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3H胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

实验方法原理细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。实验步骤材料无菌培养细胞生长液0.25% 粗制胰蛋白酶D-PBSA3H-胸腺嘧啶脱氧核苷,2.0MBq/ml (约 50uCi/ml),75 GBq/mmol (约 2Ci/mmol)安全提示 处理 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷时要谨慎, 因为它是放射活性物质和基因产物!要遵照当地指南操作(见 7.7 节)。多孔培养板,内含 13 mmThermanox 盖片(Nalge Nunc)非无菌血球计数板或电子计数器D-PBSA醋酸甲醇(1 份冰醋酸加入 3 份甲醇),冰冷,新鲜配制显微镜载片封胶(如 DPX 或 Permount)三氯乙酸(TCA ),0.6mol/L ,冰冷去离子水甲醇操作步骤1. 在装有盖片的 24 孔培养板中,以 2X104~5X104 个/ml 培养细胞。2. 待......阅读全文

3H-胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

经验交流(0) 实验方法原理 细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。 实验步骤 材料 无菌 培养细胞 生长液 0.25% 粗制胰蛋白酶 D-PBSA 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷

3H-胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

实验方法原理 细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。 实验步骤 材料 无菌 培养细胞 生长液 0.25% 粗制胰蛋白酶 D-PBSA 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷,2.0MBq/ml (约 50uC

方案21.11 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

            实验方法原理 细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。 实验步骤

H-胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

实验方法原理 细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。 实验步骤 材料 无菌 培养细胞 生长液 0.25% 粗制胰蛋白酶 D-PBSA 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷,2.0MBq/ml (约 50uC

DNA裂解分析实验_JAM分析

实验材料 细胞 试剂、试剂盒 胸腺嘧啶脱氧核苷HBSSPBSEDTA 仪器、耗材 新鲜培养基组织培养板 实验步骤 1. 实验前一天,将细胞接种于新鲜培养基。对数生长期细胞可更好地渗入 [3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷。 2. 收获细胞,在新鲜培养基中以 1

人溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒

人溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒   原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 BrdU 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 BrdU与单抗结合,加入生物素化的抗人BrdU,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加

3H胸腺嘧啶核苷掺入检查法

实验概要3H胸腺嘧啶核苷(3Hthymidine,3HTdR)掺入试验,是体外淋巴细胞转化试验较客观、重复性好、结果准确的方法之一。实验原理当淋巴细胞受分裂原(PHA等)或特异性抗原刺激发生转化时,必然伴有DNA的大量合成,若将具有放射性的3HTdR加到培养液内,则可被作为合成DNA的原料而摄入转化

3H胸腺嘧啶核苷掺入检查法

实验概要3H胸腺嘧啶核苷(3Hthymidine,3HTdR)掺入试验,是体外淋巴细胞转化试验较客观、重复性好、结果准确的方法之一。实验原理当淋巴细胞受分裂原(PHA等)或特异性抗原刺激发生转化时,必然伴有DNA的大量合成,若将具有放射性的3HTdR加到培养液内,则可被作为合成DNA的原料而摄入转化

细胞增殖的密度限制实验

实验方法原理 细胞在无限制培养基中培养,生长至包和密度。用放射自显影测定 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。 实验材料 传代用的细胞                                                           试剂、试剂盒

方案18.3 细胞增殖的密度限制实验

            实验方法原理 细胞在无限制培养基中培养,生长至包和密度。用放射自显影测定 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。 实验材料