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微核实验在染色体水平检测DNA损伤实验(一)

实验步骤一、材料1. 胞质分裂阻滞微核试验2. 微核的着丝点检测(1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。(2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。(3) 过氧化物酶标记的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基联苯溶液(D A B ): I m g /m L 溶于 0. 5 mol/L Tris 碱缓冲溶液, p H 7. 6。(5) NiCl2 溶 液 : 8% 溶液溶于 0.5 mol/L Tris 碱缓冲溶液, p H 7. 6 , 使用前配制。(6)D A B 反应混合物: I m L D A B 溶 液 , 3 m L Tris 碱缓冲 溶 液 , p H 7.6, 25NiCl2 溶液 , 40 uL 0 •I m o l / L 咪唑水溶液和 10 u L 30% 过氧化氢。使用前配制。(7)中性红溶液: 0.1 % 溶于双蒸水。二、方 法1. 用于分离的人淋巴细胞的标准 CBMN......阅读全文

DNA损伤的三种分子生物检测方法

DNA是携带生物体遗传信息的重要分子,它的完整性对细胞存活至关重要。然而,在生命活动中,DNA时刻遭受着内源性(氧化自由基、复制叉崩塌等)或外源性(电离辐射、烷化剂等)刺激,DNA损伤不可避免。检测DNA损伤的方法有很多,根据其原理大致可以分为3类: 基于损伤DNA理化性质的改变检测DNA

单细胞凝胶电泳法检测单细胞DNA损伤

单细胞凝胶电泳(single-cell gel eiectrophoresis,SCGE)又称慧星试验(comet assay)是一项较新的电泳方法。自1978年被Rydcbert B.等人成功地用于检验DNA单链断裂以来,经过不断的改进,已成为一种快速、灵敏、简便的检测DNA损伤的方法,广泛地应用

《Hepatology》补充抗氧化剂抗癌?不是想吃就能吃!

  抗氧化剂在癌症的发生和发展中的角色越来越有争议,越来越多的证据显示不同的抗氧化剂在不同类型的癌症进程中,既有可能会起到积极的预防作用,又或者会加速癌症的发展。尽管不能全盘否认抗氧化剂在预防肿瘤方面积极的作用,该不该使用抗氧化剂以及如何使用,都给人们造成了相当的困扰。第二军医大学近日于《Hepat

《Hepatology》补充抗氧化剂抗癌?不是想吃就能吃!

  抗氧化剂在癌症的发生和发展中的角色越来越有争议,越来越多的证据显示不同的抗氧化剂在不同类型的癌症进程中,既有可能会起到积极的预防作用,又或者会加速癌症的发展。尽管不能全盘否认抗氧化剂在预防肿瘤方面积极的作用,该不该使用抗氧化剂以及如何使用,都给人们造成了相当的困扰。第二军医大学近日于《Hepat

《Hepatology》:补充抗氧化剂抗癌?不是想吃就能吃!

抗氧化剂在癌症的发生和发展中的角色越来越有争议,越来越多的证据显示不同的抗氧化剂在不同类型的癌症进程中,既有可能会起到积极的预防作用,又或者会加速癌症的发展。尽管不能全盘否认抗氧化剂在预防肿瘤方面积极的作用,该不该使用抗氧化剂以及如何使用,都给人们造成了相当的困扰。第二军医大学近日于《Hepatol

人衰老成纤维细胞经紫外线损伤后的DNA 修复和...(二)

213 DNA 修复能力比较 以3H2TdR 参入法测定非程序性DNA 合成(UDS) , 以表示DNA 总修复能力. 从F ig. 3 可见, 在紫外线照射后12 h 左右UDS达峰值. 衰老2BS 细胞的修复能力明显低于年轻细胞(P < 0101).214 斑点及Northern

DNA修复出错何以致癌?

  最近,日本大阪大学的一组研究人员发现,如果在DNA受到辐射损伤的时候DNA损伤应答(DDR)不起作用,那么,那些应该被去除的蛋白质反而会保留下来,遗传信息的丢失可能被刺激,当被错误修复的时候,这会导致肿瘤的形成。相关研究结果发表在《PLOS Genetics》杂志。  人们认为,细胞癌变的原因之

高通量RNA干扰技术筛选DNA损伤实验

目前,将RNAi库和基于细胞水平的高通量分析技术相结合对于我们鉴定药物敏感性和抵抗性的新机制有非常广阔的前景。举例来说,已有研究者对全基因组进行RNAi筛选找出了导致非小细胞肺癌对紫杉醇敏感的基因。这项研究也证实了RNAi技术在发现影响癌症细胞细胞有丝分裂的靶点上具有很大潜力。 Molecular

P53响应的lncRNA GUARDIN参与维护基因组的稳定

  中国科学技术大学吴缅教授团队多年来在肿瘤细胞凋亡/生存的信号转导及分子机制,非编码RNA调控肿瘤发生发展的分子机理,p53与细胞代谢及诱导性多能干细胞调控的分子机制方面做出了很多开创性的研究成果。近期,研究团队应用Arraystar Human LncRNA Array对带有WT p53表达系统

P53响应的lncRNA GUARDIN参与维护基因组的稳定

  中国科学技术大学吴缅教授团队多年来在肿瘤细胞凋亡/生存的信号转导及分子机制,非编码RNA调控肿瘤发生发展的分子机理,p53与细胞代谢及诱导性多能干细胞调控的分子机制方面做出了很多开创性的研究成果。近期,研究团队应用Arraystar Human LncRNA Array对带有WT p53表达系统

P53响应的lncRNA GUARDIN参与维护基因组的稳定

中国科学技术大学吴缅教授团队多年来在肿瘤细胞凋亡/生存的信号转导及分子机制,非编码RNA调控肿瘤发生发展的分子机理,p53与细胞代谢及诱导性多能干细胞调控的分子机制方面做出了很多开创性的研究成果。近期,研究团队应用Arraystar Human LncRNA Array对带有WT p53表达系统

修复人类DNA损伤 科学家从植物中找到新线索

   生物体包括我们人类每天都会受到紫外线辐射、自由基和其他化学物质的诱变,造成体内遗传物质DNA的损伤。在DNA损伤修复的过程中,会形成一种十字叉状的DNA连接体——霍利迪连接体,必须将其“拆解”,才能让染色体正确分离和复制。然而目前,对于负责“拆解”工作的解离酶,科学界还未能揭开其背后隐藏的工作

PNAS:发现测定DNA构象变化的新方法

  中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理国家重点实验室汪海林研究员与加拿大阿尔伯塔大学Chris Le和Michael Weinfeld教授合作发现一种测定DNA构象变化的新方法,并以此为基础,揭示了一种DNA修复机制。该研究成果的详细论文发表在2009年6月15日出版的美国《国家科学院院刊

DNA损伤检测法——应用ImageXpress Nano成像分析系统

前言在研究中经常会涉及DNA或染色体的损伤,因为DNA损伤与很多疾病的发生有密切的关系,如遗传疾病、肿瘤等。放射性辐射、环境影响或化合药物等都有可能引起DNA的损伤。之前的研究表明标记组蛋白H2AX在丝氨酸139上的磷酸化位点是敏感的可早期预测DNA双链断裂的方法。本文详细介绍了自动细胞成像检测DN

单细胞凝胶电泳技术影响因素的分析

单细胞凝胶电泳(SCGE)又称“彗星”法,是一种操作简便、快速、敏感性高的DNA损伤与修复的检测技术。尽管此法无需复杂的实验条件,但在建立过程中可能受诸多因素的影响而难以得到较理想的结果,我们就其主要的影响因素作如下分析。1.琼脂糖凝胶薄板的制备:该实验需要制备两层琼脂糖凝胶薄板,应注意琼脂糖的浓度

《Nature》子刊:同济大学等成功制备神经干细胞衰老模型

  衰老是指随时间推移身体组织的机能下降,经常引起衰老相关的退行性疾病,例如:三篇论文深入了解衰老带来的神经元变化。越来越多证据表明,神经干细胞的衰老,对于中枢神经细胞衰老非常重要。然而,其根本分子机制的阐述却因为缺乏合适的衰老模型而受阻。   2014 年3月13日,来自同济大学、南通大学、清华

生物学X射线辐照仪在DNA损伤的应用

生物学X射线辐照近年来发展起来的一种放疗方法,具有安全性高、使用方便、可在普通实验室环境下使用等优点,在科研领域上,常用于取代传统的γ源辐照。Cellrad生物学X射线辐照仪具备130KV的X射线能量,可对细胞或小动物进行照射,从而用于干细胞(骨髓移植及分化,饲养层细胞制备、细胞诱变等)、DNA损伤

PNAS惊人发现 肺炎会损害DNA

  肺炎是全球死亡的主要原因,最近的一项研究显示,肺炎的一种最常见致病菌,可能会损害肺细胞的DNA。相关研究结果发表在六月十五日的《PNAS》杂志。  在这项研究中,来自新加坡-麻省理工学院(MIT)研究与科技联盟(Singapore-MIT Alliance for Research and Te

PNAS惊人发现:肺炎会损害DNA

  肺炎是全球死亡的主要原因,最近的一项研究显示,肺炎的一种最常见致病菌,可能会损害肺细胞的DNA。相关研究结果发表在六月十五日的《PNAS》杂志。  在这项研究中,来自新加坡-麻省理工学院(MIT)研究与科技联盟(Singapore-MIT Alliance for Research and Te

【盘点】衰老与疾病的关联性研究进展

  人为什么会变老?对于人类来说,如何才能长生不老真的是一个令人着迷的问题。但是至今为止都没有一个让人满意的答案。衰老一直是生命过程中的核心环节,也是影响整个人类社会健康发展的重要问题。目前世界各国均面临着严重的人口老龄化,数据显示到2050年约三分之一的中国人口年龄将超过60岁。因此,深入了解衰老

王嘉东等Molecular Cell发文揭示放射损伤修复调控新机制

  染色体的完整性和遗传信息的精准传递对于细胞以及个体而言至关重要,而放射损伤所导致的DNA双链断裂会直接导致染色体的断裂、丢失和重排,如不能及时修复则会导致细胞的死亡或者癌变。  MRN(MRE11/RAD50/NBS1)复合体在放射损伤修复通路中扮演着重要的角色,该复合体作为DNA损伤的“感应器

没有放疗仪器,如何做放疗研究?

  肿瘤治疗的三大手段,手术、化疗、放疗。手术,每个肿瘤外科医生天天都在手术台上进行研究。化疗,在三大手段中目前是临床基础科研领域研究最多的地方。放疗,临床基础研究总在不温不火中进行。原因是啥呢。听放疗科医生介绍,其实从临床角度来说,不少肿瘤治疗,采用放疗比手术和化疗效果好。季博在这里不展开讨论他们

没有放疗仪器如何做放疗研究?

肿瘤治疗的三大手段,手术、化疗、放疗。手术,每个肿瘤外科医生天天都在手术台上进行研究。化疗,在三大手段中目前是临床基础科研领域研究最多的地方。放疗,临床基础研究总在不温不火中进行。原因是啥呢。听放疗科医生介绍,其实从临床角度来说,不少肿瘤治疗,采用放疗比手术和化疗效果好。季博在这里不展开讨论他们的临

姜海研究组最新文章:新型高效DNA/HDAC双靶点抗癌药物

  3月10日,国际学术期刊EMBO MOLECULAR MEDICINE 在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所姜海研究组等合作研究的最新成果:A DNA/HDAC dual-targeting drug with significantly enhanced antic

上海生科院合作研发新型高效DNA/HDAC双靶点抗癌药物

  3月10日,国际学术期刊EMBO MOLECULAR MEDICINE 在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所姜海研究组等合作研究的最新成果:A DNA/HDAC dual-targeting drug with significantly enhanced antic

双剑合璧 | sumo化与磷酸化修饰联合分析赢高分文章

   随着质谱技术的不断进步,大规模修饰组学的方法也越来越成熟,PTM作为生物体内非常重要的生理现象也逐步被揭示出参与各项生命活动。今天我们就一起来学习一篇运用质谱技术对磷酸化修饰和类泛素化修饰鉴定,找出两种修饰联合作用对在DNA复制损伤压力时的响应。该篇文献来自哥本哈根大学的研究人员于2017年1

双剑合璧 | sumo化与磷酸化修饰联合分析赢高分文章

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sumo化与磷酸化修饰联合分析

随着质谱技术的不断进步,大规模修饰组学的方法也越来越成熟,PTM作为生物体内非常重要的生理现象也逐步被揭示出参与各项生命活动。今天我们就一起来学习一篇运用质谱技术对磷酸化修饰和类泛素化修饰鉴定,找出两种修饰联合作用对在DNA复制损伤压力时的响应。该篇文献来自哥本哈根大学的研究人员于2017年10月发

NMN/β-烟酰胺单核苷酸真的可以抗衰老吗?

  首个经科学验证NAD+ 前体NMN衰老抑制剂Herbalmax瑞维拓问世   衰老和死亡是人类永恒的挑战,虽然长生不老在可预见的将来都难以实现,但减缓或者逆转衰老是否可能?   上图中的两只小鼠,左边的毛发乌黑浓密,双目明亮,动作轻盈;而右边的毛发斑白稀疏,眼神暗淡,步履蹒跚。若不提前告知,

为了修复DNA损伤,植物需要好的承包商

  现在科学家们已知的名为SOG1的主基因就像一个总承包商指导DNA损伤修复。它与植物细胞中各种遗传分承包商协调以建立有效的DNA损伤反应。但是,尚不清楚分承包商中有哪些特定基因,也不清楚SOG1如何与它们相互作用来监督DNA损伤反应。  现在,索尔克研究所的研究人员报导了哪些基因被开启或关闭,以及