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怎样固定悬浮细胞

如何判断悬浮细胞培培养时,细胞是死的还是活的将在动物细胞凋亡研究中应用的Hoechst-PI双重荧光染色 法与琥珀酸脱氢酶(SDH)染色法相结合,建立了一种更加完善的、能同时鉴别和研究悬浮培养的植物细胞凋亡及坏死的新方法——Hoechst-PI- SDH三重染色法(H-P-S法)。该方法可直接用于红豆杉悬浮培养细胞,无需对细胞进行去壁、固定及切片等其它方法所必需的步骤,在荧光显微镜下可鉴别 活细胞、死细胞及凋亡细胞,并可同时观测细胞凋亡的全部过程。该方法简单、快速、准确,而且克服了因细胞膜通透性差异引起的对死、活细胞判断的困难,可在 植物细胞凋亡的研究中广泛应用。......阅读全文

悬浮细胞培养技术在兽用疫苗领域的应用

细胞悬浮培养是利用生物反应器大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术,是当前国际上生物制品生产的主流模式,其最大优势是通过更为精确有效的工艺控制手段,在获得最大产量的同时能稳步提高产品的质量。但该技术目前在国内尚未得到广泛应用,生物制品生产仍主要采用病毒产率低、生产成本高、劳动强度大的转瓶细胞培养方

独体—基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模

独体—基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模拟 Akiko  Koide  and  Shohei  Koide          

独体—基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模拟 实验

实验材料pAS38pAS45pAS47试剂、试剂盒聚乙二醇(PEG) 氯化钠溶液HEPES 缓冲液涂布溶液Tris 缓冲盐水TBS-Tween-20琼脂糖-磷酸溶液仪器、耗材LBSOCYT实验步骤3.1 实物库构建我们用 Kunkel 突变技术构建大多数的实物库虽然我们证明了  AB 链套

如何提高转染实验的效率

在本章节我们解释了转染体系的关键组分对细胞转染  实验的效率有何影响,并且合理的给予您一些关于如何使它们更有利于您研究方面的提示。 【组织培养试剂】 一般提示:优化您的细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各

独体—基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模拟 Akiko ...2

3.1.4 双链 DNA 合成( 1 ) 混合大约 1 μg 尿嘧啶单链 DNA、2 μl 磷酸化的寡核苷酸(见 3.1.3),1 μl 10 X 退火缓冲液(Bio-Rad  Metagene  kit ) ,加水使体积达 10 μl  ( 见注4)。制备一无寡核苷酸

MTT实验的一些细节问题

一、细胞: 1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样

MTT实验的一些细节问题

一、细胞: 1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。

悬浮培养细胞存活率的测定方法

悬浮培养细胞存活率的测定方法对于悬浮培养细胞存活率的检测方法则主要是通过显微计数法进行的,而悬浮培养细胞存活率的检测原理则是通过材料、仪器以及试剂进行。而悬浮培养细胞存活率制作好的样品后需要进行染色后才能够对悬浮培养细胞存活率进行检测显微观察。而同时对于悬浮培养细胞存活率进行镜检时则需要将悬浮培养细

牛子宫内膜上皮细胞 BEND使用说明

  细胞名称   牛子宫内膜上皮细胞 BEND   CELLBIO 货号   CBR-131460   动物种别   牛   细胞数量   1X10^6   培养瓶规格   25T   传代次数   2-3 代   稳定传代

牛子宫内膜上皮细胞 BEND使用说明

  细胞名称   牛子宫内膜上皮细胞 BEND   CELLBIO 货号   CBR-131460   动物种别   牛   细胞数量   1X10^6   培养瓶规格   25T   传代次数   2-3 代   稳定传代

RFect原代细胞小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂使用说明

RFectPM原代细胞小核酸转染试剂(RFect原代细胞小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂)                &nb

牛子宫内膜上皮细胞 BEND使用说明

细胞处理注意事项 1、收到细胞,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中 的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数

动物细胞大规模培养技术 (二)

第三节 大规模培养技术的操作方式深层培养可分为:分批式、流加式、半连续式、连续式、连续式和灌注式五种。一、分批式培养(batch culture) 是细胞规模培养发展进程中较早期采用的方式,也是其它操作方式的基础。该方式采用机械搅拌式生物反应器,将细胞扩大培养后,一次性转入生物反应器内进行培养,在培

猪子宫内膜上皮细胞PEECs使用说明

细胞处理注意事项 1、收到细胞,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中 的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数

细胞传代实验

细胞培养技术 消化法             实验方法原理 培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细

细胞传代实验

细胞培养技术 消化法             实验方法原理 培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细

细胞传代实验——细胞培养技术

细胞传代实验可用于:(1)医学研究;(2)提供细胞种。(3)进行细胞生物学研究。实验方法原理培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代;部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代;悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代,或用自然沉降法吸除上清后,再吹打传代。实验材料细胞试剂、

贴壁细胞传代的培养技巧

  细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。一般使用蛋白水解酶(比如胰蛋白酶)消化贴壁细胞

拟南芥细胞培养原理及操作步骤

实验概要了解植物细胞悬浮培养的基本原理,通过实验掌握植物细胞悬浮培养的方法和技术。并通过实验练习和巩固无菌操作技术。实验原理植物细胞的悬浮培养是指将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中进行培养,在培养过程中能够保持良好的分散状态。植物离体培养可产生愈伤组织。将疏松型的愈伤组织县浮在液体培养基中并

细胞技术专题:细胞传代实验

根据细胞生长的恃点,传代方法有3种:悬浮生长细胞传代、半悬浮生长细胞传代(Hela细胞)、贴壁生长细胞传代。实验方法细胞培养技术 消化法 实验方法原理培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代;部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代;悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

  细胞培养环境   1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于

实用哺乳动物细胞培养手册(四)

细胞培养无菌操作基本技术无菌操作技术分为三个部分:工作环境及表面的处理,细胞培养所用玻璃及塑料制品的处理及培养液与培养细胞的处理。工作环境的处理 使用层流超净工作台是最经济有效的手段。超净工作台正常工作时,向下的气流可阻挡外界空气污染物进入超净台。(1)实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射 30-

培养基NK细胞的制备研究

 NK细胞的制备方法,即通过联合细胞因子和饲养细胞的刺激作用,提高NK细胞的增殖速度和纯度。本发明的主要特点是:NCR3LG1和m?IL-15同时转染到K562细胞,m?IL-15可以调节NK细胞的活化和增殖,而NCR3LG1作为NK细胞表面主要的活化受体之一NKp30的配体,可以有效的刺

常见细胞培养的三种方式

细胞培养是指从体内组织取出细胞膜,模拟体内生存环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使其生长繁殖并维持结构和功能的一种培养技术。目前细胞培养方式主要包括以下三种:6.1 贴壁培养贴壁培养主要适用于贴壁依赖性细胞。此类需要相互依赖,需贴附于不起化学作用的物质(玻璃或塑料等无活性物质)的表面生

MTT实验的一些细节问题

一、细胞:1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,

细胞培养相关问题及解答(一)

  小牛血清和胎牛血清有何区别?应用注意事项?   来源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。   组份与比例不同:两者所含的促细

细胞转瓶机简介

细胞转瓶机的结构细胞培养转瓶机是用于细胞培养的一种仪器,它的结构比较简单。主要由电动机,支架,滚轴,和细胞培养滚瓶所构成。电动机是一个电源控制系统,控制滚轴转动的速度。支架起到支撑的作用,是转瓶机的支架系统。滚轴是带动转瓶机进行转动的结构。细胞培养滚瓶用来盛装培养液,用于培养细胞。 细胞转瓶机的分类

细胞膜的制备方法实验

从悬浮细胞中制备细胞膜 从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜 从生长于微载体上的细胞中分离细胞膜           &n

细胞膜的制备方法实验

从悬浮细胞中制备细胞膜从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜从生长于微载体上的细胞中分离细胞膜实验材料胶原酶