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实验方法原理 无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤 材料：无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS，见附录 I)，装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS：50 ml 盛于无菌烧杯中，用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮氏培养皿 非灭菌材料孵化 10 天的受精卵70%乙醇棉签 孵箱（非 C02) 操作步骤1. 在湿润的环境中于 38.5℃：条件下孵卵，每天转动 180°，然鸡卵孵育也需要 20?21 天，但它们的发育阶段不同于鼠胚。分离整个胚胎进行细胞培养，需在大约第 8 天时进行。若分离器官则大约在第 10?13 天（在英国第 10 天是要许可证的最后期限）。2. 用 70% 乙醉棉签消毒鸡卵，钝端向上放于小烧杯内（图 12.4a）。3. 用无菌镊打破卵壳（图 12.4b）, 剥离卵壳直到气旗的边缘（图 1......阅读全文
实验方法原理 本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长，经培养后，产生肉眼可见的白色痘疱样病变，似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内，生长后，鸡胚全身皮肤出现出血点，以脑后最显著。实验材料 痘苗病毒（Vavvinia virus）
一、目的要求掌握鸡胚尿囊腔接种培养新城疫病毒的操作技术。二、器材1.鸡胚 应选用健康鸡群的受精蛋，接种鸡的鸡胚应无母源抗体，以免影响病毒在胚胎中的增殖。实验用的鸡胚多采用9—10日龄的活胚。2.接种材料 新城疫I系疫苗3.各种器械 孵卵器、照蛋箱、蛋架、打孔器、1ml结核菌素注射器、41/2号注射针
实验方法原理本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长，经培养后，产生肉眼可见的白色痘疱样病变，似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内，生长后，鸡胚全身皮肤出现出血点，以脑后最显著。实验材料痘苗病毒（Vavvinia virus）鸡新城疫病毒（
目的意义：了解禽源病毒鸡胚培养的意义及用途掌握病毒鸡胚培养的基本方法基本原理：鸡胚培养是培养某些病毒常用方法,此方法可用于某些病毒的分离、增殖、毒力滴定、中和试验及生产疫苗等。病毒接种鸡胚的途径有多种，主要有卵黄囊接种、绒毛尿囊腔接种、绒毛尿囊膜接种、羊膜腔接种途径等，应根据需要选择适当的途径。器材
病毒的鸡胚培养可用于：（1）某些病毒分离、增殖；（2）病毒的毒力测定、中和试验；（3）生产疫苗等。实验方法原理 羊膜腔接种主要应用于从临床材料（如患者咳嗽液等）分离流感病毒等。这种接种途径可直接感染羊膜腔的内胚层，也可被鸡胚咽下或吸入，引起全胚胎感染。另外，病毒也可被排泄到尿囊腔中，使尿囊
病毒必须在易感的活细胞内才能增殖，因此，根据不同病毒选择敏感动物，离体组织细胞和鸡胚进行分离培养。实验方法原理鸡胚培养方法操作简便，适用于流感病毒，痘病毒，疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种，即绒毛尿囊膜接种法，羊膜腔（羊水囊）接种法，尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不
一、标本的采集与处理（一）标本的采集1、病毒分离标本的采集病毒分离成功与否很大程度上取决于采集标本的质量，及其保存、运输等环节。多数标本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次为气管和支气管分泌物，有时也采用肺活检材料等。标本采集后应立即放入适当的采样液中低温保存，常用的采样液为：普通肉汤，pH7.4-7.6的
实验方法原理 羊膜腔接种主要应用于从临床材料（如患者咳嗽液等）分离流感病毒等。这种接种途径可直接感染羊膜腔的内胚层，也可被鸡胚咽下或吸入，引起全胚胎感染。另外，病毒也可被排泄到尿囊腔中，使尿囊腔中含有大量病毒。因此，在用羊膜腔接种分离病毒时，除可收获羊水以外，还可收获尿囊液。实验材料 鸡胚试剂、试剂
薛社普 著名细胞生物学家、实验胚胎学家和生殖生物学家，中国医学科学院研究员、北京协和医学院教授。广东新会人，1917年出生，1943年毕业于重庆中央大学博物系，1951年获美国华盛顿大学（圣路易斯）理科哲学博士学位。1991年当选为中国科学院院士。对细胞分化规律及其可调控性提供了重要理论依据；为
实验方法原理50% 终点 (50% endpoint) 法是将病毒悬浮液经一系列稀释后，接种至动物、鸡胚或培养成单层的细胞，将每个稀释度造成的动物、鸡胚致死量或细胞病变做成曲线，找出造成 50% 动物、鸡胚死亡或细胞病变的终点稀释度。 LD50 (50 % Lethal dose) 为造成 50%动
当下我国正处于新型冠状病毒2019-nCoV疫情发展阶段，该病毒感染主要会造成的新型的急性肺炎症状（WHO已将其名为NCOVID19），疫情已在全国范围内肆虐超过20天，对我国民生健康和经济造成极大影响。目前网上涌现多篇关于新型冠状病毒2019-nCoV实验室检测技术的文章，文章质量水平千差万别
一、血液学检查 病毒感染相关的血液学检查主要包括血常规、血生化以及其他针对性的检测项目，相关指标为临床常用的病毒感染诊断指标，为疾病的辅助诊断提供依据。 1、血常规 血常规中的许多项具体指标都是一些常用的敏感指标，对机体内许多病理改变都有敏感反映，其中又以白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白和
当下我国正处于新型冠状病毒2019-nCoV疫情发展阶段，该病毒感染主要会造成的新型的急性肺炎症状（WHO已将其名为NCOVID19），疫情已在全国范围内肆虐超过20天，对我国民生健康和经济造成极大影响。目前网上涌现多篇关于新型冠状病毒2019-nCoV实验室检测技术的文章，文章质量水平千差万别
◇水解乳蛋白 水解乳蛋白为淡黄色粉末，虽易潮解结块，但不影响使用。 不同批号和牌号质量有差异。水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解后的产物，含有丰富的氨基酸。开始时它是专为猴肾细胞培养设计的，而实际上它对许多细胞系(株)，如Hela细胞和原代细胞都是一种优良培养基。使用时用Hanks液配制成0
实验方法原理 无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。 实验步骤 材料：无菌材料DBSS: 取材用
实验方法原理组织培养是目前培养病毒应用最广的一种培养方法，其优点是①经济适用，结果正确且敏感；②较实验动物易于控制。原代细胞单层培养法，是指动物（包括脊椎动物和无脊椎动物）的组织自机体取出后，经胰酶或其他细胞分散剂消化处理，得到单个细胞悬液。以一定量接种到特定容器中，加入细胞生长所必需的营养液，置合
实验方法原理绒毛尿囊膜接种常用于牛痘病毒、天花病毒、单纯疱疹病毒的分离，因为这些病毒在绒毛尿囊膜上可形成肉眼可见的斑点状或痘疱状病灶。另外，病毒可在绒毛尿囊膜上进行滴定，因为感染性病毒颗粒的数目可以通过产生的斑和痘的数目来计算。该方法还可用于抗病毒血清的滴定试验，即在有抗体存在的情况下，痘疱形成受到
实验方法原理卵黄囊接种法主要用于虫媒病毒、衣原体及立克次体等的分离和繁殖。这些大的病原体主要在卵黄囊的内皮细胞生长，且生长速度很快，立克次体在染色后也可看到。实验材料鸡胚试剂、试剂盒消毒剂 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精）仪器、耗材检卵灯照明灯卵杯卵盘鸡胚开孔器等实验步骤1. 接种步骤与方法(1
实验方法原理 实验材料 小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液（PBS)冰冷β-半乳糖苷酶固定剂β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液β-半乳糖苷酶染色液仪器、耗材 5 mL或10 mL的聚苯乙烯或聚丙烯帽盖的试管或1.5〜2 mL的离心管转动平台染色用密闭箱附有盖玻片的下陷载玻片或箱式载玻片
“喂好傲娇的细胞，口粮选择很重要”培养基供给细胞营养，促使细胞增殖，也是细胞赖以生长的环境。细胞要吃什么？选择什么样的培养基？是细胞培养能否成功的重要因素经典培养基包括MEM、DMEM、RPMI1640、DMEM：F12McCoy's 5A 、M-199 它们各自有什么成分？适用于什么细胞？
一、什么是禽流感？禽流感（AI）是由A 型流感病毒（AIV ）引起的禽类疾病综合症。禽类感染AIV 后表现为：轻度上呼吸道感染、精神萎缩、食欲减退，有类似人类A 型流感的症状。初期还会引起肉用鸡停止增重，蛋鸡产蛋量大大下降，种蛋孵化率下降等。发病很急，很短时间就会发展到全身致死性疾病综合症。AIV
病毒学的研究初期，由于当时人们在显微镜下观察不到病毒粒体，加之病毒又不能进行人工培养，因而分离到病毒对于明确病毒的生物学特性显得十分重要。在当时尚无高速离心机的情况下，人们试图用马力离心机来从病组织中分离病毒。直到高速和超速离心机问世后，人们才有可能依据病毒学性分离和制备病毒。时至今日，病毒的分离，
实验方法原理鸡胚浸出液内含有生长因子、大分子核蛋白和小分子氨基酸等，有刺激细胞生长作用，为早年培养使用的培养用液，现已被合成培养液所代替，但在某些研究中仍有一定应用价值。实验材料鸡卵试剂、试剂盒酒精碘酒BSS仪器、耗材孵化箱烧杯注射器离心机实验步骤1. 孵化选健康受精鸡卵，置入37 ℃温
3.1.3 讨论 使用 Sepharose 4FF分子筛分析柱对浓缩液进行分析，快速检定浓缩液中杂质的残留，并比较病毒和杂质的分离情况，结果见图 5所示。 使用两种不同的超滤膜进行浓缩，所得浓缩液中病毒颗粒的积分面
半乳糖苷酶活性的整体封片染色和免疫组化检测 准备大组织的厚切片进行β-半乳糖苷酶染色 实验方法原理
实验方法原理无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤材料：无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS，见附录 I)，装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS：50 ml 盛于无菌烧杯中，用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮氏培
实验方法原理 背根神经节(dorsalrootganglion,DRG)细胞起源千神经峙，外源性神经营养因子(NGF)能刺激DRG细胞生长发育并形成广泛的神经网络。目前，利用培养的DRG细胞进行轴突生长发育的研究，是最为经典和常用的方法之一。实验材料 孵化8-12d的鸡胚。孕15d及新生1-3d的大
实验方法原理 研磨用胶原蛋白处理的整块骨骼肌，以分散为单肌纤维。在 Matrigel 上培养单肌纤维，然后收集迁出的细胞。实验材料 MatrigelDMEM L-谷氨酰胺Ⅰ型胶原蛋白试剂、试剂盒 青霉素和链霉素混合液鸡胚提取液马血清胎牛血清接种培养液增殖培养液仪器、耗材 Petri培养皿改良Past
实验方法原理 不同大小和比重的粒子在沉降速度上存在差别，沉降速度差别（相差）在一个或几个数量级的粒子，可用本法分离提取。实验材料 待纯化的病毒试剂、试剂盒 无仪器、耗材 差速离心机实验步骤 将被分离的样品交替进行低速离心与高速（或超速）离心。差速离心适用于从组织培养液、鸡胚尿囊液或经过红细胞吸附－释
一、两栖纲蛙与蟾蜍与人类的关系疏远、个体小、易于饲养。有冬眠、体外受精繁殖。蛙在发育过程中呼吸系统的鳃转变成肺。蟾蜍的皮肤薄，有毒腺能分泌蟾蜍素，特别是耳下腺分泌量最多。蛙的离体心脏常为生理、药理研究心脏生理、药物作用的标本。腓肠肌坐骨神经标本可作神经肌肉试验。刺激蛙的皮肤可观察反射弧的