体细胞杂交实验——单层全细胞融合实验
实验材料汇合至一定程度的受体细胞试剂、试剂盒受体细胞适合生存的培养基合适的选择性试剂含感兴趣染色体及合适遗传标记的供体细胞仪器、耗材10 cm 组织培养板25 cm 组织培养瓶倒置相差显微镜实验步骤基本方案 单层全细胞融合1.倘若不知道细胞的选择条件，通过以下方式来确定：将培养于 25 cm 培养瓶中的受体细胞传代，比例为 10:1，分装于不同培养瓶中，并用不同水平的选择试剂来培养。每周 2 次观察细胞，换液，10d 之后确定抑制细胞生长的试剂的最低浓度。2.在融合前的当天下午，将等量的供体细胞和受体细胞（通常为 5X105?IXlO6 个) 培养于含 IOml 有血清的培养基中，同时分别将供体细胞和受体细胞培养于含或不含 PEG 的培养基来做对照，培养过夜。供体和受体细胞在选择条件下需死亡，含 PEG 的细胞应该在选择条件下恢复并开始汇合，当一个新细胞系或新的 PEG 使用时，后者的对照需重故。3.在显微镜下观察细胞，其需 7......阅读全文
体细胞杂交实验——单层全细胞融合实验
实验材料汇合至一定程度的受体细胞试剂、试剂盒受体细胞适合生存的培养基合适的选择性试剂含感兴趣染色体及合适遗传标记的供体细胞仪器、耗材10 cm 组织培养板25 cm 组织培养瓶倒置相差显微镜实验步骤基本方案 单层全细胞融合1.倘若不知道细胞的选择条件，通过以下方式来确定：将培养于 25 cm 培养瓶
体细胞融合实验——单层培养细胞的融合
实验材料细胞试剂、试剂盒PEG-1000仪器、耗材培养基实验步骤1. 以适当的培养基培养细胞至接近汇合成片的密度（80% 汇合率）。2. 吸干 60 mm 规格平皿或 T-25 培养瓶中的培养基，加 2 ml 50% PEG-1000，轻轻转动 1 分钟让该粘稠液体覆盖所有细胞。3. 往培养皿或瓶中
体细胞杂交实验
实验材料 汇合至一定程度的受体细胞 试剂、试剂盒 受体细胞适合生存的培养基 合适的选择性试剂 含感
体细胞杂交实验
随着分子遗传学技术出现，体细胞杂交也取得了重要的进步：作为探针的 DNA 可以从用于体细胞杂交或 Southernblot 的细胞中获取，而来自相应基因的探针无论是杂交到滤膜，还是杂交到染色体的变性或非变性的片段上，都能被辨别。然而，由于人类与啮齿目动物在 DNA 和蛋白质水平上的相似性，作
体细胞杂交实验
单层全细胞融合实验 实验材料 汇合至一定程度的受体细胞 试剂、试剂盒
细胞融合实验
实验概要掌握细胞融合原理、应用融合细胞的方法以及细胞融合率的计算。实验原理细胞融合(Cell fusion)，即在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。人工诱导的细胞融合，在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。由于它不仅能产生同种细胞融合，也
细胞融合实验
实验方法原理细胞融合的诱导物种类很多．常用的主要有灭活的仙台病毒(Sendai virus)，聚乙二醇(Polyethyleneglycol，PEG)和电脉冲。目前应用zui广泛的是聚乙二醇，因为它易得、简便，且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚，它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结
细胞融合实验的实验原理
根据Burnet的抗体选择学说，一个B淋巴细胞只能产生一种针对它能够识别的特异性抗原决定簇的抗体。从一个祖先B细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系称为克隆。来自克隆系的细胞基因是完全相同的，产生的抗体也完全相同。这种从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体。但这种具有分泌功能的B淋巴细胞难以在
体细胞杂交的杂交实验
不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合，所产生的杂种细胞，即异核体经过培养可再生新壁，分裂形成愈伤组织，进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞，故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组，因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作研究
体细胞融合实验
单层培养细胞的融合 悬浮培养细胞的融合 实验材料 细胞 试剂、试
体细胞融合实验
单层培养细胞的融合 悬浮培养细胞的融合 实验材料 细胞 试剂、试
体细胞融合实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 PEG-1000仪器、耗材 培养基实验步骤 1. 以适当的培养基培养细胞至接近汇合成片的密度（80% 汇合率）。2. 吸干 60 mm 规格平皿或 T-25 培养瓶中的培养基，加 2 ml 50% PEG-1000，轻轻转动 1 分钟让该粘稠液体覆盖所有细胞。3. 往培养
细胞融合实验的实验原理简介
根据Burnet的抗体选择学说，一个B淋巴细胞只能产生一种针对它能够识别的特异性抗原决定簇的抗体。从一个祖先B细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系称为克隆。来自克隆系的细胞基因是完全相同的，产生的抗体也完全相同。这种从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体。但这种具有分泌功能的B淋巴细胞难以在
细胞融合实验的实验步骤介绍
1. DMEM或1640基础培养基、PEG溶液置于37℃水浴中预温； 2. 将Balb/c小鼠摘眼球处死后，浸入75%洒精； 3. 无菌取免疫小鼠的脾脏； 4. 脾脏用PBS洗涤后，放入无菌过滤的网筛，再把网筛放在盛有完全培养基的玻璃平皿中用研磨棒（或注射器针管）轻轻研磨或挤压，使其通过网
体细胞杂交实验的原理介绍
不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合，所产生的杂种细胞，即异核体经过培养可再生新壁，分裂形成愈伤组织，进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞，故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组，因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作
体细胞杂交的实验原理介绍
不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合，所产生的杂种细胞，即异核体经过培养可再生新壁，分裂形成愈伤组织，进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞，故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组，因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作研究
体细胞杂交的实验原理介绍
不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合，所产生的杂种细胞，即异核体经过培养可再生新壁，分裂形成愈伤组织，进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞，故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组，因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作
体细胞杂交实验的方法介绍
实验目的了解用聚乙二醇PEG方法诱异同种植物原生质体融合的技术，并能根据新本原生质体的形态樗来鉴别杂种细胞。实验原理不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合，所产生的杂种细胞，即异核体经过培养可再生新壁，分裂形成愈伤组织，进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞，故该项技术也叫体细胞
体细胞杂交的实验方法
1．原生质体的分离和收集。 2．将收集的两种不同材料的原生质体分别悬浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O（pH5.8~6.2）原生质体密度调整为2×105/ml左右（用血细胞计数板统计原生质体密度）。 3．将两种原生质体悬液等量混合。 4．用刻度吸管将混合的原生质体悬液滴在直径为6
动物细胞融合实验
细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成为一个细胞的过程。在自然情况下，体内和体外培养的细胞均能发生自发融合现象。人工方法诱导细胞融合开始于50 年，现在这项技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫，肿瘤及细胞工程的重要手段。在诱导物（如仙台病毒，聚乙二醇）作用下，相互融合的细胞发生凝集，随后在质膜接
动物细胞融合实验
一、实验目的细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成为一个细胞的过程。在自然情况下，体内和体外培养的细胞均能发生自发融合现象。人工方法诱导细胞融合开始于50年，现在这项技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫，肿瘤及细胞工程的重要手段。通过实验，了解细胞融合的原理，掌握细胞融合的基本方法。二、实验原理在诱导物
体细胞杂交所需实验材料仪器介绍
1．实验材料：烟草或其它植物无菌苗的叶片。胡萝卜肉质根诱导的松软愈伤组织或悬浮培养细胞。2．试剂2.1酶液及洗涤液，同植物原生质体的分离和培养实验。2.2PEG溶液2.3高pH高钙稀释液2.4DPD培养基同植物原生质体的分离和培养实验。
体细胞杂交的实验方法介绍
所有操作均在超净工作台上进行。1．原生质体的分离和收集。2．将收集的两种不同材料的原生质体分别悬浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O（pH5.8~6.2）原生质体密度调整为2×105/ml左右（用血细胞计数板统计原生质体密度）。3．将两种原生质体悬液等量混合。4．用刻度吸管将混合的原生质体悬
关于体细胞杂交实验的方法介绍
所有操作均在超净工作台上进行。 1．原生质体的分离和收集。 2．将收集的两种不同材料的原生质体分别悬浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O（pH5.8~6.2）原生质体密度调整为2×105/ml左右（用血细胞计数板统计原生质体密度）。 3．将两种原生质体悬液等量混合。 4．用刻度吸
简述细胞融合的实验操作
人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素（fluorescin）结合，人的抗体与发红色荧光的罗丹明（rhodamine）结合；第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合；最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中，让这些标记抗体同融
酵母菌细胞融合实验
实验概要学习酵母菌原生质体制备和再生技术，为了解酵母菌为材料的外源基因转移等技术奠定基础。实验原理酵母菌如酿酒酵母，在遗传学和分子生物学的研究中有很大作用，尤其是近些年来，随着科技的进步，酵母菌的遗传操作如转化、基因克隆和外源基因在酵母受体中的表达等技术都有了突破性的进展。作为受体系统的酵母菌原生质
细胞融合技术的实验操作
人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素（fluorescin）结合，人的抗体与发红色荧光的罗丹明（rhodamine）结合；第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合；最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中，让这些标记抗体同融合细
单层培养细胞更换培养液实验
实验方法原理以肉眼和倒置显微镜观察培养物，若有指征，如PH降低，则去除旧培养基加如新鲜培养基，再重新放入温箱培养。实验步骤材料无菌培养的细胞：A549细胞，以2×10^4ml接种到25cm2培养瓶后4天……4瓶生长培养液……………………………………………………100ml例如：Eagle1×MEM含H
单层培养细胞更换培养液实验
实验方法原理以肉眼和倒置显微镜观察培养物，若有指征，如PH降低，则去除旧培养基加如新鲜培养基，再重新放入温箱培养。实验步骤材料无菌培养的细胞：A549细胞，以2×10^4ml接种到25cm2培养瓶后4天……4瓶生长培养液……………………………………………………100ml例如：Eagle1×MEM含H
单层柱状上皮形态学观察实验
仪器、耗材显微镜 he 实验步骤1. 染色：HE2. 肉