谱柱性能的降低。
吸附的主要原因 反相硅胶柱填充介质（固定相）与样品间常常会发生下列吸附现象： (1) 残存硅醇基与碱性物质间的离子吸附； (2) 硅胶表面的金属杂质与金属配位物质间的吸附； (3) 疏水性极强的物质在柱中的蓄积。以上现象，会引起反相色谱柱柱效下降、拖尾、重复性不良等状况的发生色谱柱清洗方法
吸附的主要原因 反相硅胶柱填充介质（固定相）与样品间常常会发生下列吸附现象： (1) 残存硅醇基与碱性物质间的离子吸附； (2) 硅胶表面的金属杂质与金属配位物质间的吸附； (3) 疏水性极强的物质在柱中的蓄积。以上现象，会引起反相色谱柱柱效下降、拖尾、重复
色谱柱的性能除了与固定相性能有关外，还与填充技术有关。 在正常条件下，填料粒度>20μm时，干法填充制备柱较为合适；颗粒
一、进样应注意问题 手不要拿注射器的针头和有样品部位、不要有气泡（吸样时要慢、快速排出再慢吸，反复几次，10ul注射器 金属针头部分体积0.6ul，有气泡也看不到，多吸1-2ul把注射器针尖朝上气泡上走到顶部再推动针杆排除气泡，（指10ul注射器，带芯子注射器平感觉）进样速度要快（但不易特快），