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KinExA分子和细胞相互作用仪与SPR的技术对比(二)

四、案例案例一:完整细胞的相互作用检测<背景>:单克隆抗体XMetA是胰岛素受体(IR)变构部分的激动剂,其激活代谢Akt激酶信号通路,而对有丝分裂胞外信号调节激酶(ERK)信号通路几乎没有影响。为了研究这种选择性信号通路的性质,作者验证了XMetA对CHO细胞中IR,Akt和ERK的特异性磷酸化和活化的影响。<目的>:完整细胞亲和力检测。<方法>:研究者将表达短链型(IR-A)及长链型(IR-B)胰岛素受体的不同浓度CHO细胞分别与XMetA孵育,通过离心获得游离的XMetA,用KinExA仪器检测亲和力。另外,作者采取同样的策略,用KinExA仪器检测胰岛素与CHO细胞表面IR-A,IR-B的亲和力。<结论>:XMetA与IR-A亚型的亲和力为55±16pM,与IR-B亚型的亲和力为50±11pM。另外,在对照抗体组,胰岛素与IR-A亚型的亲和力为156±14pM;在XMetA......阅读全文

KinExA分子和细胞相互作用仪与SPR的技术对比(二)

四、案例案例一:完整细胞的相互作用检测:单克隆抗体XMetA是胰岛素受体(IR)变构部分的激动剂,其激活代谢Akt激酶信号通路,而对有丝分裂胞外信号调节激酶(ERK)信号通路几乎没有影响。为了研究这种选择性信号通路的性质,作者验证了XMetA对CHO细胞中IR,Akt和ERK的特异性磷酸化和活化的影

KinExA分子和细胞相互作用仪与SPR的技术对比(一)

一、背景:Sapidyne Instruments Inc.于1995年在美国创立,产品基于独特的Kinetic Exclusion Assay(KinExA®)专利技术。在公司成立早期,Xavier大学、美国陆军和环境保护局等研究单位采用KinExA技术开展了大量工作;经过数十年在生物制药领域、科

KinExA分子与完整细胞相互作用系统的原理与应用(二)

结果表明,CAR-T细胞与抗原的亲和力Kd为45.41pM,T细胞表面CAR的表达水平为1.368e+5,Kd与EL的95%置信区间均较窄,数据非常准确可信。 应用二、KinExA在高亲和力检测上应用对于抗肿瘤药市场,目前精准医疗最为成熟的领域还是以靶向药物为代表的抗肿瘤药物。由于单克隆抗体类抗癌药

KinExA分子与完整细胞相互作用系统的原理与应用(一)

一、KinExA的技术背景: Sapidyne Instruments Inc.于1995年在美国创立,产品基于独特的Kinetic Exclusion Assay(KinExA)专利技术。在公司成立早期,Xavier大学、美国陆军和环境保护局等研究单位采用KinExA技术开展了大量工作;经过数

大分子相互作用仪SPR技术原理

表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)是一种光学物理传感技术。如图1所示,一束P偏振光在一定的角度范围内入射到棱镜端面,在棱镜与金属薄膜(Au或Ag)的界面将产生表面等离子波。当入射光波的传播常数与表面等离子波的传播常数相匹配时,引起金属膜内自由电子产生共振

大分子相互作用仪SPR技术原理

表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)是一种光学物理传感技术。如图1所示,一束P偏振光在一定的角度范围内入射到棱镜端面,在棱镜与金属薄膜(Au或Ag)的界面将产生表面等离子波。当入射光波的传播常数与表面等离子波的传播常数相匹配时,引起金属膜内自由电子产生共振

KinExA分子与完整细胞相互作用系统在CAR-T细胞治疗中的...

因多种因素的限制,自体CAR-T细胞治疗产品可能在应用于患者前未必能够进行全部项目的检定,所以工艺验证非常重要。工艺研究及验证必须结合工艺的实际情况设定相应的验证参数,CAR-T细胞产品工艺研究在不断发展,到目前为止,业界对何种工艺最好并未达成共识。因此,可以在产品研发过程及早期临床试验阶段开展不同

实时无标记SPR技术研究分子相互作用的优势介绍(二)

综合比较SPR与CO-IP实验:相同点:(1)测定两种甚至更多种蛋白质是否在体内结合;(2)鉴定一种特定蛋白质的作用搭档;(3)分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。SPR检测优势: 传统SPR技术的仪器使用复杂,让很多老师望而却步,加拿大Nicoya公司的下一代的LSPR专利技术系统OpenSPR

SPR生物分子相互作用分析仪创新技术优势大盘点(二)

可与传统SPR技术媲美的实验结果精度:用OpenSPR,IBIS,Biacore三款仪器分别对相同的配体M1,M2做检测,分析结果显示,三款仪器具有可比的相似的信噪比: Figure 2. OpenSPR对(M1,M2)偶联曲线与动力学分析Figure 3. IBIS对(M1,M2)偶联曲线与动力学

KinExA分子与完整细胞相互作用系统在CAR-T细胞治疗中应用

因多种因素的限制,自体CAR-T细胞治疗产品可能在应用于患者前未必能够进行全部项目的检定,所以工艺验证非常重要。工艺研究及验证必须结合工艺的实际情况设定相应的验证参数,CAR-T细胞产品工艺研究在不断发展,到目前为止,业界对何种工艺最好并未达成共识。因此,可以在产品研发过程及早期临床试验阶段开展不同