PriCells:原代血管内皮细胞、Angiogenesis、VEGF

PriCells: 原代血管内皮细胞、Angiogenesis、VEGF血管内皮细胞是位于循环血液与血管壁内皮下组织之间的单层细胞。血管内皮细胞在血栓与止血、血管新生、辐射损伤、炎症及免疫反应等一系列重要的病理生理过程起着重要的作用。脐静脉内皮细胞培养和鉴定方法:采用胰蛋白酶行脐静脉两次酶灌注消化法获取内皮细胞。分别在倒置相差显微镜、透射电镜下观察,SP免疫组化法行Ⅷ因子抗原鉴定。观察血管内皮细胞体外培养的生长情况,并绘制细胞生长曲线。血管内皮细胞生理功能1、内分泌功能:内皮细胞能通过膜受体途径感知血流动力学变化和血液传递的信号,并在接受物理和化学刺激后合成和分泌多种血管活性物质,这些介质在局部作用于血管,从而发挥生物学效应。 2、抗血栓作用:内皮细胞分泌的前列环素是强效的血小板聚集抑制剂。一些激活血小板的刺激物如二磷酸腺苷(ADP)、三磷酸腺苷(ATP)同时也刺激内皮细胞释放前列环素,从而抑制血小板栓子的形成。此外,内皮细胞......阅读全文

PriCells:-Questions

 Questions 1: Isolation of hepatocytes from other speciesThe basic two-step perfusion procedure can be used for obtaining hepatocytes from various r

PriCells:-Isolation-of-endothelial-progenitor-cells-(EPCs)

 PriCells: Isolation of endothelial progenitor cells (EPCs)    1. Twenty-four mL venous blood was collected at each time point into Vacutainer CPT M

PriCells:-原代血管内皮细胞、Angiogenesis、VEGF

PriCells: 原代血管内皮细胞、Angiogenesis、VEGF血管内皮细胞是位于循环血液与血管壁内皮下组织之间的单层细胞。血管内皮细胞在血栓与止血、血管新生、辐射损伤、炎症及免疫反应等一系列重要的病理生理过程起着重要的作用。脐静脉内皮细胞培养和鉴定方法:采用胰蛋白酶行脐静脉两次酶灌注消化法

原代细胞分离和培养基本步骤介绍

1、器官和组织的选择尽可能的去除不必要的组织和血迹。2、原代细胞的分离(1)应用PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III。(2)根据组织来源不同,可选用不同的PriCells原代细胞分离试剂盒。3、原代细胞的培养:(1)PriCells原代细胞特制培养基(2)PriCells原代细胞特制添

原代细胞分离和培养基本步骤

 1、器官和组织的选择    尽可能的去除不必要的组织和血迹。    2、原代细胞的分离    (1)应用PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III。    (2)根据组织来源不同,可选用不同的PriCells原代细胞分离试剂盒。    3、原代细胞的培养:    (1)PriCells原代

原代细胞分离和培养基本步骤

原代细胞分离和培养基本步骤 1、器官和组织的选择尽可能的去除不必要的组织和血迹。 2、原代细胞的分离(1)应用PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III。(2)根据组织来源不同,可选用不同的PriCells原代细胞分离试剂盒。 3、原代细胞的培养:(1)PriCells原代细胞特制培养基(2

原代细胞复苏的基本操作方法

PriCells: 原代细胞复苏的基本操作方法 一、实验准备(1)仪器:净化工作台、离心机、恒温水浴箱、倒置相差显微镜、培养箱、液氮冰箱(2)玻璃器皿:吸管(弯头、直头)、培养瓶、玻璃瓶(250ml、100ml)、废液缸(3)塑料器皿:吸头、枪头、胶塞、移液管(10ml)、15ml离心管、冻存管(1

组织源性正常大鼠原代心肌细胞培养实验方法

一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1×PBS(pH 7.4)+ 1% P/S4、染色液: 0.4

正常人原代角膜间质细胞的分离

正常人原代角膜间质细胞的分离实验材料:1. 完整的人角膜;2. GMF-Saline G;3. 中性蛋白酶Ⅱ;PriCellls原代细胞分离试剂盒4. L型胶原酶,1mg/ml在DMEM/F12/GASP中;5. GMF-Saline G配制的TrypLE Express或0.25%胰蛋白酶;6. 

正常大兔主动脉平滑肌细胞培养

实验材料:1. 正常大兔主动脉2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.23. 消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%胶原酶Ⅰ4. 细胞培养瓶(T25)5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊6. 网筛(100目)7. 离心管(15m

正常人脐静脉原代内皮细胞培养

PriCells -  正常人脐静脉原代内皮细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × P

正常小鼠原代脑星形胶质细胞培养

一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液

正常小鼠原代骨骼肌细胞培养

PriCells –正常小鼠原代骨骼肌细胞培养 一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS

原代细胞复苏的基本操作方法

一、实验准备 (1)仪器:净化工作台、离心机、恒温水浴箱、倒置相差显微镜、培养箱、液氮冰箱 (2)玻璃器皿:吸管(弯头、直头)、培养瓶、玻璃瓶(250ml、100ml)、废液缸 (3)塑料器皿:吸头、枪头、胶塞、移液管(10ml)、15ml离心管、冻存管(1~2ml) (4)其他物品:微量

原代细胞复苏的基本操作方法

一、实验准备(1)仪器:净化工作台、离心机、恒温水浴箱、倒置相差显微镜、培养箱、液氮冰箱(2)玻璃器皿:吸管(弯头、直头)、培养瓶、玻璃瓶(250ml、100ml)、废液缸(3)塑料器皿:吸头、枪头、胶塞、移液管(10ml)、15ml离心管、冻存管(1~2ml)(4)其他物品:微量加样枪、红血球计数

正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养

一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液

无血清培养基一些基本配方

PriCells-无血清培养基一些基本配方 1、基本适应于神经细胞,干细胞,PC12细胞 葡萄糖          0.6%  谷氨酰胺         2mM  NaHCO3           3mM  Hepes            5mM  胰岛素      2.5mg/ml  转铁蛋白 

原代细胞传代基本技术

1. 选用原代细胞生长状态好(90-95%),生长数量大于5×10⁵进行传代。2. 吸除原代细胞培养液。用含双抗的1×PBS(pH7.4)清洗细胞培养瓶2次。3. 3ml细胞消化液加入细胞培养瓶,轻轻摇动,使细胞消化液覆细胞培养瓶底。(建议使用赛奥斯的原代细胞消化液。)4. 细胞培养瓶置于5%CO2

正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养

PriCells: 正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养实验材料:1. 人胎盘;2. PBSA/GASP:含抗生素的PBSA(庆大霉素,50μg/ml;两性霉素B,1.25μg/ml;链霉素100μg/ml;青霉素100U/ml);3. 丙三醇;4. 含50%丙三醇的DMEM;5. 胰蛋白酶/EDT

利用Hoechst-33342外流性质分选原代角膜间质干细胞

利用Hoechst 33342外流性质分选原代角膜间质干细胞试剂和材料:1. 2—4代的间质细胞;2. HBSS/2FB;3. Hoechst 33342染料,1mg/ml水溶;4. 碘化丙啶(PI),2mg/ml水溶;5. 维拉帕米,500μg/ml水溶;6. DEME/2FB;7. 胰蛋白酶/T

原代细胞鉴定技术

PriCells-原代细胞鉴定技术 一、形态学鉴定1. 在倒置显微镜中直接观察活细胞的形态学特征2. 细胞染色检查 :a) 将无菌玻片置于细胞培养皿中,加细胞悬液后培养;b) 待细胞长满玻片后取出,用PBS清洗,之后放于载玻片上,待其自然干燥;c) 用PBS/甲醇(1:1)固定15分钟;d) 弃固定

细胞培养-+-ELISA的结合产物:ELISPOT技术

PriCells-细胞培养 + ELISA的结合产物:ELISPOT技术 ELISPOT(Enzyme-Linked Immunosorbent SPOT, 酶联免疫斑点法):是一种体外检测特异性抗体分泌细胞和细胞因子分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术,是ELISA技术和细胞培养技术结合而发展的新型

小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞

PriCells-小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞 基本原理活细胞(密度较小)和死细胞(密度较大)密度不同,从而有助于将活的淋巴细胞和红细胞分离。 附加材料高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸钠;Pharmacia LKB)或Lympholyte-M(Cedarlane)

正常小鼠腹股沟脂肪垫获取脂肪源干细胞

PriCells: 正常小鼠腹股沟脂肪垫获取脂肪源干细胞实验材料:1. Hank’s缓冲盐溶液(HBSS);2. ASC培养基:含10%胎牛血清的DMEM,添加1%的P/S;3. 胶原酶溶液:100ml Hank’s缓冲盐溶液中加入1g牛血清白蛋白和0.1gⅡ型胶原酶;4. 聚乙烯吡咯酮碘溶液;5.

磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞

PriCells: 磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞 基本方案用AUTOMACS系统进行总T细胞、CD4+细胞或CD8+T细胞的自动分离 实验材料1、小鼠2、HBSS洗涤缓冲液3、MACS缓冲液4、磁珠5、RPMI-10完全培养基6、AUTOMACS系统和分选柱7、30μm尼龙网或40μm预分离滤膜 实

动物胸腺上皮细胞的培养

  正常动物胸腺上皮细胞的培养   实验材料:   1. 胸腺上皮细胞来源;一般取材小鼠或手术切取的儿童之胸腺;   2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;   3. 有血清培养液:可使用RPMI1640培养液,添加10%

原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化

 原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化  PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化  原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。  在体外培养原代细胞时,为了保

原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化

PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性,要求采用