重组SARS2CoVS1蛋白抗原表位分析及抗原性检测

摘要:目的对严重急性呼吸系统综合征冠状病毒( SARS2CoV)刺突蛋白( Sp ike, S) S1段进行原核重组表达,并检测表达产物的抗原性。方法对S1中的HLA抗原表位进行预测分析,根据分析结果选定用于重组表达的区段,利用pET21b载体进行原核表达,将产物纯化后利用SARS抗血清进行抗原性检测。结果抗原表位分析表明, S1中包含有多个能够被HLA分子有效提呈的抗原表位,综合考虑表位肽的分布、重组表达的效率、重组蛋白的空间构象以及引物设计的优化等因素,选取S1中的关键区域259~565 aa进行原核重组表达,得到了包涵体形式的重组蛋白,经过纯化和复性,获得了纯度较高的可溶性S1蛋白;用SARS抗血清对此重组蛋白进行免疫学鉴定,表明该蛋白具有SARS特异的抗原性。结论重组表达的S1蛋白具有较强的抗原性,为进一步的疫苗研究和抗体筛选奠定了基础。 点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文

抗原表位是抗原肽吗

抗原表位,又称抗原决定指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。抗原通过抗原表位与相应的淋巴细胞表面的抗原受体结合,从而激活淋巴细胞,引起免疫应答;抗原也借表位与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合而发挥免疫效应。抗原表位的性质、数目和空间构型决定抗原的特异性。抗原肽具有免疫原性的多肽或抗原衍生肽。

什么是抗原表位

抗原决定簇其实就是抗原表位因为抗原是蛋白质,由氨基酸组成,我们知道抗原表位由两种要素组成,其一是氨基酸的顺序,其二是氨基酸的空间构象。要确定一类特异的抗原表位,就必须同时确定顺序以及空间构象。所以我觉得题目里的“结构已经确定”指的就是空间构象确定的时候的意思。

什么是抗原表位

抗原决定簇其实就是抗原表位因为抗原是蛋白质,由氨基酸组成,我们知道抗原表位由两种要素组成,其一是氨基酸的顺序,其二是氨基酸的空间构象。要确定一类特异的抗原表位,就必须同时确定顺序以及空间构象。所以我觉得题目里的“结构已经确定”指的就是空间构象确定的时候的意思。

什么是抗原表位?

抗原表位可以是由连续序列(蛋白质一级结构)组成或由不连续的蛋白质三维结构组成,决定抗原性的特殊化学基团,又称抗原决定簇。抗原决定簇大多存在于抗原物质的表面,有些存在于抗原物质的内部,须经酶或其他方式处理后才暴露出来。一个天然抗原物质可有多种和多个决定簇。抗原分子越大,决定簇的数目越多。

抗原、表位、抗体关系

抗原表位,又称抗原决定簇(antigenic determinant,AD)指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。抗原通过抗原表位与相应的淋巴细胞表面的抗原受体结合,从而激活淋巴细胞,引起免疫应答;抗原也借表位与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合而发挥免疫效应。抗原表位的性质、数目和空间构型决

抗原表位的分类

根据抗原表位中氨基酸的空间结构特点,可将其分为顺序表位和构象表位。顺序表喂由连续线性排列的氨基酸构成,又称线性表位,而构象表位有不连续排列、但在空间上彼此接近形成特定构象的若干氨基酸组成

什么是共同抗原表位?

在不同的抗原之间可以存在有相同或相似的抗原表位,称为共同抗原表位。共同抗原表位可引起交叉反应含有共同抗原表位的不同抗原称为交叉抗原。

Science新研究更新对抗原表位认知-罕见抗原表位或大有用

  2016年10月21日讯 /生物谷BIOON/ --最近一项新研究在细胞表面发现了许多新的免疫系统信号,这些新发现的信号分子或在肿瘤免疫治疗、自身免疫疾病和疫苗开发方面有潜在用途。  细胞会有规律地进行蛋白质分解,不管是对体内来源的蛋白,还是外部来源的蛋白,比如病毒和细菌。这些蛋白分解之后形成的

戊型肝炎病毒线性抗原表位克隆及表达的初步研究

 通过首位串联可以实现HEV线性表位较高效的表达。 Cloning and expression a linear epitope from hepatitis E virusXIA Xiaobing, HUANG Rutong, LI Derong.  (Institute of Microbio

重组蛋白表达系统

选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用。在这里,我

重组蛋白表达系统

  选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。   目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用

重组蛋白表达系统

  选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。   目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用

表位与半抗原的区别

表位与半抗原的区别:表位(epitope)又叫抗原决定基(antigenic determinant),指被抗原受体TCR和BCR特异性识别的抗原部分。一般来说,只有位于抗原物质表面的表位易与抗原识别受体或抗体结合,称功能性表位。而位于分子内部的表位无免疫原性,称隐藏性表位。表位的结构有两类:构象表

重组蛋白的表达与纯化

实验概要本实验将重组大肠杆菌经过诱导培养后,获得了表达的重组蛋白,分别用Ni-NTA柱亲和层析、High Q与DEAE阴离子交换层析、Glutathione柱亲和层析进行了层析纯化,并进行了浓缩。实验步骤1. 将测序正确的质粒转化Rosetta(DE3)菌,过夜培养后,挑取单菌落,于小试管内进行IP

选择重组蛋白表达的合适方法

重组蛋白是研究生物学过程的重要工具。需要使用表达系统来对其进行制备。合适表达系统的选择取决于重组蛋白的特性、重组蛋白的预期应用以及该系统能否生产足够量的蛋白质。作者: 伯吉斯等,主译:陈薇,本实验来自「蛋白质纯化指南」实验步骤一、引言选 择 合 适 醜 组 蛋 白 表 达 方 法 对 于 能 否 及

选择重组蛋白表达的合适方法

实验步骤 一、引言 选 择 合 适 醜 组 蛋 白 表 达 方 法 对 于 能 否 及 时 获 取 所 需 数 量 和 质 量 的 重z组蛋白非常关键。选 择 了 错 误 的表达宿主可 能 导 致 蛋 白 质错 误 折 叠 或

乙型肝炎病毒外膜蛋白前S1抗原

乙型肝炎病毒(HBV)外膜蛋白包括S、前S2和前S1三种成分。前S1蛋白在病毒侵入肝细胞过程中起重要作用。含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗粒上。前S1蛋白在病毒感染、装配、复制和刺激机体产生免疫反应等方面而起有十分重要作用。因此 前S1抗原(Pre-S1Ag)的检测同“二对半”一样很有

重组蛋白的高产量瞬时表达

图a. 用ELISA法测得培养液中IgG的含量;横轴为天数,纵轴为IgG滴度。 采用高密度瞬时转染(High-density transfection)的方法,可以在HEK-293 EBNA1细胞中大量表达重组蛋白。实验表明,该方法具有操作简单,培养周期短,转染效率高,批次产量高的优

选择重组蛋白表达的合适方法(一)

一、引言选 择 合 适 醜 组 蛋 白 表 达 方 法 对 于 能 否 及 时 获 取 所 需 数 量 和 质 量 的 重z组蛋白非常关键。选 择 了 错 误 的表达宿主可 能 导 致 蛋 白 质错 误 折 叠 或 低 量 表 达 . 缺 少 必要的翻译后 修 饰或不适当的修饰 。选 择 表

选择重组蛋白表达的合适方法(三)

五、哺 乳 动 物 细 胞以前通常认为哺乳动物表达方法是重组蛋白表达效率最低的方法。然 而 ,最近的研究进展已经极大地提高了哺乳动物细胞系的表达水平(详 见 第 15章)。例如, 有报道称利用稳定转染的中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,C H O )细胞,重组抗体的表

重组蛋白表达的几种常用标签介绍

 重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。本文将简要介绍几个常用载体标签及其功能和优点。一. GST标签GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解毒过程中起到重要作用的转移酶,它的天然大小为26KD。将它应用在原

选择重组蛋白表达的合适方法(二)

三、毕赤酵母酵 母 作 为 另 一 种 表 达 重 组 蛋 白 的 强 有 力 的 传 统 工 具 ,已 被 成 功 应 用 于 大 量 蛋 白 质 的表 达 。酵 母 既 具 有 大 肠 杆 菌 的 许 多 优 点 ,如 增 殖 时 间 短 、基 因 组 易 于 操 作 ,又 具 有 真

关于位点特异性重组的基因的表达调控介绍

  如果一个DNA分子上两个特异位点之间发生重组,其后果有两种可能性:两个位点之间的节段或被丢失,或被颠倒。有些生物能够利用这种重组倒置来控制基因的表达。因为DNA的一正一倒两种排列法可以相应地表达两种不同的蛋白质,细胞就可根据需要作出选择。奇怪的是,利用这种机制所调节的蛋白质往往都位于生物的体表。

乙肝前S1抗原的检测

乙型肝炎病毒(HBV)外膜蛋白包括S、前S2和前S1三种成分。前S1蛋白在病毒侵入肝细胞过程中起重要作用。含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗料上。前S1蛋白在病毒感染、装配、复制和刺激机体产生免疫反应等方面起有十分重要作用。   乙肝病毒前S1抗原酶免测定试剂盒的正式推向临床以及近两年

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乙肝前S1抗原的简介

  乙型肝炎病毒(HBV)外膜蛋白包括S、前S2和前S1三种成分。前S1蛋白在病毒侵入肝细胞过程中起重要作用。病毒附着于肝细胞上,最重要的介导部位是前S1蛋白的氨基酸(AA)21-47片段,变异的病毒只要这一区段完好就有传染性。含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗料上。前S1蛋白在病毒感染

CCLM:检测SSA/Ro52抗原p200抗原表位的自身抗体

 由于抗p200抗体与胎儿自身免疫先天性心脏传导阻滞(CHB)的风险相关联的发现,该抗体目前受到越来越多的关注。本研究比较并评估了目前用于检测其的两种检测方法的性能。研究人群为116例抗SSA / Ro52抗体阳性的孕妇。并以50名抗SSA / Ro52抗体阴性的女性作为对照。使用两种自制的ELIS

重组蛋白真核表达系统与原核表达系统的区别

 重组蛋白真核表达采用原核表达系统进行研究,主要方法是将已克隆到目的基因DNA的片段的载体转化到细菌中,通过IPTG诱导和终纯化获得所需的目的蛋白。其优点是可以在短时间内获得基因表达产物,所需成本相对较低。   目前的表达系统各有利弊,但一般理想的表达系统满足以下几点:一是特异性,不受其他内源性因素

表位决定抗原特异性的特殊性结构

表位是存在于抗原表面的,决定抗原特异性的特殊性结构的化学基团称为抗原决定簇,又称表位。抗原通过表位与相应淋巴细胞表面抗原 受体结合,从而激活淋巴细胞,引起免疫应答;抗原也借此与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合。单个抗原分子可具有一种或多种不同的表位,其大小相当于相应抗体的抗原结合部位,每种表位只

重组载体表达蛋白咪唑洗脱无洗脱峰

是不是没表达出来?是不是形成包含体了?这个一般第一步的产物都得检测.阴性对照,没过柱前,过柱余下的,柱上洗下的.还有可能是浓度太低检测不到.自己的实验自己最清楚了.