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重组SARS2CoVS1蛋白抗原表位分析及抗原性检测

摘要:目的对严重急性呼吸系统综合征冠状病毒( SARS2CoV)刺突蛋白( Sp ike, S) S1段进行原核重组表达,并检测表达产物的抗原性。方法对S1中的HLA抗原表位进行预测分析,根据分析结果选定用于重组表达的区段,利用pET21b载体进行原核表达,将产物纯化后利用SARS抗血清进行抗原性检测。结果抗原表位分析表明, S1中包含有多个能够被HLA分子有效提呈的抗原表位,综合考虑表位肽的分布、重组表达的效率、重组蛋白的空间构象以及引物设计的优化等因素,选取S1中的关键区域259~565 aa进行原核重组表达,得到了包涵体形式的重组蛋白,经过纯化和复性,获得了纯度较高的可溶性S1蛋白;用SARS抗血清对此重组蛋白进行免疫学鉴定,表明该蛋白具有SARS特异的抗原性。结论重组表达的S1蛋白具有较强的抗原性,为进一步的疫苗研究和抗体筛选奠定了基础。 点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文

一文读懂21世纪的新型疫苗技术

  疫苗开发的新方法包括基于结构的免疫原设计,基于基因的疫苗平台以及具有有效佐剂的重组抗原制剂。这些技术在开发针对全球重要疾病(例如结核病,流感和呼吸道合胞病毒)的疫苗方面取得令人鼓舞的结果。在这里,我们重点介绍了过去 18 个月中这些领域中最重要的发展。图片来源于网络  最成功的疫苗能够针对引起个

胶体金法检测新型冠状病毒

  最近几个公司和部门都宣传开发了可以快速检测新型冠状病毒感染的试剂盒,在此不评价其特异性和灵敏度,只是探讨一下背后的原理。  一种是类似现在在流感病毒检测中常见的胶体金试纸。  胶体金试纸,实际上就是用一种胶体形式的金标记生物大分子,并在PVC材质的试纸固定,留上加样孔,设上检测线和质量控制线,这

药物筛选方法开发中的注意事项

  在任何药物研发进程中,实验方法的设计和优化对新药研发的成功性而言至关重要。我们需要考虑的因素包括:选择最合适的检测技术,读取模式,和实验模型(生物化学,细胞或动物)。通常,这些因素会影响数据质量,生物相关性以及治疗的可预测性,最终将影响整个临床前药物开发工作的成败。   方法技术的选择

药物筛选方法开发中的注意事项

    在任何药物研发进程中,实验方法的设计和优化对新药研发的成功性而言至关重要。我们需要考虑的因素包括:选择最合适的检测技术,读取模式,和实验模型(生物化学,细胞或动物)。通常,这些因素会影响数据质量,生物相关性以及治疗的可预测性,最终将影响整个临床前药物开发工作的成

贝克曼离心技术在新冠疫苗研发的运用

有效药物与疫苗是防控新冠疫情的制胜武器。疫情发生以来,国内外多家科研机构和制药公司兵分多路,与时间赛跑,全力以赴开发有效抗病毒药物与疫苗。 贝克曼库尔特生命科学事业部作为一家以“服务健康中国2030”为愿景的公司,一直关注疫情发展,全力支持前线的同时,旗下的多款产品助力新冠治疗药物与疫苗研

药物筛选方法开发中的注意事项

在任何药物研发进程中,实验方法的设计和优化对新药研发的成功性而言至关重要。我们需要考虑的因素包括:选择最合适的检测技术,读取模式,和实验模型(生物化学,细胞或动物)。通常,这些因素会影响数据质量,生物相关性以及治疗的可预测性,最终将影响整个临床前药物开发工作的成败。方法技术的选择 第一步是确立解决实

基因工程重组抗体技术的研究

在抗体研究的漫长过程中,相继发展了三代不同水平的抗体制备技术。其中以抗原免疫高等脊椎动物制备的多克隆抗体,称为第一代抗体;通过杂交瘤技术生产的只针对某一种特定抗原决定簇的单克隆抗体,称为第二代抗体;应用重组DNA技术或是基因突变的方法改造某种抗体基因的编码序列,使之产生出自然界中原本存在的抗体蛋白质

光系统Ⅰ抗体简介及分类

PHYTOAB公司最新研发了许多用于光合作用研究的抗体。并且有些抗体是蛋白A纯化或免疫亲和纯化的兔多克隆抗体,可以广泛应用于Western blot , ELISA等。 光合作用相关抗体 PSIPSI的主要亚基包括PsaA和PsaB,是光系统I的密切

关于抗体种类繁多的原因

人类生活在杂乱多变的环境中,每时每刻都会触摸到各式各样的微生物,受到一些相似抗原物质的侵扰,从而使机体致病。为了抵御这些外来侵扰,使自身得以持续生存,人体必须构成几十万、几百万甚至更多种相应的特异性抗体以抵挡外界的抗原物质,才华免遭其害,保护自己。咱们会从抗体的发作及多样性进行其原因的论述与剖析。1

Agrisera公司抗体常见问题问答(一)

1. 问:多克隆抗体的优势是什么?答:多克隆抗体能够同时识别具有多种不同表位的抗原,具有能够容忍抗原微小的改变如聚合或轻微的变性。检测变性蛋白质多克隆抗体是理想的选择。2. 问:血清中的多克隆抗体的具体浓度是多少?答:最常见的是,血清中特异性抗体浓度变化是0.05-0.2 mg/

这是下一代新冠疫苗?《柳叶刀》:已投入临床

  近日,《柳叶刀》以“在线优先”的形式,发表了三叶草生物“S-三聚体”重组亚单位新冠候选疫苗(SCB-2019)的1期临床试验中期分析结果。结果表明,候选疫苗可以诱导出高水平的中和抗体,并表现出了良好的安全性和耐受性。图片来源:The Lancet  SCB-2019是一种新冠病毒表面抗原S蛋白三

Agrisera公司抗体常见问题问答(二)

9. 问:选择哪个物种用于免疫接种?答:使用IgG (兔、山羊)和IgY(鸡)抗体针对同一抗原的优势:----独立确认预期的目标蛋白质被检测。——抗体库具有不同的特性,在不同的技术中能起到互补的作用(免疫印迹、免疫沉淀反应等)双重染色。----一般从遗传角度上选择与抗原有较远的亲源关系的物

微生物所在热休克蛋白gp96生物学功能研究取得系列成果

  热休克蛋白gp96是细胞中表达丰度很高的一种分子伴侣蛋白,在多种新生蛋白折叠与受损蛋白降解、病毒与肿瘤抗原呈递和T细胞活化、损伤相关的分子模式(DAMPs)介导的天然免疫、引发抗肿瘤与抗病毒T细胞免疫,以及作为宿主因子调节病毒复制、驱动炎癌转化和肿瘤发生发展等方面均发挥重要功能,该蛋白在进化中高

热休克蛋白gp96生物学功能研究取得系列成果

热休克蛋白gp96是细胞中表达丰度很高的一种分子伴侣蛋白,在多种新生蛋白折叠与受损蛋白降解、病毒与肿瘤抗原呈递和T细胞活化、损伤相关的分子模式(DAMPs)介导的天然免疫、引发抗肿瘤与抗病毒T细胞免疫,以及作为宿主因子调节病毒复制、驱动炎癌转化和肿瘤发生发展等方面均发挥重要功能,该蛋白在进化中高度保

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板

幽门螺杆菌研究进展

幽门螺杆菌研究进展幽门螺杆菌及其感染  1 概述  胃细菌学的研究,长期来是一个被忽视的领域。1983年Marshall和Warren从慢性活动性胃炎患者胃粘膜活检标本中分离到幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是对这一领域重要的突破。此后不久即在国际消化病学界引起了巨大轰动,

“即用型”CAR-T疗法有未来么?

  自CAR-T疗法在2017年首次获批以来,这一突破性疗法的临床前和临床期开发出现了爆发式的增长。去年的ASH年会上,杨森(Janssen)/南京传奇、百时美施贵宝(BMS)、吉利德科学/Kite Pharma、和诸多中国生物医药公司开发的CAR-T疗法亮出令人惊艳的数据。今年,更可能有2款以上C

人类历史上第一个肝癌疫苗——乙肝疫苗

  2017年4月21日,世界卫生组织4月21日发布的《2017年全球肝炎报告》显示,全球约有3.25亿人感染慢性乙肝病毒或丙肝病毒。2.57亿人染有乙肝病毒,7100万人染有丙肝病毒。这些病毒感染者中的绝大多数人无法获得可拯救生命的检测和治疗。因此,数百万人面临着发展到慢性肝病、癌症和死亡的风险。

案例解析 | 抗病毒生物大分子制药治疗

  近期爆发的新型冠状病毒肺炎(COVID-19,对应的病毒为SARS-CoV-2)突出了开发有效治疗方法的重要性。在近期的公众号中,我们向大家介绍了“人民的希望”瑞德西韦的工作机制[1],在此,我们结合疫苗、血清、多肽和单抗的研究案例,向大家继续介绍靶向病毒的大分子治疗和我们的解决方案是如何推动下

如何验证抗体参数,确保特异性,选择性和重复性?

你有没有从抗体供应商那里订购过抗体? 你遇到过抗体特异性,选择性和重复性出问题吗? 你是否曾将抗体退回给供应商,却收到另一份劣质产品吗? 如果你对上述问题的回答是肯定的,那么你也遭受过“坏”抗体的毒害。据估计,所有购买的抗体中约有50%是“坏的”,仅在美国就浪费了约3.

R&D Systems试剂 Q&A 常见问题解答 (1)

问:R&amD Systems有分装试剂吗?答:没有分装试剂。R&amD Systems公司不会分装,也没有授权任何公司进行分装。目前市场上所谓的“RD分装试剂”是没有品质保证的3无产品,R&amD Systems公司不承担任何“RD分装试剂”的售后服务。在此,建议广

多羟基反应单克隆抗体的鉴定、生产和使用

所有形式的亲和层析法都需要两个组分间形成特异性相互作用,通过这种作用可以纯化其中一种组分。免疫亲和层析即利用抗原和抗体的特异性相互作用,是遵循亲和层析原理的一个分类 [综述见 Subramanian(2002)]。事实上,免疫亲和层析是免疫沉淀程序规模放大的拓展应用,不同的部分在于, 层析后需要回收

建立用于抗原表位精细作图的肽生物合成法

  上海市计划生育科学研究所研究员徐万祥和复旦大学生命科学院谢毅课题组合作,建立了专门用于线性表位精细鉴定的生物合成肽法。相关成果日前发表于美国《科学公共图书馆·综合》期刊。   据介绍,新改良法仍使用截短谷胱甘肽巯基转移酶(GST188)作为基因工程表达任意短肽的载体,但通过在pXXGST-1质

多羟基反应单克隆抗体的鉴定、生产和使用——免疫亲和层析

实验步骤 一、多羟基反应单克隆抗体 我们最先使用了一类特殊的单克隆抗体, 并将其用于免疫亲和层析。这些抗体可以用于温和的免疫亲和层析, 因为洗脱条件只需要联合使用无离液盐和低分子质量的多羟基化合物 (多元醇),此条件下蛋白质呈非

简述基因治疗的最新临床研究进展

  基因疗法以其“一次给药,终身受益”的优势越来越受到医疗市场的青睐。截至目前,欧洲药品管理局(EMA)、美国食品药品管理局(FDA)及中国国家食品药品监督管理总局(NMPA)等机构至少已批准13种基因治疗产品上市,同时还有2500多项细胞和基因治疗正在进行临床试验。2019年8月,国际顶级期刊《新

简述基因治疗的最新临床研究进展

  基因疗法以其“一次给药,终身受益”的优势越来越受到医疗市场的青睐。截至目前,欧洲药品管理局(EMA)、美国食品药品管理局(FDA)及中国国家食品药品监督管理总局(NMPA)等机构至少已批准13种基因治疗产品上市,同时还有2500多项细胞和基因治疗正在进行临床试验。2019年8月,国际顶级期刊《新

利用现代生物技术进行多肽类药物的生产和改进

    目前我国的生物技术药物研究已开始步入自主创新时期,尤其是利用现代生物技术生产多肽类药物将成为我国今后多肽类药物生产和改进的主要途径,具体有以下几个方面。    1、利用组合化学与药物高通量筛选相结合的技术开发多肽类药物组合化学技

利用现代生物技术进行多肽类药物的生产和改进

  目前我国的生物技术药物研究已开始步入自主创新时期,尤其是利用现代生物技术生产多肽类药物将成为我国今后多肽类药物生产和改进的主要途径,具体有以下几个方面。     1、利用组合化学与药物高通量筛选相结合的技术开发多肽类药物组合化学技术使一次合成成千

什么是酵母双杂?

   酵母双杂交技术,它是通过利用转录激活因子GAL4的特性而建立的。GAL4由两个结构域组成,一个为N端的DNA结合域(DNAbinding domain,DBD),另一个是C端的转录激活域(active domain,AD),二者可以从核酸一级结构上分开而独立表达出有功能的结构域;当二者在物理空

酵母双杂是什么?

   酵母双杂交技术,它是通过利用转录激活因子GAL4的特性而建立的。GAL4由两个结构域组成,一个为N端的DNA结合域(DNAbinding domain,DBD),另一个是C端的转录激活域(active domain,AD),二者可以从核酸一级结构上分开而独立表达出有功能的结构域;当二者在物理空