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复苏冻存细胞实验

实验方法原理快速复苏细胞,缓慢稀释,以高细胞密度重新接种(图20.9)。实验步骤材料无菌培养瓶(如果需要离心时)生长培养基吸量管,1ml,10ml注射器和19号针头(如果你使用玻璃冻存管)非灭菌保护性手套和面罩37℃无菌水,10cm深,盛于清洁、用乙醇擦拭过的带盖的水桶中镊子70%乙醇棉签1%萘黑(酰胺黑)或0.4%台盼蓝操作步骤1.检查冻存目录,确定将要复苏的冻存管的位置2.收集所有材料,准备培养基,标记培养瓶3.从冻存罐中取出冻存管,检查标签,确定是否是所需要的冻存管,若小管未浸没在液氮中,将小管放入塑料除菌水桶内37℃的烧杯中。尽可能避免水没过官帽,因为会增加污染的机会。安全提示将冻存管从液氮中取出时,必须穿实验衣,戴手套。若冻存管浸没在液氮中,则必须待面罩或护目镜,也必须穿实验衣戴手套。储存在液氮中的冻存管,包括塑料小管都可能吸入液氮,复苏时将可能发生剧烈爆炸。该种情况下,必须使用带盖的塑料水桶进行复苏,以控制爆炸。4.......阅读全文

复苏冻存细胞实验

实验方法原理快速复苏细胞,缓慢稀释,以高细胞密度重新接种(图20.9)。实验步骤材料无菌培养瓶(如果需要离心时)生长培养基吸量管,1ml,10ml注射器和19号针头(如果你使用玻璃冻存管)非灭菌保护性手套和面罩37℃无菌水,10cm深,盛于清洁、用乙醇擦拭过的带盖的水桶中镊子70%乙醇棉签1%萘黑(

复苏冻存细胞实验

方案20.2 复苏冻存细胞实验             实验方法原理 快速复苏细胞,缓慢稀释,以高细胞密度重新接种(图20.9)。

细胞冻存和复苏实验

细胞冻存和复苏             实验方法原理 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种

细胞冻存和复苏实验

细胞冻存和复苏可以:(1)用于生物学保种;(2)用于医学上干细胞研究;(3)用于传代培养。实验方法原理细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减

细胞冻存和复苏实验

细胞冻存和复苏             实验方法原理 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种

细胞冻存与复苏实验

实验原理:冻存和复苏的原则:慢冻快融。当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重

细胞的冻存与复苏实验_液氮冻存法

实验方法原理目前长时间保存细胞的方法是将细胞低温冻结保存在液氮中(-196 ℃),保存时间可长达一年甚至几年,用时解冻,大多数细胞仍能生长繁殖,为妥善起见,细胞冻存一年后应复苏培养后再冻存。冻存细胞时应加入保护剂,否则,细胞内外的水会结成冰晶,使细胞发生机械损伤。加入保护剂后,可使冰点降低,在缓慢冻

细胞冻存与复苏

细胞冻存1. 实验前准备:细胞室及工作台紫外线照射15min;培养液、PBS、胰酶、小牛血清、DMSO、恒温水浴箱37℃预热备用;收集对数生长期细胞,在冻存前一天最好换液2.用吸管吸出培养瓶中的细胞培养液,PBS清洗2遍吸出冲洗液,加入适量胰蛋白酶消化。3. 适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。吸管

冻存细胞的复苏

            实验方法原理 冻存细胞应在流水中快速融化并加入生长培养液。实验者应配戴护目镜和手套,因为曾浸没在液氮中的冻存管中可能漏人液氮,而当融化冻存液时冻存管中的气体温度上升可导致爆炸。 实验材料

冻存细胞的复苏

实验方法原理 冻存细胞应在流水中快速融化并加入生长培养液。实验者应配戴护目镜和手套,因为曾浸没在液氮中的冻存管中可能漏人液氮,而当融化冻存液时冻存管中的气体温度上升可导致爆炸。实验步骤 1) 调整水龙头温度为 40°C,在龙头下放置一广口烧杯。2) 从液氮中取出冻存细胞的冻存管。3) 将冻存管置于