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动物细胞培养——玻璃器皿的清洗和灭菌

实验方法原理目的清洗和灭苗污染的玻璃器皿。训练目标正确的准备工作和无菌区外的质呈控制。监督:推荐有经验的清沽工带实习生熟悉标准程序。时间:每次20~3omm较合适,所花的时间取决于实习生最后所参与岗位的程度和监督者的判断。背景信息洗刷区(见4.5.2节);清洗(见5.4.1节);玻璃器皿清洗机(见5.4.11节.图5.21);灭菌器(见5.4.4节;图5.18,5.19);清洗和灭菌设备(见11.3节)。示范材料和操作:实习生要观察所有的步骤并尽可能的参与;这可能需要多次观摩来观寮完整的程序。实习生应当参观所有运作中的设备,包括摆放,质最控制(QC)和安全程序,不一定要操作设备,除非以后的职责将包括清洗和灭菌实验步骤练习概要收集、漂洗、浸泡、清洗和灭菌玻璃器皿与吸管。设备和材料准备区的常规设备《见方案11.1~n.3)。标准方案l)玻瑞器皿的准备和灭菌(见方案11.1),2)吸管的准备和灭菌(见方案11.幻。3)螺口盖的准备和灭......阅读全文

细胞培养技术-1

一.细胞培养的基本原理  细胞培养是用酶消化法将组织碎块分离成单个细胞,用培养基制成细胞悬液,在体外适宜条件下,使细胞生长繁殖,并保留其一定的结构和功能特性。细胞培养与组织培养、器官培养主要不同点在于原始培养的对象不同。细胞培养使用的是单个细胞悬液,组织培养使用的是组织块(0.5~1立方毫米)或薄片

细胞培养实验室的设置及设备

(一)细胞培养实验室的设置     组织细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。目前,超净工作台的广泛使用,很大程度上方便了组织细胞培养工作,并使一些常规实验室有可能用于进行细胞培养。   &n

细胞实验室设计规范及设备介绍

(一)细胞培养实验室的设置 组织细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。目前超净工作台的广泛使用,很大程度上方便了组织细胞培养工作,并使一些常规实验室有可能用于进行细胞培养。 细胞培养实验室应能进行六方面的工作:无菌操作、孵

实验室离心机是细胞培养常用仪器设备

  细胞培养实验室组建的基本要求:   1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。   2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。   3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内

实验室离心机是细胞培养常用仪器设备

  细胞培养实验室组建的基本要求:   1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。   2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。   3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内

实验室离心机是细胞培养常用仪器设备

  细胞培养实验室组建的基本要求:   1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。   2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。   3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内

实验室离心机是细胞培养常用仪器设备

细胞培养实验室组建的基本要求:1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封

实验室细胞培养常用仪器设备

细胞培养实验室组建的基本要求:1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封

实验室离心机是细胞培养常用仪器设备

细胞培养实验室组建的基本要求:1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封

细胞培养实验室常用的基本仪器设备

1.显微镜:倒置显微镜——是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一,便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。2.培养箱:体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,大多数情况下,最适温度是37℃,温差变化一般不应超过±0.5℃,细胞在温度升高2℃ 时,持续数小时即不能耐受

长白猪精原细胞的分离和纯化

            实验方法原理 酶消化法制备2月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液,以 2 %~4 %牛血清白蛋白 (BSA)连续梯度作为分离介质,采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞。

长白猪精原细胞的分离和纯化

实验方法原理酶消化法制备2月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液,以 2 %~4 %牛血清白蛋白 (BSA)连续梯度作为分离介质,采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞。实验材料长白种系公猪              

长白猪精原细胞的分离和纯化

一、材料和方法1、实验动物长白种系公猪,2月龄,由北京养猪中心苇沟现代化猪场提供。取活体睾丸,立即放入1640营养液中,待分离细胞。2、主要试剂及材料胶原酶(CLS,Sigma),胰蛋白酶(Sigma),脱氧核糖核酸酶(DNase,Promega),牛血清白蛋白(BSA,中国医学科学院天津血液研究所

长白猪精原细胞的分离和纯化

实验方法原理酶消化法制备2月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液,以 2 %~4 %牛血清白蛋白 (BSA)连续梯度作为分离介质,采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞。实验材料长白种系公猪试剂、试剂盒胶原酶胰蛋白酶脱氧核糖核酸酶牛血清白蛋白胎牛血清RPMI 1640培养基HE染液PBS仪

常用细胞凋亡检测方法(图)-3

过氧化物酶标记测定法原理:脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP形成异多聚体,并可与连接了报告酶(过氧化物酶或碱性磷酸酶)的抗地高辛抗体结合。在适合底物存在下,过氧化物酶可产生很强的颜色

动物细胞培养

动物细胞培养 基本练习 2.2 无菌技术I:吸取与移液 练习2 细胞培养介绍 2.2 无菌技术I:吸取与移液 练习3无菌技术II:准备培养基 练习4:单层细胞的换液 练习5:玻璃器皿的清洗和灭菌 练习

知识分享:维真腺病毒系统产品手册

  产品说明书   本产品仅限用于研究,严禁用于疾病诊断。   本产品仅供购买方内部研究使用,未经Vigenebio公司书面许可,严禁转售。   产品有限责任担保   Vigenebio保证您收到的产品符合产品目录上的规格。本担保规定了Vigenebio更换产品的责任。Vigenebio不提

细胞培养技术-2

◇湿热消毒的注意事项①不可用安全阀摘子排气。②消毒的过程中若出现漏气现象,可调节消毒器盖内的胶垫的位置。③灭菌完毕,不要急于取出消毒品,可利用消毒器的余热去除物品部分湿气,待半小时左右再移入干燥箱烘干。2.干热消毒  这种消毒方法主要用于玻璃器皿消毒,一般温度在160℃维持90—120分钟就可以杀死

TRIzol法同时提取RNA、DNA、蛋白质

TRIzol试剂适用于从细胞和组织中快速分离RNA。TRIzol试剂有多组分分离作用,与其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、盐酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特点是可同时分离一个样品的RNA\DNA\蛋白质.TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA

TRIzol法同时提取RNA、DNA、蛋白质

TRIzol试剂适用于从细胞和组织中快速分离RNA。TRIzol试剂有多组分分离作用,与其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、盐酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特点是可同时分离一个样品的RNA\DNA\蛋白质.TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA

细胞培养的基本技术

一、清洗新采用和重新使用的培养器皿,都要严格清洗,以防各种有害物质对培养细胞损害。培养用的塑料器皿目前主要依靠进口,均已无菌密封包装,可直接使用。对于塑料瓶盖或胶塞等,可水中浸泡后用2%NaOH煮沸10~20min,自来水中浸泡和蒸馏水漂洗2~3次,晾干备用。细胞培养中的绝大部分器皿系玻璃制品,清洗

TRIzol法同时提取RNA、DNA、蛋白质(一)

TRIzol试剂适用于从细胞和组织中快速分离RNA。TRIzol试剂有多组分分离作用,与其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、盐酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特点是可同时分离一个样品的RNA\DNA\蛋白质.TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA

制备培养基的操作要点整理

制作培养基真真是微生物实验室的家常便饭,培养基配成后一般需测试并调节pH,还须进行灭菌,培养基由于富含营养物质,易被污染或变质,配制过程中有多个注意事项和操作要点需要我们掌握,接下来就和小析姐一起看看吧。 首先,什么是培养基? 培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营

组培实验室污染源的安全管理

本文对组培工厂及植物组织培养实验室中几种主要危险源进行了分析,诸如高温高压灭菌锅,紫外线、甲醛和高锰酸钾、新洁尔灭(苯扎溴铵溶液)等用于实验室消毒的常规消毒剂,次氯酸盐和氯化汞等用于外植体表面消毒的消毒剂,以及各种原因产生的火险等,并提出相关的注意事项和管理措施。 在组培工厂生产管理和植物

植物组织培养苗之污染与检测

一、在组织培养中污染来源1. 植物本身具有:(1)植物病原菌 有些作物的病害已被透彻研究,因此在大量繁殖时,可立即检查出来,但有些则否,造成若有污染时,不知来源为何。(2)和植物有关的菌类 有修植物本身便会和一些菌种共生,或是寄生于植物内部。 2. 植物所带入的污染:内在污染源许多植物表面

组织培养中污染及防止

一、污染的来源1、 植物本身具有:(1)植物病原菌  有些作物的病害已被透彻研究,因此在大量繁殖时,可立即检查出来,但有些则否,造成若有污染时,不知来源为何。(2)和植物有关的菌类 有修植物本身便会和一些菌种共生,或是寄生于植物内部。2、 植物所带入的污染:内在污染源 许多植物表面或大气中

TRIZOL提取注意事项

警告: 有毒物接触皮肤或者不慎吞服。会导致灼伤。一旦接触皮肤后立即以大量的洗涤剂和清水清洗。若感不适,看医生并寻求苯酚和其他成分(JTSRN 80100437-5000p)的正确治疗方案。)  TRIZOL在室温下能稳定保存12个月。尽管如此,为达到最佳效果,我们建议保存在2—8°C的环境