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用端粒酶诱导人类间充质干细胞永生化实验

端粒酶对染色体的稳定性及决定细胞生命周期起极其重要的作用,主要用于(1)转基因技术的发展(2)基因诱导表达。实验方法原理1. 从动物或人组织中提取的细胞,在体外培养中,细胞会有不同程度的分裂增殖,称为增殖性衰老 。但是有些细胞在自发或其他条件诱导下可突破增殖性衰老,拥有无限增殖的能力,成为永生化细胞,骨髓来源的间充质干细胞属于多能干细胞,可作为组织工程种子细胞的来源。2. 端粒酶对染色体的稳定性及决定细胞生命周期起极其重要的作用。端粒酶或末端转移酶是由两个主要的亚单位构成:RNA成分(hTR)和蛋白质分解亚单位(hTERT),RNA(hTR)亚单位普遍表达于正常和肿瘤组织中,而蛋白质分解亚单位(hTERT)仅在肿瘤细胞、生殖谱系细胞及激活的淋巴细胞中表达。3. 细胞衰老机制现在管遍接受的是细胞衰老两阶段模型-M1/M2模型,细胞在生长过程中,经过多次分裂后,在肿瘤抑制因于p53和pRb等作用下,细胞对生长因子的反应消......阅读全文

用端粒酶诱导人类间充质干细胞永生化实验

端粒酶对染色体的稳定性及决定细胞生命周期起极其重要的作用,主要用于(1)转基因技术的发展(2)基因诱导表达。实验方法原理1. 从动物或人组织中提取的细胞,在体外培养中,细胞会有不同程度的分裂增殖,称为增殖性衰老 。但是有些细胞在自发或其他条件诱导下可突破增殖性衰老,拥有无限增殖的能力,成为永生化细胞

用端粒酶诱导人类间充质干细胞永生化实验

            实验方法原理 1. 从动物或人组织中提取的细胞,在体外培养中,细胞会有不同程度的分裂增殖,称为增殖性衰老 。但是有些细胞在自发或其他条件诱导下可突破增殖性衰老,拥有无限增殖的能力,成

用端粒酶诱导人类间充质干细胞永生化实验

            实验方法原理 1. 从动物或人组织中提取的细胞,在体外培养中,细胞会有不同程度的分裂增殖,称为增殖性衰老 。但是有些细胞在自发或其他条件诱导下可突破增殖性衰老,拥有无限增殖的能力,成

用端粒酶诱导人类间充质干细胞永生化实验

实验步骤材料 无菌生长培养基:含高浓度葡萄糖(4.5 g/L)的 Dulbecco's modifiled Eagle's 培养液(DMEM),添加 L-谷酰胺 2 mmol/L、10% 胎牛血清、100U/mL 青霉素及 100 μg/mL 链霉素聚凝胺: 8 mg/mL

神秘的间充质干细胞4

功能强大的间充质干细胞间充质干细胞是一种非常好的可用于移植的成体干细胞。首先,它和造血干细胞一样,主要来源于骨髓,易于获得;其次,它也很容易被分离出来,目前有非常经典的方法来分离它;第三,间充质干细胞在体外培养不易自动分化(人的间充质干细胞在12代以内可以保持核型正常,并保持很强的端粒酶活性);第四

间充质干细胞的传代

实验概要间充质干细胞的传代主要试剂DPBS、0.05%的Trypsin、间充质干细胞培养液主要设备15 mL离心管、培养皿、离心机、培养箱、倒置显微镜实验步骤(1)37℃预热间充质干细胞培养液和0.05%胰蛋白酶胰蛋白酶。(2)弃掉旧培养液,加入室温放置的DPBS洗一遍,尽可能将残留的培养液洗净,吸

间充质干细胞(MSCs)鉴定

实验方法原理实验材料MSCs                                       &n

间充质干细胞(MSCs)鉴定

实验材料MSCs试剂、试剂盒无菌CCMPBSA0.85%台盼蓝盐溶液胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材聚丙烯离心管15 ml或50 ml塑料组织培养皿直径15 cm移液器枪头非灭菌结晶紫溶液蒸馏水改良的Neubauer血细胞计数器移液器实验步骤(a)进行MSCs收集和传代。对悬液中的剩余细胞重新计数以确保

间充质干细胞的复苏

实验概要间充质干细胞的复苏主要试剂间充质干细胞培养液主要设备15 mL离心管、水浴锅、培养箱、离心机实验步骤(1)在15 mL离心管中准备9倍于冻存细胞悬液体积的间充质干细胞培养液。(2)在37℃水浴锅将冻存管中细胞悬液融化,迅速滴入事先准备好的离心管。(3)室温1000 r/min离心3 min,

间充质干细胞(MSCs)鉴定

            实验方法原理 实验材料 MSCs 试剂、试剂盒