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广西大学最新文章:改进染色质免疫共沉淀方法

作为研究基因表达调控的重要方法,近年来染色质免疫共沉淀得到了越来越广泛的应用,但有关将乳腺组织作为ChIP材料的研究及其方法尚未见报道。 近期来自广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室等处的研究人员提出了一种新型乳腺组织染色质免疫共沉淀方法,这种方法获得的DNA样品中, 靶序列得到显著的富集, 所得的DNA样品能够满足测序(ChIP Seq) 要求。结果说明, 改进后的方法适用于乳腺组织染色质免疫共沉淀, 并为研究乳腺组织基因表达调控奠定了基础。 基因的表达受到多种转录因子及其相关蛋白的调控, 基因表达调控常用研究方法包括转录因子结合实验、 电泳迁移阻滞实验、 酵母单杂交系统和染色质免疫共沉 淀 技 术。尽管这4种方法均可以鉴定转录因子在DNA 中的结合位点, 但前3种方法需要将DNA与转录因子分离到体外进行实验, 无法真实地反映在不同生理状态下, 转录因子与相应靶基因识别与结合的真实情况。 ChIP技术通......阅读全文

组织免疫沉淀中染色质的制备

实验概要此步骤描述了从组织中制备染色质,以用于后续的染色质免疫沉淀反应。每个免疫沉淀/抗体反应推荐使用肝组织 30 mg,但组织使用量可根据实际进行调整。每种组织的用量依据组织蛋白丰度、抗体亲和力和交联效率而定。每个免疫沉淀反应最适染色质的量为 5-15 μg 。每次交联免疫沉淀反应之前,需根据不同

组织免疫沉淀中染色质的制备

实验概要此步骤描述了从组织中制备染色质,以用于后续的染色质免疫沉淀反应。每个免疫沉淀/抗体反应推荐使用肝组织 30 mg,但组织使用量可根据实际进行调整。每种组织的用量依据组织蛋白丰度、抗体亲和力和交联效率而定。每个免疫沉淀反应最适染色质的量为 5-15 μg 。每次交联免疫沉淀反应之前,需根据不同

蛋白质免疫印迹组织蛋白提取简介

  1)所需器材:制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管(最好高温高压处理)、一个大冰盒、一个1.5ml EP管盒、手套、眼科剪(最好高温高压处理)、新鲜组织或保存于-80℃冰箱组织、保存于4℃冰箱的PBS(最好高温高压处理)、移液枪、吸头(最好高温高压处理)、两套研磨棒(最好高温高压处理)、掌上离

广西大学最新文章:改进染色质免疫共沉淀方法

  作为研究基因表达调控的重要方法,近年来染色质免疫共沉淀得到了越来越广泛的应用,但有关将乳腺组织作为ChIP材料的研究及其方法尚未见报道。  近期来自广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室等处的研究人员提出了一种新型乳腺组织染色质免疫共沉淀方法,这种方法获得的DNA样品中, 靶序列得到

蛋白质免疫印迹实验组织蛋白提取

  组织蛋白提取  1)所需器材:制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管(最好高温高压处理)、一个大冰盒、一个1.5ml EP管盒、手套、眼科剪(最好高温高压处理)、新鲜组织或保存于-80℃冰箱组织、保存于4℃冰箱的PBS(最好高温高压处理)、移液枪、吸头(最好高温高压处理)、两套研磨棒(最好高温高

染色质免疫沉淀分析

真核生物细胞状态是由内源和外源因素共同影响的,所有信号传递途径的终点都是DNA 。DNA 通过核蛋白复合物组成染色质,染色质是基因调控的一个重要作用位点。转录激活因子和辅助抑制因子的研究显示存在一种新的调节机制--" 组蛋白密码" ,其信息存在于组蛋白的转录后修饰等过程中。该类修饰包括组蛋白磷

染色质免疫共沉淀(ChIP)

实验方法原理在保持组蛋白和DNA联合的同时,通过运用对应于一个特定组蛋白标记的生物抗体,染色质被切成很小的片断,并沉淀下来。IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“prorein A”特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的prorein A预先结合

染色质免疫共沉淀(ChIP)

染色质免疫共沉淀实验方法原理在保持组蛋白和DNA联合的同时,通过运用对应于一个特定组蛋白标记的生物抗体,染色质被切成很小的片断,并沉淀下来。IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“prorein A”特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的prore

染色质免疫共沉淀研究

真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。与传统的EMSA技术相比,染色质免疫沉淀技术(ChIP)能真实完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白,是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用的最佳方法。染色质免疫沉淀技术(chro

染色质免疫共沉淀(ChIP)

实验方法原理 在保持组蛋白和DNA联合的同时,通过运用对应于一个特定组蛋白标记的生物抗体,染色质被切成很小的片断,并沉淀下来。IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“prorein A”特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的prorein A预先结