流动相的选择秘诀

秘诀1:由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。 秘诀2: 三倍规则:每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中,注意观察各个峰的分离情况。 秘诀3: 粗调转微调:当分离达到一定程度,应将有机溶剂10%的改变量调整为5%,并据此规则逐渐降低调整率,直至各组分的分离情况不再改变。 1.流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选择流动相时应考虑以下几个方面: ①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化......阅读全文

液相流动相中有机溶剂和缓冲盐各有什么作用

有机溶剂主要是起到洗脱的作用,样品能在柱子里完全被洗脱主要还是有机溶剂的作用,而使样品能在柱子里面保留时间延长主要是水相的作用,分离是有机相和水相与柱子的固定相三者的共同作用(分配作用),而水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好,一般是酸样加酸,碱样加碱,也就是我们

液相流动相中有机溶剂和缓冲盐各有什么作用

有机溶剂主要是起到洗脱的作用,样品能在柱子里完全被洗脱主要还是有机溶剂的作用,而使样品能在柱子里面保留时间延长主要是水相的作用,分离是有机相和水相与柱子的固定相三者的共同作用(分配作用),而水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好,一般是酸样加酸,碱样加碱,也就是我们

液相流动相中有机溶剂和缓冲盐各有什么作用

有机溶剂主要是起到洗脱的作用,样品能在柱子里完全被洗脱主要还是有机溶剂的作用,而使样品能在柱子里面保留时间延长主要是水相的作用,分离是有机相和水相与柱子的固定相三者的共同作用(分配作用),而水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好,一般是酸样加酸,碱样加碱,也就是我们

液相流动相中有机溶剂和缓冲盐各有什么作用

有机溶剂主要是起到洗脱的作用,样品能在柱子里完全被洗脱主要还是有机溶剂的作用,而使样品能在柱子里面保留时间延长主要是水相的作用,分离是有机相和水相与柱子的固定相三者的共同作用(分配作用),而水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好,一般是酸样加酸,碱样加碱,也就是我们

效液相色谱流动相的溶剂选择

流动相溶剂的选择1)所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2)溶剂应当不干扰检测器的工作,溶剂应与检测器匹配,选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3)在制备分离中,溶剂应当易于除去,不干扰

流动相为含缓冲盐流动相,走完样品应该怎么冲柱子

要看色谱柱C18接的是什么键,不同的键对水的耐受性不同,有的柱子是不怕纯水做流动相的含缓冲盐肯定先用10%甲醇水冲洗,含有蛋白如果是能耐纯水的色谱柱一般是用甲酸或者乙酸调PH大于2的水清洗

如何-选择-液相色谱流动相ph和-溶剂-要求

当然要根据你测定的物质来确定。一般极性小的物质,有机相会相对大一些,极性大的物质就可以小一些。有些特殊的物质会易溶于酸或碱,根据这些来进行调整。简单说就是保证你的测定物质可以溶于流动相。此外的一些缓冲盐比较复杂,最好在网上搜索类似的方法加以改进。注意的是要保证你的方法在色谱柱的适用范围内,如果方法特

液相色谱仪溶剂流动相的纯化

分析纯和优级纯溶剂在很多情况下可以满足液相色谱仪分析的要求,但不同的色谱柱和检测方法对溶剂的要求不同。目前液相色谱分析用的色谱纯溶剂除zui常用的甲醇外,其余多为分析纯,有时要进行除去紫外杂质、脱水和蒸馏等纯化操作。一、乙腈是常用的溶剂,分析纯乙腈中含有少量的丙酮、丙烯腈、丙烯醇和噁唑等化合物,会产

液相流动相溶剂过滤器操作说明

液相流动相溶剂过滤器是适用于搭配各种品牌、型号的HPLC液相色谱使用的一款配套设备。其主要作用是用于去除色谱流动相中的杂质,延长色谱柱的使用寿命,同时整个过滤的过程中也起到了较好的脱气效果,去除气泡后可显著提高分析精度。液相流动相溶剂过滤器(以R300MF举例)其主要由抽滤泵、抽滤瓶组成,两个部分通

高效液相色谱仪溶剂流动相的纯化

分析纯和优等纯溶剂在许多情况下都能满足高效液相色谱仪的要求,但不同的色谱柱和检测方法对溶剂的要求不同。目前,用于高效液相色谱仪分析的纯色谱溶剂,除甲醇外,大多为分析纯,有时需要通过去除紫外杂质、脱水、蒸馏等方法进行提纯。1.乙腈是常用的溶剂。对纯乙腈的分析中含有少量的丙酮、丙烯腈、丙烯酸酯、恶唑化合

高效液相色谱中流动相常用的缓冲盐有哪些

冲柱时间的长短,要看你的色谱柱。柱长决定流动相的缓冲时间。按照标准执行,需要冲10倍的柱体积。不过如果是研发做实验,通常会节省一些时间。250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了。反相色谱柱,比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水(或乙腈水)来过渡半小时,然后冲缓冲盐的流动相平衡进样。结

高效液相色谱中流动相常用的缓冲盐有哪些

冲柱时间的长短,要看你的色谱柱。柱长决定流动相的缓冲时间。按照标准执行,需要冲10倍的柱体积。不过如果是研发做实验,通常会节省一些时间。250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了。反相色谱柱,比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水(或乙腈水)来过渡半小时,然后冲缓冲盐的流动相平衡进样。结

所有可以用作液相色谱流动相的有机溶剂

常用,乙腈水正己烷脂肪醇(甲醇,异丙醇)氯代烷烃酰胺苯,烷基取代苯氯苯脂肪酮(丙酮等)

液相流动相中缓冲盐的作用是什么

1. 使用前的处理:     在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱,直至基线平稳。原则上,用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。理由:缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和

液相色谱流动相中缓冲液有那些作用

有很多,比如酸类的:醋酸,磷酸,TFA等缓冲液;碱类的:三乙胺,二乙胺。还有盐类的:磷酸二氢钾,酸酸氢二钾等。作用主要就是调节PH,防止样品解离,便于分离,峰型更好。

液相流动相中缓冲盐的作用是什么

. 使用前的处理:     在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱,直至基线平稳。原则上,用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。理由:缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和的

聚合物gpc溶剂和流动相可以不同吗

从实验角度出发的话,不能。淋洗液和流动相是同一种试剂,原因是溶剂分子之间也有空隙,如果与流动相不是同一种试剂,当你用淋洗液进行淋洗时,淋出体积就会与两者相同时的淋出体积不一样。我们假设淋洗液A(乙醇)与流动相B(水)都是某一高分子的良溶剂,这样会使淋出体积较都是乙醇时小,而且高分子与淋洗液和高分子与

液相色谱HPLC流动相的溶剂怎么选择应遵循什么原则?

流动相溶剂的选择:正确选择流动相溶剂对高效液相色谱的成功至关重要。目前还没有理想的选择模式这主要取决于经验的积累。流动相溶剂选择的一般要求是:(1)溶剂应纯度高,不溶于固定相,并能保持色谱柱的稳定性;(2)溶剂的性能应与所用的检测器相匹配;(3)溶剂应具有足够的样品溶解能力;(4)溶剂应该具有低粘度

高效液相色谱流动相溶剂使用的注意事项

流动相溶剂使用的注意事项1)流动相溶剂应选择HPLC的溶剂或依此为标准的溶剂。流动相使用前用0.45μm滤膜过滤、脱气,清除微粒和灰尘。在送液泵内,为了防止杂物(固体)进入流路,装有吸滤器,但网孔径为10μm,比此更小的颗粒仍然可通过,这会导致流路和柱子堵塞和污染。为此,建议常用0.45μm滤膜过滤

流动相溶剂瓶的保养

    溶剂瓶是流动相的起点,通常是盛放水相溶液或是有机相溶液。  1、水相溶液,对于水相溶液来说,首要的问题是防止污染。对于溶剂瓶我们要做的非常重要的工作就是勤换流动相,常换常新。  2、有机相溶液,对于有机相溶液,可以不用担心细菌繁殖的问题。但是有机相容易发生聚合,特别是乙腈在适宜的光照条件下极

化学键合相色谱仪流动相的要求与常用溶剂

化学键合相色谱仪流动相由为底剂和洗脱剂组成。底剂决定基本的色谱分离情况,洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分进行选择性分离。一、流动相的要求:1、溶剂具有稳定的化学性质。2、溶剂的选择与检测器相容。3、溶剂的粘度小。4、溶剂的沸点不能太低。5、溶剂的纯度高且价格便宜。二、常用溶剂:1、正相键

实验室高效液相色谱仪流动相的溶剂选择

流动相溶剂的选择1)所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2)溶剂应当不干扰检测器的工作,溶剂应与检测器匹配,选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3)在制备分离中, 溶剂应当易于除去,不干

流动相脱气

流动相脱气对于避免HPLC系统出问题,顺利得到一个理想的数据是一个很有效的措施。HPLC系统内是不能够有气泡存在的。HPLC泵在输送液体时要产生很大的压力,由于气体的压缩比与液体相比大的多,因而当气泡存在时,你将观察到瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大,液相泵将不能输送任何溶剂,而且如

液相色谱仪分析中作为流动相的溶剂应具备的性质

溶剂的种类和数目很多,但是可作为液相色谱仪分析中流动相的溶剂的数目很少,溶剂的选择在液相色谱中是比较不容易的。可作为流动相的溶剂至少应具备如下一些性质:一、具有稳定的化学性质。溶剂不能和固定相发生不可逆的化学反应,也不引起固定相表面活性基团的流失和基质的溶涨。除特殊的分配过程,溶剂只溶解样品,而不

流动相的特点和常见的流动相介绍

色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。用作流动相的物质有:气体、液体、超临界流体等。常见的流动相主要有:乙腈-水溶液、乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。

液相色谱仪分析中的缓冲溶液和流动相添加物

液相色谱仪分析中的缓冲溶液是由磷酸、醋酸及其它弱酸等和它们的盐所构成的水溶液,流动相添加物主要指为了分离某些化合物而在流动相中添加的一些物质。一、缓冲溶液:在液相色谱分析过程中常使用缓冲溶液作为流动相,在流动相中添加少量的酸,以保持流动相pH值,提供一定的离子强度,通过控制酸性、碱性化合物的离解度或

流动相中缓冲盐的正确使用方法

1. 使用前的处理:在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱,直至基线平稳。原则上,用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。理由:缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和的缓冲盐溶

液质流动相与液相流动相有什么不同

液质的流动相要求不能含有不挥发性的盐类,如果非要加入的话,质谱要及时清洗。使用液相是因为要进行物质的结构确证。 

液相色谱流动相脱气

流动相的脱气HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。(噪声增大,基线不稳,突然跳动)。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起溶剂PH的变化,对分

液相色谱流动相小议

一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料(固定相)后,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k降低;而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加,相应的容量因子k升高。因此,k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流