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FRET 技术（Fluorescence Resonance Energy Transfer）能够在突破传统光学分辨率极限的条件下研究蛋白互作、构象变化（<10 nm），或者通过构建 FRET 探针监测分子变化，因而在诸多研究领域得到了“科研大拿”们的青睐。然而，传统的基于荧光强度的 FRET 技术（如 FRET-AB、FRET-SE 等）容易受到荧光蛋白浓度、激光强度、荧光漂白等众多因素的影响，从而直接导致了实验结果的不准确性和难重复性，着实让人头疼！△ 图1. 常用 FRET 染料对 Alexa488-Cy3 的 Jablonski 图表FLIM 显微成像技术FLIM-FRET 的优势FLIM（Fluorescence Life-time Imaging Microscopy）是一项基于荧光寿命（电子驻留在激发态的时间统计值）的显微成像技术。与荧光光谱一样，荧光寿命也是荧光物质的一种内在特有性质，不......阅读全文
FRET 技术（Fluorescence Resonance Energy Transfer）能够在突破传统光学分辨率极限的条件下研究蛋白互作、构象变化（<10 nm），或者通过构建 FRET 探针监测分子变化，因而在诸多研究领域得到了“科研大拿”们的青睐。然而，传统的基于荧光强度的 FRET
荧光寿命成像（FLIM）与Förster共振能量转移（FRET）相结合，已被证明非常有利于生物医学研究中各种结构和细胞动态变化的研究。因为FRET信号强烈依赖于FRET配体和受体的距离，所以FRET允许监测分子相互作用。这允许研究分子的相互作用，如配体-受体复合物，蛋白质-蛋白质相互作用、效应蛋白与
目前，大多数生物探针都是基于荧光。荧光探针亮度的增加或减少取决于其浓度。但是，荧光强度不仅受研究对象浓度的影响，还受照明强度、光漂白以及基质吸收和阴影效应等。为了尽量避免这些问题，科学家倾向于优先选择比率染料（ratio-dyes），因为其允许对背景的干扰进行校准。尽管如此，基于荧光强度的测量并不是
2020年， “病毒“这个词反复出现在公众的视野里。当我们在感慨着病毒凶猛、人类渺小和生命无常的同时，对于病毒以及相关的研究技术，我们又了解多少呢？研究难点病毒是一种个体微小、结构简单、只含一种核酸（DNA或RNA）、必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。而病毒侵染宿主细胞却是一个非常复
病毒侵染动态研究莫发愁，徕卡FLIM-FRET显身手齐瑶研究难点病毒是一种个体微小、结构简单、只含一种核酸（DNA或RNA）、必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。而病毒侵染宿主细胞却是一个非常复杂的过程，主要分为吸附（Attachment）、进入（Entry/Penetration）、
荧光寿命成像（FLIM）与Förster共振能量转移（FRET）相结合，已被证明非常有利于生物医学研究中各种结构和细胞动态变化的研究。因为FRET信号强烈依赖于FRET配体和受体的距离，所以FRET允许监测分子相互作用。这允许研究分子的相互作用，如配体-受体复合物，蛋白质-蛋白质相互作用、效应蛋白与
接下来通过该生物敏感器，作者成功实现了在活细胞内对Aurora kinaseA时空激活调控的观察，证明其在G1时期被激活，并通过TPX2和CEP192蛋白协同调节微管的稳定性。图4 TPX2和CEP192在G1时期激活GFP-AURKA-mCherry。Aurora kinase A是公认的治疗
随着显微成像技术的发展，科研工作者对成像分辨率的要求越来越高，为此Leica在最新一代SP8共聚焦显微镜的基础上相继推出了超高分辨的STED和高分辨的Hyvolution；另一方面，简单的图像采集和分辨率的提升已经不能满足很多科研工作者的需求，他们需要更高级更强大的成像功能与图像处理功能。LAS
近期，我们介绍了 Leica SP8 FALCON 的一些应用案例，它能实时测量分子间的相互作用 (FLIM-FRET)，实时测量钙浓度变化，实时测量荧光分子的代谢 (如癌变引起的 NADH 的寿命变化) 或者所处微环境的变化 (如 pH)，能对光谱相近的不同染料或自发荧光和染料进行拆分，还
表1 主要成像技术及应用场合（Nature Reviews 2002）成像方法 主要应用场合磁共振成像（MRI） 高对比度，用于表型、生理成像和细胞跟踪的最好的全方位成像系统。计算机层析成像（CT） 肺和骨癌成像超声成像 血管和介入成像正电子发射断层成像PET 分子代谢，如葡萄糖，胸腺嘧啶核苷等的成