PEI沉淀法分级分离可溶性提取物实验

试剂、试剂盒提取液硫酸铵聚乙烯亚胺缓冲液 A二硫苏糖醇仪器、耗材Tissuc-TearorTM 匀浆器实验步骤材料与设备提取液〔0.2% 脱氧胆酸钠 (DOC) 上清,见实验 1,P.146~147〕Tissuc-TearorTM 匀浆器(Fisher Scientific 15-338-55)硫酸铵 (AMS)试剂聚乙烯亚胺 (PEI)(10% 储液,pH7.9)缓冲液 A缓冲液 A+0.3mol/LNaCl缓冲液 A+0,9mol/LNaCl二硫苏糖醇 (DTT)(0.1moVL)(配方,见“试剤的配制” PP.I84~189)操作程序1) 将 0.75 ml10%PEI 液加入体积约为 24 ml 的可溶性提取物 (0.2%DOC 上清) 中, 使 PEI 终浓度为 0.3%。混合后,4°C 下静置 15 min。方案补充实验:加 PEI 前,取 6x50ul 的 0.2%DC 上清,用以确定沉淀σ32 和 RN......阅读全文

Transfection-with-PEI

实验概要Use PEI (Linear 25 kDa Reagent) to transfect in HEK293T cells.主要试剂PEI is polyethyleimine, a 25 kDa linear from Polysciences Inc. Make up solutio

PEI-转染法

材料: 质粒DNA 指数生长的真核细胞 PEI (聚乙烯亚胺) 1×HBS (pH7.4) 配方: PEI 储存液(100 μM):称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS (pH7.4)中, 0.2 μm 滤膜过滤,储存于4℃备用。 1×HBS (pH7.4): 将8.76 g

PEI-转染法

材料:质粒DNA指数生长的真核细胞PEI (聚乙烯亚胺)1×HBS (pH7.4)配方:PEI 储存液(100 μM):称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS (pH7.4)中, 0.2 μm 滤膜过滤,储存于4℃备用。1×HBS (pH7.4): 将8.76 g NaCl 溶解

PEI转染手册

使用方法1. 接种细胞:用胶原酶消化细胞并计数(不建议用胰酶)。转染前 18-24 小时进行细胞的铺板,以便在转染时,贴壁细胞的密度大约在 80%左右。注:培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。2. 准备 EZ Trans-DNA 复合物1)转染前将所有试剂置于室温 10 分钟。下面,以转染 24

pei瞬时转染原理

pei瞬时转染技师的原理瞬时转染是指将构建好的质粒通过某种方式导入到哺乳动物细胞内(主要指HEK293细胞),该质粒上的外源基因不整合到细胞自身的基因组上。

为什么要将pei加到质粒里

这是程序就这么设计的。无论是转染还是转化,其关键因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞,以提高细胞膜的通透性,从而使外源DNA分子能够容易进入细胞内部。所以在习惯上,人们往往也通称转染为广义的转化。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类。pei原理:外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、

PEI亚纳米多孔分离膜研究获进展

近期,中国科学院近代物理研究所材料研究中心与中山大学、河北大学等,利用重离子束辐照技术制备出具有优异离子分离性能的聚醚酰亚胺(PEI)亚纳米多孔分离膜。相关研究成果以Efficient ion sieving and ion transport properties in sub-nanoporou

pei配制转染需要培养基无血清吗

需要,因为血清组分复杂,会影响转染复合物的形成。

从-PEI-沉淀洗脱σ32-和-RNA-聚合酶实验

试剂、试剂盒缓冲液 A含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol LNaCl 的缓冲液 A仪器、耗材SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶实验步骤材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶(10%)试剂缓冲液 A含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol/LNa

从-PEI-沉淀洗脱σ32-和-RNA-聚合酶实验

            试剂、试剂盒 缓冲液 A 含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol LNaCl 的缓冲液 A 仪器、耗材

从-PEI-沉淀洗脱σ32-和-RNA-聚合酶实验

试剂、试剂盒 缓冲液 A 含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol LNaCl 的缓冲液 A仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶实验步骤 材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶(10%)试剂缓冲液 A含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol

PEI-沉淀法分级分离可溶性提取物实验

试剂、试剂盒提取液硫酸铵聚乙烯亚胺缓冲液 A二硫苏糖醇仪器、耗材Tissuc-TearorTM 匀浆器实验步骤材料与设备提取液〔0.2% 脱氧胆酸钠 (DOC) 上清,见实验 1,P.146~147〕Tissuc-TearorTM 匀浆器(Fisher Scientific 15-338-55)硫酸

PEI-沉淀法分级分离可溶性提取物实验

试剂、试剂盒 提取液硫酸铵聚乙烯亚胺 缓冲液 A二硫苏糖醇仪器、耗材 Tissuc-TearorTM 匀浆器实验步骤 材料与设备提取液〔0.2% 脱氧胆酸钠 (DOC) 上清,见实验 1,P.146~147〕Tissuc-TearorTM 匀浆器(Fisher Scientific 15-338-5

PEI-沉淀法分级分离可溶性提取物实验

材料与设备提取液〔0.2% 脱氧胆酸钠 (DOC) 上清,见实验 1,P.146~147〕Tissuc-TearorTM 匀浆器(Fisher Scientific 15-338-55)硫酸铵 (AMS)试剂聚乙烯亚胺 (PEI)(10% 储液,pH7

蛋白质沉淀技术(三)

3.策略 C 的基本操作程序(1) 配制 10%(V/V)[5%(m/V)] 的 PEI 储存液。PEI(WV) 常以 50%(m/V) 的黏稠液体状态存在(来自于 MPBiochemicals 的 PEI, 其相对分子质量 Mw=50000?100000, 也可采用其他来源,如 Sigma 和

PolySciences转染试剂于临床前和临床LV及AAV载体制造的应用

Polysciences转染试剂系列是基于PEI(Polyethylenimine)的产品,因其有效的瞬转效率和蛋白产量,已广泛应用于工业化生产和基础科研中的蛋白表达研究,年文献发表量已达上千篇。PEI是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳原子,即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原

载药系统Zeta电位测试

    寡核苷酸作为重要的特异性调控基因表达物质,已广泛的应用于药物开发治疗以及相关基因功能研究。但是,寡核苷酸易被核酸酶降解,具有较高的负电荷等缺点,使其直接作为治疗药物稳定性差,跨越细胞膜能力弱,治疗效果不好,为了解决以上问题我们采用聚乙烯亚胺800(PEI800)为原料,通过氮-酰化作用结合亚

采用纤维素纤维的层层组装处理对纸张的阻燃性和强度...

采用纤维素纤维的层层组装处理对纸张的阻燃性和强度进行调控摘要:采用层层组装(LbL)技术,将阳离子聚乙烯亚胺(PEI)和阴离子表面活性剂六偏磷酸钠(SHMP)组成的多层聚电解质吸附到纤维素纤维上,以提高由这些纤维制成的纸张的阻燃性和拉伸强度。利用模型纤维素表面和石英晶体微天平技术研究了PEI分子量对

蛋白质沉淀技术

在过去的 100 年里,虽然人们已经使用过多种不同的沉淀方法,但是 AS 沉淀一直都得到了最广泛的应用,尤其对于酸性蛋白质。此外,PEI 沉淀的应用也正日益普及。接下来,将会对这两种方法进行详细的讨论, 随后对其他几种沉淀方法做简单概述,并针对沉淀过程中沉淀的处理和纯化效率的最大化提出一般性建议。实

纳米载体的表面功能化修饰为推进基因神经调控扫除障碍

  日前,ACS Applied Materials & Interfaces 期刊在线发表了题为Effect of PEGylated Magnetic PLGA-PEI Nanoparticles on Primary Hippocampal Neurons: Reduced Nano-neur

超滤分离富集ICPMS法测定海水中6种痕量金属元素

  1 引 言   高分子聚合物螯合-超滤(Polymer complexation-ultrafiltration,PCP-UF)技术出现于20世纪80年代,其原理是水溶性高分子聚合物,如聚乙烯亚胺(Polyethy-leneimine,PEI),与水溶液中的Cu2+, Pb2+, Cd2+, C

蛋白质沉淀技术

蛋白质沉淀技术             实验步骤 一、AS 沉淀 1.原理 虽然有些其他盐类也可以用做沉淀剂,但是 AS

蛋白质沉淀技术(二)

(4) 小心倒出上清液,并测量其体积。依据表 20.1 所示的以百分饱和度从低到高的顺序加入 AS 以确定所需 AS 的质量。继续伴以快速的搅拌并缓慢加入 AS,以避免局部形成较高盐浓度,之后静置 30 min, 使其形成沉淀。(5) 如步骤 (3) 中所示进行离心。尽量去除上清液, 若之前已经仔细

关于转染效率的研究与进展

线型PEI(LinePEI,LPEI)与其衍生物用作基因转染载体的研究比分枝状PEI(BranchedPEI,BPEI)要早一些,过去的研究认为在不考虑具体条件,LPEI/DNA转染复合物的细胞毒性较低,有利于细胞定位,因此与BPEI相比应该转染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有利于形成

关于转染效率的研究

线型PEI(LinePEI,LPEI)与其衍生物用作基因转染载体的研究比分枝状PEI(BranchedPEI,BPEI)要早一些,过去的研究认为在不考虑具体条件,LPEI/DNA转染复合物的细胞毒性较低,有利于细胞定位,因此与BPEI相比应该转染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有利于形成

细胞转染的效率分析

线型PEI(LinePEI,LPEI)与其衍生物用作基因转染载体的研究比分枝状PEI(BranchedPEI,BPEI)要早一些,过去的研究认为在不考虑具体条件,LPEI/DNA转染复合物的细胞毒性较低,有利于细胞定位,因此与BPEI相比应该转染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有利于形成

简述细胞转染的效率

  线型PEI(LinePEI,LPEI)与其衍生物用作基因转染载体的研究比分枝状PEI(BranchedPEI,BPEI)要早一些,过去的研究认为在不考虑具体条件,LPEI/DNA转染复合物的细胞毒性较低,有利于细胞定位,因此与BPEI相比应该转染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有利于

目标人员标记识别研究获进展

  标记技术是指通过物理或化学方法标记人和物,从而实现特异性识别目标的方法。根据被标记物和标记目的不同,可分为防伪、财产标记、生物监控、嫌疑人标记、爆炸物标记识别、非法麻醉品跟踪等。荧光标记技术因具有自然光下不显色、发光稳定、颜色可调和可视化辨别等优点,已成为标记领域的研究热点。然而,该技术仍面临在

沉淀-σ32-和-RNA-聚合酶实验

试剂、试剂盒 聚乙烯亚胺 仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶 实验步骤 材料与设备 SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶(10%) 试剂 聚乙烯亚胺(PEI)(6% 储液,pH7.9) (配方,见“试剂的配制”,pp.184~18

沉淀-σ32-和-RNA-聚合酶实验

试剂、试剂盒 聚乙烯亚胺仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶实验步骤 材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶(10%)试剂聚乙烯亚胺(PEI)(6% 储液,pH7.9)(配方,见“试剂的配制”,pp.184~189)操作程序1)0.2%DOC 上清 (见 p.153)