免疫荧光标记的应用

半个多世纪以来,经过许多学者不断改进和发展,使此项技术成为微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法,在临床上得到了广泛的应用,使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。......阅读全文

免疫荧光标记的应用

半个多世纪以来,经过许多学者不断改进和发展,使此项技术成为微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法,在临床上得到了广泛的应用,使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。

免疫荧光共标记怎么计算共标记的细胞个数

共定位的定义:共定位是对样品内两种荧光标记的信号共同分布的位置进行分析。 共定位就如字面意思上所说的,只能够表明蛋白A和B都在此细胞有表达,并且在同样的细胞内位置/细胞器。相关短语:共定位通道 PDM Channel 细胞共定位 Cellular co localization 细胞内共定位信息 c

免疫荧光标记技术

.原理免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。直接法:将标记

免疫荧光标记技术的原理

免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体。

LSCM冷冻组织切片的免疫荧光标记

冷冻组织切片的免疫荧光标记 将冷冻组织切片从 -80℃ 冰箱中取出,室温放置 10 min,待切片回温并干燥,浸于 PBS 中 10 min洗去OCT,可以无需 Triton 处理,即可进行免疫荧光抗体标记,操作步骤与培养细胞反应方法相同。反应在避光湿盒中进行,反应结束时用无荧光封固剂封片,4℃保存

组织切片的免疫荧光标记实验

实验材料 组织样品试剂、试剂盒 PBS抗体仪器、耗材 玻片加湿盒实验步骤 1.  将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒,由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片,放入玻片盒中(每边放6片),或故湿盒中(载玻片勿相互接触)。 2.  待载玻片达室湿且未干时,铺加PBS于切片上(勿溢出玻片)。 3.  稀释的第

悬浮细胞的免疫荧光标记实验

实验方法原理免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体。实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒多聚

悬浮细胞的免疫荧光标记实验

实验材料 悬浮细胞试剂、试剂盒 多聚-L-赖氨酸仪器、耗材 离心机培养箱实验步骤 1.  细胞在冰浴中冷却,然后用台式离心机于4℃以800 g 离心5 min,吸去培养液并以4℃PBS重悬细胞。 2.  离心吸去PBS,以1~2 ml 2%PFA固定液,或2%PFA固定液/0.1% Triton X

组织切片的免疫荧光双标记实验

实验材料 组织样品试剂、试剂盒 第一抗体IgG实验步骤 1.  当进行双标记实验时,最重要的准则是:第一抗体应为不同类型,从而使第二抗体能分别识别之。第一抗体最好是来源于不同免疫动物。但如使用单克隆抗体,这一要求就有可能达不到,当使用单抗时,不同型的抗体如IgG和IgM,可被第二抗体确切区分

组织切片的免疫荧光标记实验

实验方法原理免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体。实验材料组织样品试剂、试剂盒PB

组织切片的免疫荧光双标记实验

间接免疫荧光显微镜检术可使两种或更多种抗原可以在同一切片,同一时间内被显示出来,可用于(1)细胞标记;(2)免疫荧光筛选干细胞。实验方法原理通过使用激发波长及发射波长均不相间的荧光染料而进行的。通常限用两种荧光染料,最常见的是罗丹明(绿光激发,发射红光)和荧光素(蓝光激发、发绿光)联合使用。实验材料

免疫荧光标记为什么不直接标记一抗而标记二抗

因为一种一抗只识别一种底物,如果每种一抗都需要荧光标记,那这样成本很高。而二抗既可以和一抗结合,又带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗,提高了通用性。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体,即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。一抗二抗都是一种可以特异结

病毒免疫荧光实验_​荧光素标记抗体

实验材料荧光色素试剂、试剂盒抗体实验步骤荧光标记抗体方法有直接标记法和间接标记法两种。(1) 直接法:较为常用,具体步骤是:1) 抗体溶液的制备:用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 将待标记抗体稀释至 20mg/ml;2) 荧光素:根据待标记抗体的总量,按 0.01mg 荧光素/mg 蛋白

免疫荧光标记技术是什么

.原理免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。直接法:将标记

免疫荧光标记技术是什么

.原理免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。直接法:将标记

单层生长细胞的免疫荧光标记实验

实验材料 单层细胞试剂、试剂盒 PBS多聚甲醛甲醇抗体仪器、耗材 离心机水浴锅培养箱实验步骤 1.  置生长成片的单层细胞于冰上冷却,吸去培养液并以4℃PBS洗涤。吸去PBS。2.  如欲研究细胞表面抗原,则以2%PFA于冰上面定30 min。如为细胞质抗原,则可用含0.1% Triton X-10

单层生长细胞的免疫荧光标记实验

免疫荧光标记是微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法,在临床上得到了广泛的应用。实验方法原理免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光

亲和标记的应用

有人用亲和标记技术直接鉴别结合部位的氨基酸残基。其做法是将一化学性质活跃的侧链连接到半抗原上,当此带有侧链的半抗原与相应抗体结合后,侧链即与邻近的氨基酸形成共价键,也就是说,结合部位邻近的氨基酸残基被标记了。也有人用叠氮基作侧链连接到半抗原上,并与相应抗体结合,经紫外线照射后,叠氮基转变成活化的硝基

免疫荧光技术的应用

一、标本的制作免疫荧光技术在实际应用上主要有直接法和间接法。直接法是在检测样品上直接滴加已知特异性荧光标记的抗血清,经洗涤后在荧光显微镜下观察结果。免疫荧光直接法可清楚地观察抗原并用于定位标记观察。间接法是在检测样品上滴加已知的细菌特异性抗体,待作用后经洗涤,再加入荧光标记的第二抗体。如研制成的抗沙

流式细胞仪检测的免疫荧光样品标记

用于流式细胞仪检测的常用荧光素有FITC、TRITC、Cy3、Cy5,PE和PI,在以上各种荧光染料中,PE荧光最强,适用于弱表达抗原;FITC最便宜,适用于强表达抗原,适用范围广。    1.直接免疫荧光标记法  取一定量的细胞悬液(浓度约l×l06个/m1),直接加入荧光素标记抗体进行免疫反应(

亲和标记的主要应用

有人用亲和标记技术直接鉴别结合部位的氨基酸残基。其做法是将一化学性质活跃的侧链连接到半抗原上,当此带有侧链的半抗原与相应抗体结合后,侧链即与邻近的氨基酸形成共价键,也就是说,结合部位邻近的氨基酸残基被标记了。也有人用叠氮基作侧链连接到半抗原上,并与相应抗体结合,经紫外线照射后,叠氮基转变成活化的硝基

亲和标记的应用介绍

有人用亲和标记技术直接鉴别结合部位的氨基酸残基。其做法是将一化学性质活跃的侧链连接到半抗原上,当此带有侧链的半抗原与相应抗体结合后,侧链即与邻近的氨基酸形成共价键,也就是说,结合部位邻近的氨基酸残基被标记了。也有人用叠氮基作侧链连接到半抗原上,并与相应抗体结合,经紫外线照射后,叠氮基转变成活化的硝基

卫星DNA标记的应用

卫星标记应用遗传多样性的分析与评估,生物个体表现出的各种遗传变异,在本质上就是DNA的差异,因此通过研究DNA的变异来分析群体的遗传结构及遗传多样性则更为直接,Arranz等(1996)对牛的卫星DNA和蛋白质标记的比较研究发现卫星标记比蛋白质标记具有更加丰富的多态性,且其两者所得到的系统发生树基本

光镜下双/多重免疫标记实验——免疫荧光双重标记TRITCFITC

双重或多重标记是利用免疫学和细胞化学原理,在同一张切片上同时采用或先后采用不同颜色的荧光色素或酶促产物,或采用不同直径大小颗粒胶体金来原位标记两种或两种以上抗原-抗体复合物,达到在同一细胞或亚细胞水平显示不同抗原成分(定性、定位、定撤),分析不同抗原成分相互间功能的增消关系,操作遵循的原则与要求同单

免疫荧光技术的应用特点

该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点是:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。荧光免疫法按反应体系及定量方法不同,还可进一步分做若干种。与放射免疫法相比,荧光免疫法无放射性污染,并且大多操作简便,便于推广。国外生产的TDM用试剂盒,有相当一部分

免疫荧光标记技术的方法分类及技术特点

根据抗原抗体反应的结合步聚的不同,免疫荧光标记技术可分为直接法、间接法、补体法和双重免疫荧光法四种。直接法是将荧光素标记的特异性抗体直接与相应的抗原结合,以检查出相应的抗原成分。间接法是先用特异性抗体与相应的抗原结合,洗去未结合的抗体,再用荧光素标记的抗特异性抗体(间接荧光抗体)与特异性抗体相结合,

标记抗体的应用技术

实验方法原理 ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用

亲和标记技术的应用

有人用亲和标记技术直接鉴别结合部位的氨基酸残基。其做法是将一化学性质活跃的侧链连接到半抗原上,当此带有侧链的半抗原与相应抗体结合后,侧链即与邻近的氨基酸形成共价键,也就是说,结合部位邻近的氨基酸残基被标记了。也有人用叠氮基作侧链连接到半抗原上,并与相应抗体结合,经紫外线照射后,叠氮基转变成活化的硝基

概述显性标记的应用范围

  所以,共显性标记,在揭示遗传多样性方面要比显性标记具有更大的优势。更为重要的是,SSR引物是以外显子保守序列为引物结合点,即以已知DNA序列为基础所开发的引物,在基因组上具有特定的位置,所以在QTL等分析上,应用极为广泛。  共显性:说白了就是可以分辨出纯和的跟杂合的

标记抗体的概念和应用

抗体经过酶标记、铁蛋白标记或通过胶体金标记获得标记抗体,是免疫电镜样品制备的一种方法,用于观察抗原抗体免疫复合物方面研究的手段。免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上,通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。抗体标记主要是用于抗原的