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PPO粗酶液的纯化

实验概要本实验利用葡聚糖凝胶柱层析对PPO粗酶液进行了纯化。实验原理1. 葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质) 2. 利用离子交换法,选取DEAE-阴离子纤维素DE52柱材料,因为PPO是带有阳离子的蛋白质,在层析时会吸附在柱材料上,而杂蛋白会洗下。后用NaCl梯度洗脱PPO,(NaCl为强离子交换剂,能将弱吸附在柱材料上的PPO置换下来)。粗酶液从而得到纯化。主要试剂1. 0.02MTris-HCL缓冲液Ph7.4(内含0.001MEDTA)配制时配×10倍浓缩液1000ml;2. NaCL;3. 聚已二醇;4. DEAE-纤维素DE52;5. 葡聚糖凝胶SephadexG-200;6. 兰葡萄糖-40、70、100等。主要设备1......阅读全文

关于小麦(面粉)白度品质状况的测定讨论

  小麦面食品是我国城乡居民,尤其是北方居民的主要食品,以小麦面粉为原料制作的食品种类繁多。我国及亚洲其它国家和地区的消费者特别偏爱洁白的面粉及用其制成馒头、面条和水饺等食品。为提高市场竞争力,国内面粉厂在生产过程中普遍使用增白剂,尤其是一些小型加工企业超量使用增白剂。这种增白剂是一种过氧化甲酰类氧

首批转基因苹果下月在美上市,切开放3周也不会变色

  众所周知,苹果被削好皮或切开后暴露在空气中很容易变色。如何阻止切片水果氧化变色是食品学家、经济学家及美食家们孜孜不倦的追求。如今,生物学家利用转基因技术“沉默”变色基因,从源头上控制了果肉变色。这不,美国从下个月开始就要销售全球首批转基因苹果,最大的优点在于切开后放置3周也不会变色。  苹果肉暴

利用RNAi技术进行改良小麦面粉白度的研究

    【目的】通过RNAi策略抑制小麦籽粒ppo的表达,获得籽粒PPO 酶活性低、白度高的转基因小麦新种质。    【研究意义】小麦面粉及其面食品的感官品质(尤其色度)是小麦磨粉品质和面食品的主要评价指标(如国标SB/T 10137-93

PPO活性测定——分光光度法

PPO活性测定可应用于:(1)研究PPO生理机制与调节。(2)了解酶的活性与植物组织褐变以及生理活动之间的关系。实验方法原理PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410

利用RNAi技术进行改良小麦面粉白度的研究

  利用RNAi技术进行改良小麦面粉白度的研究  【目的】通过RNAi策略抑制小麦籽粒ppo的表达,获得籽粒PPO 酶活性低、白度高的转基因小麦新种质。  【研究意义】小麦面粉及其面食品的感官品质(尤其色度)是小麦磨粉品质和面食品的主要评价指标(如国标SB/T 10137-93),特别是鲜湿面条、馒

PPO活性测定

一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.

PPO活性测定

一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.

PPO活性测定

一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.

PPO粗酶液的纯化——凝胶层析法

实验方法原理葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质)。实验材料PPO粗酶液试剂、试剂盒Tris-HCL缓冲液NaCL

PPO活性测定

分光光度法             实验方法原理 PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷

紫外-可见分光光度计在食品酶分析中的应用

酶对食品加工的影响 酶是生物活细胞产生的一类具有催化功能的蛋白质。酶除了具有高的催化效率特性外,还具有很高的专一性,利用它能选择性地将个别食品组分改性,而不影响到其它组分。因此,酶在食品科学中相当重要,通过酶的作用能引起食品原料的品质发生变化,也能在比较温和的条件下加工和改良食品。 2.紫外-可见分

PPO粗酶液的纯化

凝胶层析法             实验方法原理 葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒

紫外可见分光光度计在食品酶分析中的应用

紫外可见分光光度法测定酶活:   1. β一半乳糖苷酶   β一半乳糖苷酶,又称乳糖酶(Lactase)。能水解乳糖来降低乳制品的乳糖含量,从而提高乳制品的可消化性,用于低乳糖牛奶和非结晶型浓缩牛奶的生产及奶酪风味的改变,同时还可用于生产低聚半乳糖。   【酶活测定】以ONPG为底物测定

紫外可见分光光度计检测食品中的酶活性

酶在食品加工中的作用就像一把双刃剑,我们要趋利避害。酶的积极作用我们要加强,在食品加工过程中添加酶制剂,使其作用充分发挥;消极作用我们要尽量避免,可以通过加热等方法将酶灭活,消除其不利影响。为了将酶更好地应用于食品加工,研究酶的性质是十分必要的。而紫外-可见分光光度法是研究酶性质的重要方法之一。下面

多酚氧化酶(PPO)的分离提取

一、原理与目的多酚氧化酶是植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶,植物受到机械损伤和病菌侵染后,PPO催化酚与O2氧化形成醌,是组织形成褐变,以便损伤恢复,防止或减少感染,提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用,所以伤口醌类物质出现是植物防止伤口感染的愈伤反应,因而受伤组织一般这种酶的活性就会提高。多

紫外可见分光光度计检测多酚氧化酶酶活性

多酚氧化酶(PPO)是一类由核基因编码在细胞质中合成的含铜质体的金属酶,其作用机理在于铜的氧化-还原作用。大麦中的多酚物质经过PPO的催化氧化后,具有单宁性质,易和蛋白质起交联作用而沉淀出来,进而影响啤酒的色泽、泡沫、风味和非生物稳定性。大麦中部分PPO以“潜伏”状态存在,在浸麦过程中,可通过去除一

紫外可见分光光度计检测食品中的酶活性

    酶的积极作用我们要加强,在食品加工过程中添加酶制剂,使其作用充分发挥;消极作用我们要尽量避免,可以通过加热等方法将酶灭活,消除其不利影响。  为了将酶更好地应用于食品加工,研究酶的性质是十分必要的。而紫外可见分光光度法是研究酶性质的重要方法之一。下面我们来介绍用紫外可见分

阿霉素丙二醇脂质体的制备及体外抗肿瘤作用研究

化療作为癌症治疗的主要手段,存在两大问题:一是化疗药物缺乏选择性,二是多药耐药性[1-2]。靶向药物制剂成为当今抗肿瘤领域的研究主流[3-4]。高通透性和高滞留性[高渗透长滞留效应(EPR效应)]是肿瘤靶向药物设计的金标准[5]。醇质体是一种新型的柔性脂质体,是在脂质体的双分子层中加入不同的柔软剂,

沉降值测定仪分析糯小麦受水氮含量的影响

  水分、氮肥是小麦生长发育过程中最重要的两大因素,水氮合理运筹是实现小麦优质高产栽培的重要措施.已有研究表明,水氮运筹显著影响普通小麦淀粉含量及组成、蛋白质含量及组成,然而其对糯小麦籽粒品质的影响效应尚未见报道.    以自育的糯小麦新品系糯麦12为研究对象,采用3个水分处理和两个施氮处理,研究了

使用白度测定仪探索提高面粉白度的新途径

一直以来,面粉的白度被认为是面粉品质的一个重要指标,也可以利用它来反映小麦的加工精度,小麦的白度可以使用白度测定仪来进行测定,因此提高面粉的白度,对于小麦的生产来说,是非常重要的事情。在小麦粉的实际加工过程中,人们使用白度测定仪检测发现,优化制粉工艺、面粉组分及后处理和原粮品种的选育等,都可以帮助提

Exposing gels and plates containing radioactive samples to X-ray film

Although most people use the PhosphorImager for western blots, kinase assays and methionine-labeled samples, X-ray film remains the best way to expose

放射性测量方法(二)

2.探测装置一个供探测γ光子用的固体晶体装置包括一个“密闭的”铊激活碘化钠晶体,安放在光电倍增管的表面上。“密闭的”晶体上是一块固态圆筒状的铊激活碘化钠,其顶部和四周都是用铝层包裹以避免光和湿气,因为碘化钠晶体易吸潮,为改善反射性,碘化钠晶体用一玻璃片密封,并同光电倍增管的表面直接接触,其间加些硅油

白度测定仪测面粉白度与灰分的比例关系

      白度和灰分是衡量面粉品质的最重要指标。通常情况下, 灰分越高, 面粉色泽越差[。一般来说, 灰分与白度成反比, 与面粉色泽成反比[10 ]。      从白度测定仪研究可知, 面粉颜色不仅

PPO粗酶液的纯化

一、原理1.葡聚糖凝胶Sephadex G-200凝胶柱层析 利用大分子不能进入凝胶颗粒内部 最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质)2.利用离子交换法,选取DEAE-阴离子纤维素

面粉白度测定仪对于鲜切面面粉白度的分析

      理想的鲜切面色泽应是细腻洁白或呈奶油黄色,光洁度高,灰暗、无光泽是不受人们喜爱的。在对鲜切面色泽性状的进行选择时,应注意筛选面粉白度高、光泽度好、蛋白质和灰分含量低、支链淀粉含量高的品种,或面粉黄度高的品种。面粉的白度可以通过面粉白度测定

不同冻结方式对南美白对虾品质的影响-美国FTC质构仪

  本研究选取新鲜的南美白对虾,通过 4 种不同冻结方式( 静止空气冻结、液体浸渍冻结、真空包装联用静止空气冻结和真空包装联用液体浸渍冻结) 处理,研究不同冻结方式对南美白对虾品质的影响,探索适合南美白对虾的冻结工艺。   实验样品:南美白对虾购于浙江宁波象山某海水养殖场,选取体表无损伤,长( 1

PPO粗酶液的纯化

一、原理1.葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质)2.利用离子交换法,选取DEAE-阴离子纤维素DE5

3H胸腺嘧啶核苷掺入检查法

实验概要3H胸腺嘧啶核苷(3Hthymidine,3HTdR)掺入试验,是体外淋巴细胞转化试验较客观、重复性好、结果准确的方法之一。实验原理当淋巴细胞受分裂原(PHA等)或特异性抗原刺激发生转化时,必然伴有DNA的大量合成,若将具有放射性的3HTdR加到培养液内,则可被作为合成DNA的原料而摄入转化

基因编辑的蘑菇,为什么不吃?

无论在中餐还是西餐中,白蘑菇都是一道重要的食材。不过,白蘑菇最好是现买现做,若是在冰箱中放上两天,它就会变成褐色,并且黏糊糊的。如今,科学家已经找到一种工具来延迟它的褐变。这就是CRISPR基因编辑技术。白蘑菇褐变是由多酚氧化酶(PPO)引起的。于是,宾夕法尼亚大学的研究人员利用CRISPR技术,敲

小麦面粉白度相关问题解析

    小麦面粉白度与面制食品品质关系密切,是非常重要的品质指标。面条是中国北方人民的传统主食,消费数量极大。面条的色泽是面条感官品质评价的重要指标,评分中占很大的比重,色泽越白越好。面粉白度有专门的仪器进行测定,如白度测定仪。有研究报道影响面条白度的因素有蛋白质含量、