WIKI资讯
WIKI资讯
一）用CSCL-E.B.梯度分离大肠杆菌中质粒DNA、染色体DNA、蛋白质及RNA的详细步骤（1） 溶液制备：溶液Ⅰ：50mM葡萄糖，10mM EDTA,25 mM Tris-HCL (PH8.0)。溶液Ⅱ：0.2M NaOH，1%SDS。溶液Ⅲ：3M醋酸钠（PH4.8）TE缓冲液：10 mM Tris-HCL (PH7.4)，2mM EDTA（2）E.coli培养液1升。（实验应用时可按比例增加或减少）（3）将1L培养液在4000rmp（约20000xg），5℃离心20分钟，得到细菌沉淀。（4）用100ml冷的溶液Ⅰ洗沉淀，再离心，4000rmp，5℃离心20分。（5）用20ml冷的溶液Ⅰ将第二次沉淀调成均匀悬浮液。（6）每ml加入2mg溶菌酶，并在0℃冰中放置10分钟。（7）加入40ml溶液Ⅱ，轻轻搅拌后在冰浴中置5分钟。（8）加入30ml溶液Ⅲ，在冰浴中放置20分钟，使蛋白质大部分沉降。（9）在高速冷冻离心机上，用角式转头......阅读全文
Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。一、原理与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被
实验概要本实验介绍了氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法(即连续梯度法)纯化闭环DNA的原理及操作步骤等。实验原理用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法，取决于线性 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。许多年来，纯化大量质粒 DNA 的首选方法是
用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法，取决于与线状 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。连续梯度法实验方法原理用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法，取决于与线状 DN
连续梯度法 不连续梯度法 实验方法原理 用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒
质粒的制备可以用于（1）携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体，它在基因操作中具有重要作用；（2）质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术。实验方法原理在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中，细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开，而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状态。将pH调
关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题，包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈，关于包涵体的处理一般包括这么几步：菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化，内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌？ 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎
实验中的一些好习惯加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均移液枪用完之后要归到最大计量的位置，防止久而久之弹簧失去弹性一定要记着关水浴箱，切记切记多和大家讨论，同时多关注别人讨论的经验，这几乎是最快提高的捷径了所有的试剂都自己配，出了问题才好找原因防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器
实验材料:小麦 试剂、试剂盒:β-巯基乙醇 &nb
一、防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr或更长时间。2. 塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用lv 仿冲洗（注意：有机玻璃器具因可被lv 仿腐蚀，故不能使用）。3. 有机玻璃的电泳槽等，可先用去污剂洗涤，双蒸水冲洗，乙醇干燥，再浸泡在3% H2O2
Real-time PCR实验注意事项实验中的一些好习惯加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均移液枪用完之后要归到zui大计量的位置，防止久而久之弹簧失去弹性一定要记着关水浴箱，切记切记多和大家讨论，同时多关注别人讨论的经验，这几乎是zui快提高的捷径了所有的试剂都自己配，出了问题才好
实验概要本实验详细介绍了显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程。实验原理转基因小鼠制备的基本原理是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射法注入供体小鼠的受精卵(或着床前胚胎细胞)，然后将此受精卵(或着床前胚胎细胞)再植入受体动物的输卵管(或子宫)中，使其发育成携带有外源基因的转基因动物，通过分
用以上公式算出的离心时间和实际离心结果非常接近。从公式可以看出T反比子（N4、r2），显然在CsCl不结晶析出的前提下提高（N4、r2）将会减少离心时间,而增加转速的效果特别明显。但是对于某些较低转速转头（如 65,000rpm以下）CsCl自形成梯度所需时间过长（10小时）以上，因此质粒DNA纯样
一、简述近代质粒DNA分离纯化以从大肠杆菌中分离为代表，鉴于大局杆菌（E.coli）在分子生物学研究中的重要地位，从E.coli中分离纯化质控DNA〈Piasmid DNA〉成为近年来超离心技术中一个重要课题。而质粒DNA的快速分离纯化又对超离心设备（超速离心机、转头和附属设备）提出了更高要求。E.
一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合
实验材料 载体和酵母菌 试剂、试剂盒 缓冲液和溶液 SD
用 CsCl，Percoll, Nycodenz, metrizamide作自形成密度梯度离心一）概述：近年来用重金属盐（主要是 CsCl）分离生物大分子的平衡等密度离心；用 Percoll（由瑞典 pharmacia-Biosystems AB开发的胶体硅材料，即在硅颗粒外包覆 PVP塑料
幽门螺杆菌研究进展幽门螺杆菌及其感染 1 概述 胃细菌学的研究，长期来是一个被忽视的领域。1983年Marshall和Warren从慢性活动性胃炎患者胃粘膜活检标本中分离到幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）是对这一领域重要的突破。此后不久即在国际消化病学界引起了巨大轰动，
1、核酸抽提原理 简单地讲，核酸抽提包含样品的裂解和纯化两大步骤。裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程，纯化则是使核酸与裂解体系中的其它成分，如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。 经典的裂解液几乎都含有去污剂 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等
我们将方案分成三个阶段: 第一阶段介绍蛋白质的制备及蛋白质的荧光染料标记；第二阶段，通过转染或微注射将适当的探针成分导入细胞；第三阶段，图像的收集和分析过程。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料进行转染的细胞株按第二阶段所介绍的方法制备
实验离心机技术新进展：设备：近二十年离心机的转速、离心力加速度、容量、使用寿命，都有了很大提高，在驱动器、转头、电子、电器空控制、制冷系统、整机配置及附件等各方面都有了长足进步。至今，我们可以说，对于已知或未知的生物体组份，用实验离心设备进行分离纯化已经没有太多困难。现代离心设备除了直接按照使用者要
当我们已经获得目的基因片段，选择好适当的克隆（或表达，转化）质粒载体， 并确定重组方案后，下面要进行的就是ＤＮＡ片段之间的体外连接，从而获得重组子。 此重组子可转入相应的宿主菌中用于对目的基因的扩增以及目的基因表达（如现代基因工程药物的生产），还可用于序列分析和转基因等重要生物技术的研究中。&nbs
五、沉降系数的近似计算（Ⅰ）利用速率一区带密度梯度离心作沉降系数的近似计算；用超速（ 40000~42000转/分）细长离心管（ 10~13毫升，离心管长 9~10厘米）选用线性梯度或凸指数梯度（可以提高在较高密度区的分辨率）。测定样品在相同的离心条件下（温度、转速、加减速速率，转头、离心管样品量，
转头：突出的改进表现在经计算机计算优化后的轻型转头；碳纤维材料制造的超速和大容量超轻转头；适用于生物大分子（DNA，RNA，蛋白等）离心分离用的小倾角转头（固定倾角 7°~10°）；超高速，特大离心力转头等等。 铝合金制造的轻型大容量转头：以往的6×500ml 角转头自重24kg 以上，经
一、引言在八十年代以前，生物大分子（特别是核酸、蛋白）用离心方法分离纯化占有很重要的地位。用分析超离心方法测定生物大分子的分子量、沉降系数、扩散系数、微分比容等在生物化学实验中也占有一席之地。八十年代以后，由于离心技术的快速发展（微处理器的引入，变频驱动的完善、转速的提高等等），先进的制备用超速离心
实验材料小麦试剂、试剂盒β-巯基乙醇氯仿异戊醇SSTE 缓冲液仪器、耗材SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验步骤3.1 芯片背景我们使用了 19846 个点，包含 9246 个 Unigene 序列的小麦 cDNA 芯片（http://www . cerealsdb. uk. net/index. htm
实验材料 进行转染的细胞株 按第二阶段所介绍的方法制备表达了蛋白质探针的细胞 试剂、试剂盒
分子杂交技术 互补的核苷酸序列通过Walson-Crick 碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA 分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DN
构建载体 实验方法原理 在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中，细菌的线性大分子量染色体DN
实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒，其基因组含有一段外源核酸序列，通常为编码目标蛋白质的dDNA，在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成
细胞治疗是将细胞转移到一个病人身上，其目的是改善或治疗疾病。细胞治疗策略包括分离和转移特定的干细胞群，执行效应细胞，诱导成熟细胞成为多能性细胞，以及成熟细胞的重新编程。 基因治疗是一种新的治疗手段，是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗目的。即将外源基