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动物所等发现一类新型血清小RNA参与机体活动性感染

近年来,非编码小RNA(miRNAs)在血清中的发现及其在不同疾病中的变化为癌症、代谢性疾病的诊断开创了一种革命性的无创检测方法。然而,除miRNAs之外,血清中是否还存在其他形式的小RNA尚未知晓。 中国科学院动物研究所段恩奎研究团队曾于2012年在哺乳动物成熟精子中发现了一类来源于tRNA5’端序列的新型小RNA(tsRNAs)。 随后通过RNA深度测序等手段进一步发现:tsRNAs在各种脊椎动物(从鱼类到人类)的血清中呈现高度富集,且所检测的物种中tsRNAs的序列显示高度的进化保守性,提示其作为一种古老的小RNA广泛存在于动物血清中。 血清tsRNAs不依赖于微泡(exosomes)保护,但具有良好的稳定性,其在血清中的稳定机制涉及两个方面,一方面tsRNAs通过与血清蛋白形成复合体,维持其稳定;另一方面tsRNAs上的核苷酸修饰(可能来源于其前体tRNAs)也为其抵御血清RNA酶的降解发挥了重要作用......阅读全文

抗体的制备方法与原理

一、抗血清的制备  有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。  (一)用于免疫的动物  作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如

淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体制备技术3

抗体的制备方法与原理一、抗血清的制备  有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。  (一)用于免疫的动物  作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所

人类疾病动物模型-2

三、心血系系疾病的动物模型(一)动脉粥样硬代模型常选用兔、猪、大鼠、鸡、鸽、猴和犬等动物。常用的复制方法有下面几种(包括高血脂模型):1.高胆固醇、高脂肪饲料喂养法:是目前比较常用的方法,特点是死亡率低,可长期观察,但费时久。一般在家兔、鸽、鸡等,经数周喂养就可产生明显的高脂血症,经数月就能形成早期

心血管系疾病的动物模型

心血系系疾病的动物模型  (一)动脉粥样硬代模型  常选用兔、猪、大鼠、鸡、鸽、猴和犬等动物。常用的复制方法有下面几种(包括高血脂模型):  1.高胆固醇、高脂肪饲料喂养法:是目前比较常用的方法,特点是死亡率低,可长期观察,但费时久。一般在家兔、鸽、鸡等,经数周喂养就可产生明显的高脂血症,经数月就能

免疫球蛋白IgG的提取-3

五、蛋白质的盐析法向蛋白质溶液中加入不同浓度的中性盐,可以把不同的蛋白质分别沉淀出来。这种方法称为蛋白质的盐析。利用蛋白质的盐析法,可以得到我们所需的不同的免疫球蛋白。最常用的中性盐包括,硅酸铵、硫酸镁、硫酸钠等,其中以硫酸铵最为常用:(一)、优点1、在水中溶解度大,其饱和溶液含有大量盐;2、在水中

抗血清的制备(二)

3、免疫途径,剂量和免疫周期  抗原注射途径可根据不同抗原及试验要求,选用皮内、皮下、肌肉、静脉或淋巴结内等不同途径注入抗原进行免疫。一般常采用背部、足掌、淋巴结周围、耳后等处皮内或皮下多点注射。初次免疫与第二次免疫的间隔时间多为2~4周。常规免疫方案为抗原加CFA皮下多点注射进行基础

间充质干细胞培养,无血清培养基与血清培养基相比......

间充质干细胞培养,无血清培养基与血清培养基相比,有何不同?近来,国家的干细胞的政策是一个接一个。对应的,来自用户的咨询也是一个接一个。大多数的问题是:现在都在说无血清培养基,无血清培养基和血清培养基到底有什么差别?差别很大,从用途方面简单说下你感受的可能更具体。如果你是提供间充质干细胞(MSC)药物

CHO细胞无血清培养入门技术手册

CHO细胞无血清培养入门技术手册——深圳百恩维生物1、CHO细胞背景CHO细胞是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO),1957年美国科罗拉多大学Dr. Theodore T. Puck从一成年雌性仓鼠卵巢分离获得,为

天然细胞培养基(血清和水解乳蛋白)-1

天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培

人类疾病的动物模型-2

三、呼吸系统疾病动物模型的复制    急性呼吸窘迫综合征(RDS)    关于该模型复制方法,除国内外多数采用的油酸法外,尚有静脉注射致死量大肠杆菌内毒素、出血性休克、高浓度氧吸入等等。但目前认为用油酸法制备RDS 模型比较理想,因为这种模

中和反应(neutrallzation reaction)技术

病毒或毒素与相应的抗体结合后,失去对易感动物的致病力,谓之中和试验。本试验主要用于:(1)从待检血清中检出抗体,或从病料中检出病毒,从而诊断病毒性传染病;(2)用抗毒素血清检查材料中的毒素或鉴定细菌的毒素类型;(3)测定抗病毒血清或抗毒素效价;(4)新分离病毒的鉴定和分型,中和试验不仅可在易感的实验

抗血清的制备(一)

一、目的:  1、了解抗血清制备的基本过程:  2、掌握抗血清的收集和保存方法。  二、原理:  抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。

生物工程中的无血清细胞培养

无血清培养基的出现是培养基发展历程上的一个里程碑,其一般是在合成培养基的基础上,引入成分完全明确的或部分明确的血清替代成分,使培养基能满足动物细胞培养的要求,又可有效的克服因使用血清所引发的问题。进入20世纪80年代后,新的无血清培养基不断问世,人们经过研究发现,只要在培养基中增加某些适于细胞生长的

抗血清制备法-生化检验

抗血清制备法:抗血清指含有抗体的血清。传统的抗血清制备方法是将某种抗原通过多次注入动物,数十天后或数月后,采集动物血,立即分离出血清。此抗血清在保存或应用前必须作效价和特异性鉴定及纯化。(一)免疫动物的选择免疫动物的选择基本要求:1.抗原与免疫动物的种属差异越远越好。2.动物必须适龄、健壮、无感染、

华东理工大学动物细胞与组织工程研究室成立30周年

  2016年11月26~27日,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室动物细胞与组织工程研究室举办了隆重的30周年成立庆祝活动,研究室主任、华东理工大学张江现代生物技术研究院院长、上海倍谙基生物科技有限公司董事长谭文松教授以及周燕教授、蔡海波教授、美国俄亥俄州立大学温志友教授、美国礼来公司生物工

长期社会隔离对雌性大鼠行为生理的影响

摘要:为研究社会隔离能否导致雌性啮齿动物产生焦虑,将成年雌性大鼠分别进行单独隔离饲养(单养)和四只一笼群养,十周后进行行为学和生理测试。行为结果显示:与群养组相比,单养组大鼠在旷场中的直立次数减少,明暗箱测试中的暗箱停留时间增长,穿越次数减少;说明长期社会隔离使雌鼠产生了焦虑。虽然两组大鼠与应激和生

泌尿系统药理实验中的选择与应用

泌尿系统药理实验中的选择与应用  (一)利尿药及肾功能测定实验中动物的选择应用  1.利尿药及抗利尿药筛选实验:要判断所试药物是否有利尿作用,可选用大白鼠、小白鼠、猫或狗进行实验,其中以大白鼠较为常用。对人体有利尿作用的药物均可在大白鼠实验中获得较好的利尿效果,但汞撒利的作用较差。因此筛选利尿药实验

单克隆抗体的制备(二)

3 免疫策略不同实验室使用的免疫策略是不同的,很多免疫策略都同样有效。 目的是扩大宿主体内抗原反应性 B 细胞的数量。体内每次接触到蛋白质抗原,都会增加抗原反应性B 细胞的数量。在对抗原的再次应答中,产生的抗体量会增加,总的免疫球蛋白类别会从以IgM 为主转变为以IgG 为主,特异性抗体

动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测实验

动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测,可用于(1)动物细胞的培养(2)胚胎工程的发展(3)分子生物学的研究。溶液配制法实验方法原理动物细胞工程的主要操作对象是离体条件下动物有机体的各部分组织、器官或细胞,这些用来进行离体培养的组织或器官称为外植体;动物胚胎工程的主要操作对象是配子和胚胎。要满足

动脉粥样硬化模型的复制方法

实验概要本文选用兔、猪、大鼠、鸡、鸽、猴和犬等动物,介绍了几种常用的动脉粥样硬化模型复制方法,主要有高胆固醇、高脂肪饲料喂养法,免疫学方法,注射儿茶酚胺类药物法,注入同型半胱氨酸法,注射表面活化剂法,胆固醇-脂肪乳剂静脉注射法及幼乳大白鼠法等。实验步骤1.高胆固醇、高脂肪饲料喂养法是目前比较常用的方

有氧运动对心理应激衰老大鼠行为和氧自由基的影响

[摘   要 ]  目的: 研究有氧运动对心理应激衰老大鼠行为和外周血氧自由基的影响。方法: 健康雌性 S D大鼠 28只 ,随机分为对照组、运动组、心理应激组、运动+心理应激组,实验后测定大鼠的开场

案例解析 | 抗病毒生物大分子制药治疗

  近期爆发的新型冠状病毒肺炎(COVID-19,对应的病毒为SARS-CoV-2)突出了开发有效治疗方法的重要性。在近期的公众号中,我们向大家介绍了“人民的希望”瑞德西韦的工作机制[1],在此,我们结合疫苗、血清、多肽和单抗的研究案例,向大家继续介绍靶向病毒的大分子治疗和我们的解决方案是如何推动下

抗血清的制备

一、目的:1、了解抗血清制备的基本过程:2、掌握抗血清的收集和保存方法。二、原理:抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。一种抗原能否引起抗体生成反应,一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇(A

免疫血清制备方法

免疫血清的制备可用于:(1)制备免疫标记抗体等;(2)供特异性免疫治疗用等。实验方法原理具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同决定簇为不同特异性的B细胞克隆所识别,因此由某一抗原刺激机体后产生的抗体,实际上为针对该抗原分子表面不同决定簇的抗

流行性乙型脑炎病毒的血清学诊断

(2) 血清学诊断:包括补体结合试验、血凝抑制试验以及中和试验。血凝抑制抗体和 中和抗体存在于IgM和IgG两种免疫球蛋白中,而补体结合抗体只存在于IgG部分内。 ① 补体结合试验:特异性较高,是流行病学上确认乙脑的一种常用方法。 但因补体 结合抗体的出现较晚,动物大多于发病后2周左右才呈阳性反应

泌尿系统药理实验中的选择与应用(二)

(二)泌尿系统疾病的动物模型1.肾炎⑴肾小球肾炎:Masugi型肾炎动物模型是选用羊抗兔肾血清引起兔或大白鼠的肾小球肾炎。羊抗兔血清制备是选用体重2kg左右健康兔处死后取出肾脏,插入导管,反复用生理盐水冲洗,然后将皮质与髓质分开,用肾皮质5g研成匀浆与弗氏完全佐剂混匀成10ml,再加生理盐水使总量达

单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)的生产

获得稳定的杂交瘤细胞系后,即可根据需要大量生产单抗,以用于不同目的。 一、单抗的大规模制备 目前大量制备单抗的方法主要有两大系统,一是动物体内生产法,这是国内外实验室所广泛采用;另一是体外培养法。 1、动物体内生产单抗的方法 迄今为止,通常情况下均采用动物体内

抗体的概念动物产生抗体的机理及单克隆抗体的制备方法

  抗体的概念    动物机体受到抗原物质的刺激后, 由B淋巴细胞转化为浆细胞产生的, 能与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白, 这类免疫球蛋白称为抗体(Antibody,简称 Ab)。   免疫球蛋白   免疫球蛋白(Immunogolobulin, 简称Ig) 是指存在于人和动物血液(

无血清培养基的优缺点

无血清培养基是在合成培养基的基础上发展起来的,与传统的培养基相比,既能满足细胞在体外长时间培养的要求,又能避免动物血清所带来的不利因素。无血清培养基的发展历程分为无血清培养基(Serum-Free Medium,SFM)、无动物源培养基(Animal Component Free Medium,AC

免疫酶细胞化学实验技术-3

一、对照实验  1.吸收实验  应用尚无文献报告的抗血清/自己制备的抗血清进行ICC染色时,需用相应的抗原吸收抗血清后,再孵育标本,判断结果的可信性(结果应为阴性)。常用的吸收实验分固相吸收和液相吸收两种(见本书第一章 ),对于不能形成沉淀,难以用离心沉降法分离的一些小分子多肽类抗原,以固相吸收为佳