生物样品分析方法中基质效应的考察

LC/MSMS用于生物样品检测具有很高的灵敏度和选择性,但生物样品的基质干扰很大,基质组分有可能会干扰待测组分的质谱离子化效率,产生离子增强或抑制效应。使用MRM模式检测的时候,色谱图并不能反映出基质干扰对待测组分检测的影响,因此优化色谱条件时,通过直观的色谱图并不能很好地考察到基质效应的影响,如果分析方法建立的时候没有很好地考察基质效应,会对后续分析方法的重现性、线性范围和耐受的样品量都会有很大影响。1.基质效应的评价方法:文献中评价基质效应的方法主要有两种:(1)空白基质处理后添加待测成分(post—extracted addition) :这种方法是在经前处理的空白样品基质中添加待测成分,与用流动相配制的等浓度的待测成分纯溶液在相同色谱条件下分别进样,两者响应信号的比值,即可得到待测成分在该分析条件下的基质效应大小 。其计算公式如下:ME=A/B*100%A : 在经过前处理的空白样品基质中添加已知浓度待测成分的响应; B......阅读全文

微生物样品的处理方法

一、初级(初始)样品混悬液样品通过称取一定重量后或量取一定体积后,加入9倍重量或体积的特定稀释液,经过外力作用充分均质混匀后,得到悬浊液、溶液或者乳浊液。有的初始混悬液中含有较大的样品颗粒时,应将其水平静置沉淀。这样得到的是初级(初始)混悬液(10-1)。二、次级十倍梯度稀释取一特定体积的初级混悬液

生物实验室研究生物样品的低温保存

  低温,哪些称作生物和医药学上的低温。生物和医药学上的低温,是个较为宽的溫度范畴。从大部分酶的适宜反映溫度37℃下列到好多个K(开尔文),能够称之为低温(绝对零度为-273.15℃ 即0K)。文中从样品储存的视角,将小于常温下(室内温度,25℃上下)的溫度了解为低温。低温能抑止植物体的生物化学主题

24孔生物样品过滤新技术

  颇尔24孔滤板新产品上市  AcroPrepTM24孔滤板为您带来广泛的膜材选择,您可以根据具体应用和孔径来选择合适的产品。  颇尔 AcroPrep 24 孔过滤板采用高性能Supor膜和Omega膜,微滤和超滤性能优越。24 孔结构可过滤 7 mL 样品,无需采用耗费人工的方法即可处理样品,

透射电镜生物样品制备步骤

一.取材:组织块小于1立方毫米二.固定:        2.5%戊二醛,磷酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。用0.1M磷酸漂洗液漂洗         15分 三次1%锇酸固定液固定                2-3小时用0.1M磷酸漂洗液漂洗         15分 三次三.脱水:      

生物样品分离技术膜分离法

膜分离技术包括超滤、反渗析、电渗析、微孔过滤等。利用膜分离技术可将样品小分子化合物和大分子的蛋白质很好地分离。超滤是一种除去样品中蛋白质和其他大分子的方法,是能用分子分离的薄膜分离技术,依靠薄膜两侧压力差作为推动力来分离溶液中不同分子量的物质。与沉淀法相比,其优点是适用于小量样品,不用稀释样品也不用

生物样品的预处理和储存方法

对许多生物样品,需要进行最初的预处理。这种预处理应该在采样后立即进行。例如,在分析贝壳类样品中的微量元素时,需要将贝壳外层的沉积物清洗干净,然后开壳,采集整个贝肉或个别部位。同样,水生植物如海藻等亦需要仔细清洗以除去沉积物、寄生植物或其他类似的表面沾污。必须注意样品的代表性。微量元素往往在一些特殊的

生物样品分离技术凝胶色谱法

利用分子大小不同的物质在流过凝胶固定相时的保留时间不同,大分子首先流出,小分子最后流出,可将待测小分子化合物与大分子蛋白质分离。这时待测小分子化合物的浓度被流动相所稀释,必要时还要进行浓缩后再用色谱分析。

生物样品分离技术柱色谱法

用能吸附蛋白质的材料装填成小柱,使欲除蛋白质的样品流过小柱,样品中的蛋白质被柱填料吸附,欲测组分不被吸附,从小柱中流出。现已有厂家将这种小柱做成商品出售,称为预柱。这种预柱可以直接连在HPLC的进样装置上,含蛋白质的样品通过预柱后可直接进入HPLC系统分析。如分析尿中的某些代谢产物时,可将样品通过预

扫描电镜生物样品常用制备方法

扫描电镜在观察生物样品时,具有以下特点:多角度观察样品的表面结构;不需要将样品切成薄片;景深大、图像立体感强;放大倍数从几十倍到几十万倍连续可调;在观察形貌的同时可以对微区的成分进行定量和定性分析。而能否获得真实、清晰、理想的扫描电镜观察结果,样品的制备过程是关键。 生物样品含水直接观察,会对扫描电

微生物样品采样后怎样处理?

一、样品的运输样品从采集结束至送达实验室整个过程的运输应保证样品本身变化最小及其中的微生物数量变化最低,尽量维持样品采样时的各种最初外界条件(如储存温度、是否需要冷藏或冷冻、避光等)。样品应避免破损或漏撒,产品标签应注明是否需要冰箱保存,不需要冷藏或冷冻的样品应放置于强度较高可以避免外界破坏的合适容

生物样品保存需要了解的问题

  1、生物样本保存应该在什么样的温度条件下?   生物样本的保存温度与样本的处理方式、样本特性、用途和保存时间直接相关,但科学界统一的共识是,如要长期保持生物样本的离体时的状态,必须保存在-135度玻璃化温度以下,只有在此温度以下,生物分子的微观移动才会完全停止,达到“时间停止运行”的状态,所以

透射电镜生物样品制备步骤

生物样品, 透射电镜, 制备步骤一.取材:组织块小于1立方毫米二.固定:2.5%戊二醛,磷酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次1%锇酸固定液固定 2-3小时用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次三.脱水:50%乙醇 15-20分70%乙醇 15-20分90%乙醇

食品微生物检验的样品处理

样品处理应在无菌室内进行,若是冷冻样品必须事先在原容器中解冻2℃一5℃不超过18h或45℃不超过15min。一般固体食品的样品处理方法有以下几种:1.捣碎均质方法将100g或100g以上样品剪碎混匀,从中取25g放入带225mI稀释液的无菌均质杯中8000~10000r/min均质1min~2min

全温空气摇床生物样品的培养制备

  全温空气摇床生物样品的培养制备      全温空气摇床,是一种温度可控的培养箱和大容量振荡器有机结合的高精度实验室设备,箱内增设循环风机强迫空气循环,温度分布更均匀,实验效果更好,具有光照与无光照两种规格,实验室设备全温摇床适用于液体微生物在一定温度下的振荡培养,控温精确,振荡速度平稳,同

全温空气摇床生物样品的培养制备

全温空气摇床,是一种温度可控的培养箱和大容量振荡器有机结合的高精度实验室设备,箱内增设循环风机强迫空气循环,温度分布更均匀,实验效果更好,具有光照与无光照两种规格,实验室设备全温摇床适用于液体微生物在一定温度下的振荡培养,控温,振荡速度平稳,同时具有温度、速度数字显示功能,运行状态清晰直观,是实验室

徕卡生物显微镜——样品室、-物镜单元

徕卡生物显微镜照明系统下部是样品室。制备好的厚度约几十nm的薄样品被放在直径3咖或2伽的栅网上。栅网是由铜丝编织成的,有100目一400目疏密不等。当进行成分分析或加温实验时,应改用尼龙网或耐高温的铝网。载有样品的栅网放在一根样品架前端的定位槽中。样品架从镜筒女顺入系统的光路中。根据工作要求。徕卡生

厌氧微生物检验用样品的采取

  取样检测厌氧微生物时,很重要的一点是食品样品中不能含有游离氧。例如在肉的深层取少量样品后,要避免使之暴露在空气当中。如只能抽取小样品,或需使用棉拭子取样时,就要用一种合适的转接培养基(如Stuart运送培养基)来降低氧的浓度。例如,如使用藻酸盐羊毛拭子取样后,就不能再放入原来的试管,而应放在盛有

生物样品的前处理技术DNA的提取

DNA主要存在于细胞核中,绝大数以脱氧核糖核蛋白形式存在。以1mol/L氯化钠溶液提取,将得到的脱氧核苷酸核蛋白黏液与含少量辛醇和戊醇的氯仿一起摇荡,除去蛋白质。

生物样品的前处理技术RNA的提取

用0.14mol/L氯化钠溶液将组织作匀浆并反复提取细胞质中的核蛋白,而留下含有DNA的细胞核物质,然后用10%乙酸调至pH4.2沉淀,离心弃去上清液,先用0.5mol/L氯化钠溶液沉淀后用水洗涤沉淀,得核糖核蛋白后溶解于0.5mol/L碳酸氢钠溶液中,离心,取上清液,调至pH4.2沉淀,以0.5m

微生物样品的取样方法表面取样

  通过惰性载体可以将表面样品上的微生物转移到合适的培养基中进行微生物的检验,这种惰性载体既不能引起微生物死亡,也不应使其增殖。这样的载体包括清水、拭子、胶带等。取样后,要使微生物长期保存在载体上,既不死亡又不增殖十分困难,所以应尽早的将微生物转接到适当的培养基中。转移前耽误的时间越长,品质评价的可

生物芯片样品的准备及杂交检测

  目前,由于灵敏度所限,多数方法需要在标记和分析前对样品进行适当程序的扩增,不过也有不少人试图绕过这一问题,如 Mosaic Technologies 公司引入的固相 PCR 方法,引物 特异性强,无交叉污染并且省去了液相处理的烦琐; Lynx Therapeutics 公司引入的大规模并行固相克

wes微量样品临床生物标志物定

后基因组时代,功能蛋白质组研究是临床医学非常重要的研究方向。通过功能蛋白质研究,发现新的生物标志物,用于疾病的临床诊断,药物研发,药物临床试验,对临床医学产生实质性的推动。典型的临床样本是稀缺的科学研究材料,临床研究需要定量的研究工具,因而在临床研究中针对微量样本,实现定量检测是技术平台必不可少的要

扫描电镜制样经验分享生物样品

生物样品具有含水量高、质地柔软、导电性差、容易变形等特点,因此采用扫描电镜观察生物样品时,必须对样品进行必要的处理。 生物样品通常指的是动物的体液、肌肉、毛发和一些组织器官,植物的根、茎、叶、果实等,以及各类微生物(细菌、真菌等)。生物样品的含水量高,一般为70%-80%,只有少数的样品,如一些花粉

生物样品蛋白质的常用分离技术

(1)加热法当待测组分热稳定性好时,可采用加热的方法将一些热变性蛋白质沉淀。加热温度视待测组分的热稳定性而定,通常可加热到90℃。蛋白质沉淀后可用离心或过滤除去,这种方法最简单,但只能除去热变性蛋白质。(2)盐析法利用不同蛋白质在高浓度的盐溶液中溶解度不同程度的降低来沉淀除去蛋白质。在低盐浓度下,蛋

如何采集生物样品?有哪些注意事项?

(1)生物样品的采集有时是在活体上采样,采样量不可能很大,如体液,有时只能采集几微升,最多也就几毫升,器官组织有时也只能采集几毫克。由于样品量很少,所以特别要注意样品的代表性。同时,又由于生物活体具有新陈代谢,要注意采样的时机。(2)要注意采样部位的准确,特别是动物的器官组织,一定要认准。(3)生物

生物安全柜样品溢出处理程序

在实验室工作的每一个人都应熟知含微生物的样品溢出时的处理程序。一旦生物安全柜中发生有生物危害的物品溢出时,应在安全柜处于工作状态下立即进行清理。要使用有效的消毒剂,并在处理过程中尽可能减少气溶胶生成。实验完毕后,柜中所有接触病原体的材料均应作消毒灭菌处理。

微生物实验样品采集及处理要求

1、所采集的检验样品一定要具有代表性,采样时应首先对该批食品原料、加工、运输、贮藏方法条件、周围环境卫生状况等进行详细调查,检查是否有污染源存在。2、根据食品的种类及数量,采样数量及方法应按标准检验方法的要求进行。3、采样应注意无菌操作,容器必须灭菌,避免环境中微生物污染,容器不得使用煤 酚皂溶液,

扫描电镜生物样品制备常用干燥方法

1. 自然干燥法 自然干燥法是指样品中的水分在大气中自然蒸发,或样品经脱水处理后脱水剂自然挥发而干燥的方法。 对干种子、果壳、某些干花粉、昆虫标本等来说,自然干燥法是一个简易实用有效的方法,虽然在自然干燥过程中,样品体积有所收缩,但却保留了样品的基本形态。适用于外表坚硬的样品,如外表有壳的昆虫,木材

生物样品分析ISR及ISR失败原因浅析

生物样品的特点是成分比较复杂,包括基质、内源性物质和代谢产物等,而待测物的含量却很低(pg~μg级水平),这对分析方法提出了很高的要求,分析方法需要通过验证才能用于实际样品的检测,而生物样品分析方法验证的主要指标之一是方法的重现性,试验样品再分析(incurred sample reanalysis

生物样品分析方法中基质效应的考察

LC/MSMS用于生物样品检测具有很高的灵敏度和选择性,但生物样品的基质干扰很大,基质组分有可能会干扰待测组分的质谱离子化效率,产生离子增强或抑制效应。使用MRM模式检测的时候,色谱图并不能反映出基质干扰对待测组分检测的影响,因此优化色谱条件时,通过直观的色谱图并不能很好地考察到基质效应的影响,如果