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动物细胞培养——细胞培养介绍

实验方法原理目的细胞培养的评判性检查。应用检查常规维持的一致性;在复苏、传代、冻存前培养状况的评估;对新的或实验性情形反应的评估;确认明显的污染物。训练目标熟悉不同类型和不同密度的细胞培养的外观;数码或胶片相机的使用;灭菌物品和污染物间的区别,健康的和不健康的培养物间的区别;培养物生长阶段的评估。监督:在观察中保持连续性,摄影可以间断。时间:30 min背景信息形态学,摄影(见16.4.5节)。示范材料或操作:细胞形态,时相对比,固定和染色,免疫染色的照片样本;适于形态学研究的培养器皿的类型,如培养皿(图8.3)、盖玻片管、载玻片室(图16.3);悬浮培养物的离心涂片机(图16.4)。安全提示:没有特殊的安全要求。实验步骤观察一系列不同密度的细胞并摄影。设备和材料”培养瓶或培养皿中一系列不同密度的细胞,最好是同一正常或转化细胞(例如,3T3和SV3T3,或BHK21一C13和BHKZI一PyY)的不同密度情况,包括中期(大约5(......阅读全文

动物细胞大规模培养方法

   根据动物细胞的类型,可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。   一、动物细胞生长特性及培养温度   1.细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素   2.细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差   3.需氧少,不耐受强力通风与搅拌   4.群体生

动物细胞大规模培养方法

根据动物细胞的类型,可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1.细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素 2.细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差 3.需氧少,不耐受强力通风与搅拌 4.群体生长效应,贴壁生长(锚地依赖性) 5.培养过程产

单克隆抗体的制备(三)

3.2 免 疫 B 细胞的制备血清效价有意义(>1 : 1000)的免疫后动物可以提供抗原反应性B 细胞用于融合。这些细胞可以从脾脏或淋巴结中获得。动物用吸人CO2 处死,在无菌操作下取组织,放 在 4°C无血清培养基中,最多可放lh 。用慑子或针头轻轻打开组织脾脏或淋巴结的外包膜获得

肿瘤细胞培养

肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正

细胞培养的几个基本概念

细胞培养品 名:细胞培养拼音:xibaopeiyang英文名称:culture of cells说明:包括微生物细胞、植物细胞和动物细胞培养。将动植物组织或细胞从机体取出,分散成单个细胞或直接以单细胞生物,使其在含有必要生长条件的培养基或培养瓶中继续生长与增殖。细胞培养是细胞生物学研究方面十分重要的

大规模培养常用方法(贴壁培养、悬浮培养与固定化培...-2

大规模培养常用方法(贴壁培养、悬浮培养与固定化培养)-2CelliGen、 CelliGen PlusTM和Bioflo3000反应器是常用的贴壁培养式生物反应器,用于细胞贴壁培养时可用篮式搅拌系统和圆盘状载体。此载体是直径6毫米无纺聚酯纤维圆片,具很高表面积与体积比(1200cm2/g),利于

大规模培养常用方法(贴壁培养、悬浮培养与固定化培...-1

大规模培养常用方法(贴壁培养、悬浮培养与固定化培养)-1根据动物细胞的类型,可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1. 细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素 2.细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差 3.需氧少,不耐

微载体细胞培养技术及应用原理

  微载体细胞培养技术是细胞培养过程中常见的一种细胞培养技术。关于微载体细胞培养技术,以动物细胞为例,具体介绍如下:   一、微载体培养技术的应用   微载体培养技术于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展,该技术目前已渐日趋完善和成熟,并广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。

个别组织细胞的培养

体内组织细胞在体外培养时,所需培养环境基本相似,但由于物种、个体遗传背景及所处发育阶段等的不同,各自要求条件有一定差别,所采取的培养技术措施亦不尽相同,现介绍个别组织细胞培养的要点如下:一、上皮细胞培养上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别

3D细胞培养工具给细胞“回家”的感觉

  研究复杂的细胞和组织,及其信号传导与调控可不是件容易事。而模拟细胞或组织环境,建立最接近体内天然条件的实验系统同样困难。这就是3D细胞培养所面临的挑战,3D培养系统旨在更好的模拟细胞的体内生长环境,为其创造更天然的家。近来越来越多的证据表明,3D细胞培养系统比传统2

细胞共培养实验介绍(一)

1.基本原理体外细胞共培养(co-culture)是将两种细胞(可以来自同一种组织,也可以来自不同的组织)混合共同培养,从而使其中一种细胞的形态和功能稳定表达,并维持较长时间。该技术能模拟体内生成的微环境,便于更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用以及探讨药物的作用机制和可能作用的靶点,

原代细胞分离与培养,你都掌握了吗?

  对于大部分科研人员来说,研究中一般用到均是现成的细胞系/株,我们只需要:进行细胞传代和保种。然而,这些细胞系常常由于体外长期培养,而丢失原有生物学特性,对药物处理的反应差距越来越大。因此,原代细胞的地位日渐凸显,Paper中若有了原代细胞的数据都会添色不少。然而,就小编亲生经历,原代细胞分离着实

为什么细胞养不好?你可能忽略了这些细节

  上一期我们为大家详细介绍了实验中的肿瘤细胞的基本知识,不管是从ATCC购买,亦或朋友惠赠,当细胞不远万里到达咱们手里,最重要的事就是如何让它们茁壮成长。这看似简单,然而却因细胞长不起来或者污染等因素,折磨得不少英雄豪杰意欲“自挂东南枝”。今天小编就结合多年实践经验和ATCC的动物细胞培养指南,为

微载体细胞培养技术及应用原理(一)

微载体细胞培养技术是细胞培养过程中常见的一种细胞培养技术。关于微载体细胞培养技术,以动物细胞为例,具体介绍如下: 一、微载体培养技术的应用微载体培养技术于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展,该技术目前已渐日趋完善和成熟,并广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。微载体培养是目前公认的

发酵罐的分类和用于动物细胞培养的发酵罐介绍

发酵罐的分类:发酵工业上最常用的是通风搅拌罐。除了通风搅拌发酵罐外,其它型式的发酵罐如:气提式发酵罐,压力循环发酵罐,带超滤膜的发酵罐等。  典型发酵设备:种子制备设备、主发酵设备、辅助设备(无菌空气和培养基的制备)、发酵液预处理设备、粗产品的提取设备、产品精制与干燥设备、流出物回收,利用

一览细胞培养的前沿技术

  在最新一期《自然》(Nature)杂志上的一篇文章中,身为《Nature》以及《Nature Methods》的技术编辑费雯丽`马克思(Vivien Marx)想读者介绍了细胞培养的新进展,并概况了这一领域的前沿技术。以下为全文:  细胞培养基技术领域的进展,能帮助科学家们更深入的了解这些混合物

单克隆抗体的制备(二)

3 免疫策略不同实验室使用的免疫策略是不同的,很多免疫策略都同样有效。 目的是扩大宿主体内抗原反应性 B 细胞的数量。体内每次接触到蛋白质抗原,都会增加抗原反应性B 细胞的数量。在对抗原的再次应答中,产生的抗体量会增加,总的免疫球蛋白类别会从以IgM 为主转变为以IgG 为主,特异性抗体

生物反应器说明

接下来介绍生物反应器说明反应器靠搅拌桨提供液相搅拌的动力,它有较大的操作范围、良好的混合性和浓度均匀性,因此在生物反应中被广泛使用。但由于动物细胞没有细胞壁的保护,因此对剪切作用十分敏感,直接的机械搅拌很容易对其造成损害,传统的用于微生物的搅拌反应器用作动物细胞的培养显然是不合适的。所以,动物细胞培

组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养-3

5.其它方法:有人发现聚丙烯酰胺有抑制成纤维细胞生长的作用;也有人用聚蔗糖制备成比重1.025~1.085的密度梯度离心液,加入细胞悬液后,在 23℃中800g离心 10分种。在比重1.025~1.050层为成纤维细胞,在比重1.050~1.085层为上皮细胞,再经过分离进行培养。最近也有人

细胞培养实验室需要配备的仪器设备

细胞培养实验室除了配备一般实验室的普通常规设备外,还有一些特殊需要的设备,本文将详细介绍。细胞培养实验室.png一、常用的仪器设备(1)仪器a)显微镜:倒置显微镜——是细胞培养实验室所必需的日常工作常规使用设备之一,便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。b)培养箱:体外培养的细胞和体内细胞一样,需

动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测实验

动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测,可用于(1)动物细胞的培养(2)胚胎工程的发展(3)分子生物学的研究。溶液配制法实验方法原理动物细胞工程的主要操作对象是离体条件下动物有机体的各部分组织、器官或细胞,这些用来进行离体培养的组织或器官称为外植体;动物胚胎工程的主要操作对象是配子和胚胎。要满足

建立细胞系或细胞株

各种已被命名和经过细胞生物学鉴定的细胞系或细胞株,都是一些形态比较均一、生长增殖比较稳定的和生物性状清楚的细胞群。因此凡符合上述情况的细胞群也可给以相应的名称,即文献中常称之为已鉴定的细胞(Certified Cells)。已鉴定的细胞可用于各种实验研究和生产生物制品。当前世界上已建的各种细胞系(株

肿瘤研究,从认识肿瘤细胞开始

  最近一段时间我们一直围绕着肿瘤动物模型的构建,为大家介绍了肿瘤研究中各种实用动物模型的建立方法,相信大家应该收获颇多。动物水平的研究为我们提供了更接近临床的数据分析,与此同时,肿瘤细胞的实验研究也同样重要,它是肿瘤研究的初级阶段,可以更加快捷地提供在体外水平的研究结果。本期我们就开启肿瘤细胞学新

肿瘤细胞的培养(四)

四、提高肿瘤细胞培养存活率和生长率措施 根据人们的经验,肿瘤细胞在体外不易培养,建立能传代的肿瘤细胞系更为困难。当肿瘤组织或细胞初代接种培养后,常出现以下几种情况: 完全无细胞游出或移动; 有细胞移动和游出,但无细胞增殖,细胞长时间处于停滞状态以致难以传代; 有细胞增殖,传若干代后停止生长或衰退死亡

细胞实验技术及细胞培养基本知识-1

细胞培养技术细胞周期的测定一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。  单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。  测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞计数法

淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术

1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。  制备单克隆抗体包括动物免疫

动物细胞培养实验室必备仪器

细胞学在生命科学科中起着至关重要的作用,近年来细胞学蓬勃发展,并取得了重大的进展,细胞实验室的构建也是各个院校生物学科必备的实验室。细胞实验谨慎复杂,需要的实验设备种类繁多,下面就*些动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:*、CO2培养箱CO2培养箱是细胞培养 的必备仪器,它为细胞提供了*个体外培养的

WAVETM 生物反应器中的 Cytodex™ 微载体细胞培养工艺(一)

摘要     WAVE  Bioreactor 系统多用于悬浮细胞的培养。然而,用于细胞治疗和疫苗生产的多种细胞为贴壁依赖型的,需要一个可贴附的生长表面。在本研究中,Cytodex 微载体被应用在 CellbagTM 生物反应器中以扩增 Madine-

淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术

实验方法原理1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。 制备单

淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术

淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术             实验方法原理 1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨