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FLIMFRET在病毒侵染动态研究中的应用

2020年, “病毒“这个词反复出现在公众的视野里。当我们在感慨着病毒凶猛、人类渺小和生命无常的同时,对于病毒以及相关的研究技术,我们又了解多少呢?研究难点病毒是一种个体微小、结构简单、只含一种核酸(DNA或RNA)、必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。而病毒侵染宿主细胞却是一个非常复杂的过程,主要分为吸附(Attachment)、进入(Entry/Penetration)、复制(Replication)、大分子合成(Biosynthesis)、装配(Assembly)、释放(Release)等几个阶段,如图1。图1.HIV病毒侵染人源细胞过程示意图[1] 如何从初始的吸附和进入阶段进行干预阻断,是病毒性疾病防治的切入点之一。以人类免疫缺陷病毒(HIV),也就是引发艾滋病的病原为例,它通过颗粒表面的包膜糖蛋白(Env)与免疫细胞表面的CD4分子、辅助受体互作,实现病毒与宿主细胞的融合、感染过程。科学家们曾......阅读全文

FLIM-FRET在病毒侵染动态研究中的应用

2020年, “病毒“这个词反复出现在公众的视野里。当我们在感慨着病毒凶猛、人类渺小和生命无常的同时,对于病毒以及相关的研究技术,我们又了解多少呢?研究难点病毒是一种个体微小、结构简单、只含一种核酸(DNA或RNA)、必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。而病毒侵染宿主细胞却是一个非常复

徕卡FLIM-FRET在病毒侵染动态研究中的应用

病毒侵染动态研究莫发愁,徕卡FLIM-FRET显身手齐瑶研究难点病毒是一种个体微小、结构简单、只含一种核酸(DNA或RNA)、必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。而病毒侵染宿主细胞却是一个非常复杂的过程,主要分为吸附(Attachment)、进入(Entry/Penetration)、

FLIM-FRET应用浅析

FRET 技术(Fluorescence Resonance Energy Transfer)能够在突破传统光学分辨率极限的条件下研究蛋白互作、构象变化(<10 nm),或者通过构建 FRET 探针监测分子变化,因而在诸多研究领域得到了“科研大拿”们的青睐。然而,传统的基于荧光强度的 FRET

生物医学研究新工具:FLIM-FRET

目前,大多数生物探针都是基于荧光。荧光探针亮度的增加或减少取决于其浓度。但是,荧光强度不仅受研究对象浓度的影响,还受照明强度、光漂白以及基质吸收和阴影效应等。为了尽量避免这些问题,科学家倾向于优先选择比率染料(ratio-dyes),因为其允许对背景的干扰进行校准。尽管如此,基于荧光强度的测量并不是

FLIM-FRET生物传感器介绍

荧光寿命成像(FLIM)与Förster共振能量转移(FRET)相结合,已被证明非常有利于生物医学研究中各种结构和细胞动态变化的研究。因为FRET信号强烈依赖于FRET配体和受体的距离,所以FRET允许监测分子相互作用。这允许研究分子的相互作用,如配体-受体复合物,蛋白质-蛋白质相互作用、效应蛋白与

生物医学研究新工具:FLIM-FRET生物传感器

荧光寿命成像(FLIM)与Förster共振能量转移(FRET)相结合,已被证明非常有利于生物医学研究中各种结构和细胞动态变化的研究。因为FRET信号强烈依赖于FRET配体和受体的距离,所以FRET允许监测分子相互作用。这允许研究分子的相互作用,如配体-受体复合物,蛋白质-蛋白质相互作用、效应蛋白与

FRET成像在生物医药领域中的应用(二)

接下来通过该生物敏感器,作者成功实现了在活细胞内对Aurora kinaseA时空激活调控的观察,证明其在G1时期被激活,并通过TPX2和CEP192蛋白协同调节微管的稳定性。图4 TPX2和CEP192在G1时期激活GFP-AURKA-mCherry。Aurora kinase A是公认的治疗

FRET成像在生物医药领域中的应用(一)

随着显微成像技术的发展,科研工作者对成像分辨率的要求越来越高,为此Leica在最新一代SP8共聚焦显微镜的基础上相继推出了超高分辨的STED和高分辨的Hyvolution;另一方面,简单的图像采集和分辨率的提升已经不能满足很多科研工作者的需求,他们需要更高级更强大的成像功能与图像处理功能。LAS

Leica SP8 FALCON 使用技巧

近期,我们介绍了 Leica SP8 FALCON 的一些应用案例,它能实时测量分子间的相互作用 (FLIM-FRET),实时测量钙浓度变化,实时测量荧光分子的代谢 (如癌变引起的 NADH 的寿命变化) 或者所处微环境的变化 (如 pH),能对光谱相近的不同染料或自发荧光和染料进行拆分,还

分离病毒及构建假病毒在抗疫研究中的应用

新冠疫情已经在全球范围爆发,目前确诊感染人数已经超过190万,并且这一数值还在持续增长中。在疫情爆发初期,我国科研战线迅速行动,不到一周时间就确定了新冠病毒的全基因组序列并分离得到了病毒毒株,及时向全球共享。那么为什么分离病毒毒株这么重要呢?毒株分离的意义和难度病毒毒株的分离对于疫情的防控、抗病毒药