蛋白质浓缩和溶质的去除实验

预计在新奇的一级分子和生物仿制药实体方面将会有突出的增长。一些进步的是改良的分析、开发和相互作用。现在已有许多用于去除關的方法,包括冻干、反向萃取、溶质析出,precipitation、透析(溶剂交换) 、超滤和层析技术。值得注意的是,在众多微和设备发展的支持下,小型化和高通量的蛋白质分析取得了极大的进步,为小规模的样品制备。实验步骤一、层析在过去的 2 0 年中,蛋白质组学技术的日益广泛应用,使蛋白质浓缩和脱盐的层析技术得到不断革新。蛋白质组学通常需要从少量复杂的混合物中富集蛋白质,包括选择性地浓缩特定种类的蛋白质。由于质谱 (M S ) 和基于抗体检测技术的高灵敏度及可提供详细生化特征的性质,它们在临床诊断、生物药物鉴定以及蛋白质结构与功能的基础性研究等广泛的应用中具有很高的实用性。这些应用需要分析生物体液中含量很低的药物靶标和生物标志物, 或采集表达于异源系统的蛋白质的结构及翻译后修饰的详细信息。用于蛋白质组学分析的样品通......阅读全文

蛋白质的浓缩技术方法

  (一)浓缩胶浓缩法   浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物,具有很强的吸水性能。每克干胶可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物质,如水、葡萄糖、蔗糖、无机盐等,适宜浓缩10 000分子量以上的生物大分子物质。浓缩后,蛋白质的回收率可达80%~90%。比浓缩胶应用方便,直接加入被

Norgen试剂盒在总蛋白浓缩去污剂和内毒素去除的应用

蛋白质浓缩技术属于生物大分子的浓缩技术,目的是利用物理或化学的方法,除去蛋白质溶液中的水分、离子和其它小分子物质,使单位体积内的蛋白质浓度大幅度提高。蛋白质样品经过一系列的分离提取和层析会导致样品的稀释,而许多分析和研究都需要高浓度或高纯度的样品,所以蛋白质样品的浓缩至关重要。蛋白质浓缩技术主要有透

从稀释水溶液中萃取和浓缩蛋白质

《从稀释水溶液中萃取和浓缩蛋白质》(Extraction and Concentration of Protein from Dilute Aqueous Solution) 应用领域:生物/生物科技 目标分析物:牛血清白蛋白BSA 样品基质:水 萃取柱:BAKERBOND s

蛋白质沉淀浓缩方法

在生化制备中,沉淀主要用于浓缩目的,或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制备中常用的有以下几种沉淀方法和沉淀剂:  1.盐析法 多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。  2.有机溶剂沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化,有时也用于蛋白质沉淀。  3.等电点沉淀法 用于氨基酸、

聚乙二醇沉淀法浓缩蛋白质实验

实验方法原理聚乙二醇(PEG)是一个非离子水溶性多聚体,使用 PEG 沉淀蛋甶质时,只在个别浓度下才使蛋白质稍有变性。由于 PEG 溶解时散热低,形成沉淀的子衡时间短等特点,使它在蛋白质的组分分离以及结晶中成为一个有用的试剂。通常 PEG 终浓度达 30% 时,蛋白质就能够达到最大量沉淀。实验材料蛋

硫酸铵沉淀法浓缩蛋白质实验

硫酸铵沉淀法             实验方法原理 当高浓度盐存在时,蛋白质往往凝聚并析出沉淀。这一技术称为「盐析」。不同的蛋白质在不同浓度的盐中形成沉淀,所以盐析常用于蛋白质的分离

聚乙二醇沉淀法浓缩蛋白质实验

聚乙二醇法             实验方法原理 聚乙二醇(PEG)是一个非离子水溶性多聚体,使用 PEG 沉淀蛋甶质时,只在个别浓度下才使蛋白质稍有变性。由于 PEG 溶解时散

聚乙二醇沉淀法浓缩蛋白质实验

实验方法原理 聚乙二醇(PEG)是一个非离子水溶性多聚体,使用 PEG 沉淀蛋甶质时,只在个别浓度下才使蛋白质稍有变性。由于 PEG 溶解时散热低,形成沉淀的子衡时间短等特点,使它在蛋白质的组分分离以及结晶中成为一个有用的试剂。通常 PEG 终浓度达 30% 时,蛋白质就能够达到最大量沉淀。

硫酸铵沉淀法浓缩蛋白质实验

实验方法原理 当高浓度盐存在时,蛋白质往往凝聚并析出沉淀。这一技术称为「盐析」。不同的蛋白质在不同浓度的盐中形成沉淀,所以盐析常用于蛋白质的分离纯化。几种因素如 pH 、温度、蛋白质纯度在测定各种蛋白质的盐析时起着重要作用。选择硫酸铵是因为它具有一些优良性质,如盐析的有效性、pH 范围广、溶解度高、

有机溶剂浓缩蛋白质

蛋白质浓缩有多种方法,有盐析,超滤,离子交换,有机溶剂沉淀等方法有机溶剂沉淀法在多肽分离中用的特别多,现简要说明如下,希望对各位新虫有所帮助有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低溶液的电解常数,从而增加蛋白质分子上不同电荷的引力,导致溶解度的降低;另外,有机溶剂与水的作用,能破坏蛋白质的水化膜,故蛋白质在一

蛋白质浓缩、干燥及贮存

一、样品的浓缩生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀,为了保存和鉴定的目的,往往需要进行浓缩。常用的浓缩方法的: 减压加温蒸发浓缩 通过降低液面压力使液体沸点降低,减压的真空度愈高,液体沸点降得愈低,蒸发愈快,此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。 空气流动蒸发浓缩 空

DNA-污染的柱上去除实验

            试剂、试剂盒 DNA 酶 I 缓冲液 DNA 酶 I 仪器、耗材 细胞裂解液

DNA-污染的柱上去除实验

该方案可用于使用硅基 RNA 结合柱的 RNA 分离策略,例如方案 6。然而,可能不会 实现 100% 除去 DNA。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒DNA 酶 I 缓冲液DNA 酶 I仪器、耗材细胞裂解液实验步骤一、材料1. 酶和酶缓冲液DNA 酶 I,扩

DNA-污染的柱上去除实验

试剂、试剂盒 DNA 酶 I 缓冲液 DNA 酶 I仪器、耗材 细胞裂解液实验步骤 一、材料1. 酶和酶缓冲液DNA 酶 I,扩增级(无 RNA 酶)DNA 酶 I 缓冲液,10X2. 细胞和组织利用总 RNA 纯化试剂盒(例如 Madigen 总 RNA 快速纯化系统)获得的细胞裂解液。二、方法1

DNA-污染的洗脱后去除实验

            试剂、试剂盒 EDTA DNA 酶Ⅰ DNA 酶Ⅰ缓冲液 RNA 样品 仪器、耗材

DNA-污染的洗脱后去除实验

述方案是 Dilworth 和 Huang 方案的修改(DilworthandMcCarey1992;Huangetal.2000)。它可以用于从大多数商用试剂盒和试剂制备的 RNA 中去除 DNA 污染。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒EDTADNA 酶Ⅰ

DNA-污染的洗脱后去除实验

试剂、试剂盒 EDTADNA 酶ⅠDNA 酶Ⅰ缓冲液RNA 样品仪器、耗材 水浴锅实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水EDTA,25 mmol/L2. 酶和酶缓冲液DNA 酶Ⅰ, 扩增级(无 RNA 酶)DNA 酶Ⅰ缓冲液,10X3. 核酸和寡核苷酸RNA

用酸沉淀法浓缩蛋白质实验——丙酮沉淀法

实验材料含蛋白质的样品试剂、试剂盒丙酮(或其他有机溶剂如乙醇或甲醇)仪器、耗材Eppendorf 管(小塑料离心管)Eppendorf 管离心机(小型台式离心机)混旋器实验步骤1. 加 1 ml冷丙酮(-20℃)至 200 ul 样品溶液,混匀。2. -20℃: 放置 10 min。3. 小型台式离

尿液的浓缩和稀释

一、尿液的稀释当小管液中的溶质被重吸收而水不易被重吸收时,则造成尿液的稀释。这种情况主要发生在髓袢升支粗段。由于髓袢升支粗段能主动重吸收Na+和C1-,而对水不通透,故水不被重吸收,造成髓袢升支粗段小管液为低渗。在体内水过剩而抗利尿激素释放被抑制时,集合管对水的通透性非常低。因此,髓袢升支粗段的小管

透析法浓缩蛋白质溶液

实验方法原理透析法主要用于更换蛋白质的缓冲溶液,如果在真空或吸湿环境中也可作为浓缩蛋白质溶液的一种方法(例如 PEG、Sephadex)。将蛋白质溶液盛在一个半透膜袋内,此膜能防止蛋白质丢失而无论在常压或减压下可与周围的缓冲溶液进行溶质交换。除小体积样品之外,根据扩散原理进行的透析法非常耗时,因此蛋

透析法浓缩蛋白质溶液

透析法             实验方法原理 透析法主要用于更换蛋白质的缓冲溶液,如果在真空或吸湿环境中也可作为浓缩蛋白质溶液的一种方法(例如 PEG、Sephadex)。将蛋白质溶

透析法浓缩蛋白质溶液

实验方法原理 透析法主要用于更换蛋白质的缓冲溶液,如果在真空或吸湿环境中也可作为浓缩蛋白质溶液的一种方法(例如 PEG、Sephadex)。将蛋白质溶液盛在一个半透膜袋内,此膜能防止蛋白质丢失而无论在常压或减压下可与周围的缓冲溶液进行溶质交换。除小体积样品之外,根据扩散原理进行的透析法非常耗时,因此

应用切向流技术的DNA/蛋白质样品制备方案

生命科学研究中应用切向流技术(TFF)的DNA/蛋白质样品制备方案        生命科学实验室的超滤设备 密理博提供的实验室超滤全套解决方案         尽管切向流过滤Amicon® Ultra的超速装置,提供优良的性能(使用水平吊篮转子尤佳)。更多的用于与大规模操作

实验动物被毛去除方法

  动物实验前应去除实验操作局部的被毛,以免影响实验操作和观察。常用的被毛去除方法有拔毛法、剪毛法、剃毛法和脱毛法四种。一、拔毛法    实验动物被固定后,用食指和拇指将暴露部位的毛拔去。进行采血或动、静脉穿刺时,常用此方法暴露血管穿刺的部位。拔毛不但暴露了血管,而且刺激了局部组织产生扩张血管的作用

Spectra/Gel浓缩剂使蛋白质溶液的浓缩过程及使用步骤

 Spectra/Gel浓缩剂使蛋白质溶液的浓缩过程及使用步骤:  1、Spectra/Gel使蛋白质溶液的浓缩过程变得快捷,其以聚丙烯酸酯-多元醇制成,高亲水性,吸水后膨胀,吸水力强。  2、这种高分子聚合物可与截留分子量(MWCO)从100到1,000,000道尔顿的透析膜配用,且不会污染样品。

残留农药的危害和去除方法

  食品安全问题永远是社会中的热门话题,也是百姓最关注的,郑州沃邦仪器设备有限公司主营氨基酸分析仪、农药残留检测仪等各种仪器设备,下面就为您介绍下果蔬残留农药的危害和去除办法,为了您和家人的身体健康,希望您可以多关注这方面的信息。       近两年不断被揭露的苏丹红、毛发酱油、瘦肉精、毒大米、地沟

大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验

离心法 聚乙二醇相沉淀及层析法浓缩病毒             实验材料 病毒细胞 试剂

大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验

实验材料 病毒细胞试剂、试剂盒 小牛血清仪器、耗材 滤器转子实验步骤 1.  将产病毒细胞按1:10或1:20从刚生长汇片的细胞分传至20~50个10 cm 培养皿中,培养细胞至50%~90%汇片。2.  弃去培养液,轻轻加入半量的培养液,注意培养液碱性不要过大,培养2~3天。 3.  收取上清,用

大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验

对于某些用途来说(如体内感染细胞),有必要浓缩反转染病毒原液以增加其滴度。如果想要用不编码可选择标记的病毒感染一群细胞,必须用髙滴度的病毒。操作中需用几百毫升至几升的产毒细胞上清。聚乙二醇相沉淀及层析法浓缩病毒实验材料病毒试剂、试剂盒PEGNTE仪器、耗材转子离心机实验步骤1.  制备病毒原液。加5

使用Porvair-Microlute-P3蛋白质沉淀板去除蛋白质

生物样品通常含有干扰下游应用的蛋白质。P3板使用“碰撞法”,其中蛋白质用乙腈变性,并过滤出絮凝剂,一次可处理96个样品。蛋白质沉淀板P3基于行业标准的MicroluteTM格式,但没有色谱吸附剂。加入乙腈后,蛋白质会从溶液中“破裂”并直接沉淀在每个孔中,从而解决了与蛋白质清除CRASH技术相关的所有