蛋白质免疫印迹技术

Western免疫印迹

 Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。一、原理    与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝

Western－免疫印迹

实验概要Western免疫印迹（Western   Blotting）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似，但Western   Blot采用的是聚丙烯

免疫印迹优点

　　免疫印迹法是一项分析抗原、抗体的技术。它具有下列优点：　　1、 湿的固定化基质膜柔韧, 易于操作；　　2 、固定化的生物大分子可均一的与各种免疫探针接近, 不会象凝胶那样受孔径阻隔；　　3、 免疫印迹分析只需少量试剂；　　4、 孵育、洗涤的时间明显减短；　　5、可同时制作多个拷贝, 用于多种分析

免疫印迹定义

　　免疫印迹（immunoblotting）又称蛋白质印迹（Western blotting），是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏

免疫印迹法

Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。一、原理与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被

免疫印迹与免疫检测

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 转移缓冲液仪器、耗材 摇床海绵纤维素膜尼龙膜电转仪实验步骤 1.  制备抗原样品，并用小型或标准尺寸的单向或双向凝胶分离蛋白，在一个或多个泳道中分离预染色或生物素酰化的蛋白质分子量标准。2.  电泳完成后，拆卸凝胶夹层，去除积层胶。以适量的转移缓冲液室温平衡凝胶30 m

免疫印迹法过程

免疫印迹法 是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。 1、SDS-PAGE试剂：见电泳实验。2、匀浆缓冲液：1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml；10%SDS 6.0ml；β-巯基乙醇 0

什么是免疫印迹？

　　免疫印迹（immunoblotting）又称蛋白质印迹（Western blotting），是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏

免疫印迹的优点

免疫印迹法是一项分析抗原、抗体的技术。它具有下列优点：1、 湿的固定化基质膜柔韧, 易于操作；2 、固定化的生物大分子可均一的与各种免疫探针接近, 不会象凝胶那样受孔径阻隔；3、 免疫印迹分析只需少量试剂；4、 孵育、洗涤的时间明显减短；5、可同时制作多个拷贝, 用于多种分析和鉴定；6、结果以图谱形

免疫酶染色试验_免疫印迹法

免疫印迹法 （以检测流行性出血热病毒结构蛋白和 NP 核蛋白为例说明）实验方法原理免疫印迹法 是将电泳与免疫酶染色结合起来的一种方法。它先经电泳 (SDS--PAGE)将病毒结构蛋白进行分离，通过转印将被分离的各区带原位转移到硝酸纤维素膜 (nitrocellulose membrane, NC 膜

Westernblotting－蛋白质印迹（免疫印迹）

什么是反向免疫印迹

中文名称反向免疫印迹英文名称reverse immunoblotting定　　义一种用于分析抗体反应克隆性质的技术。即用等电聚焦法分离待测样品中各组分，再以电泳法转印至硝酸纤维素薄膜或其他材料上，加入同位素标记的抗原共温育，反应后用酶标记抗体与之结合，从而判定与之起反应的克隆性质和数量。应用学科免疫

免疫印迹法的阶段

免疫印迹法分三个阶段进行.第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）：抗原等蛋白样品经SDS处理后带阴电荷，在聚丙烯酰胺凝胶中从阴极向阳极泳动，分子量越小，泳动速度就越快.此阶段分离效果肉眼不可见（只有在染色后才显出电泳区带）.第二阶段为电转移：将在凝胶中已经分离的条带转移至硝酸纤维素

Western免疫印迹的原理

　　与Southern或Northern杂交方法类似，但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物

免疫印迹的基本步骤

免疫印迹法（ 以抗原分析为例）基本上可分为抗原分离、抗原印迹和抗原检定三个步骤。在每一步中因采用的具体实验方法不同, 可构成多种免疫印迹分析系统。

免疫印迹实验相关原理

免疫印迹用于鉴定能够与特异性抗体相互作用的大分子抗原（一般为蛋白质）并测定抗原的大小。蛋白质首先通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，再通过电泳转移到固相支持物上，固相支持物包括硝酸纤维素膜，聚偏乙烯二氟（PVDF）膜和阳离子尼龙膜等。首先把膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附，这样固定的蛋

免疫印迹的基本步骤

免疫印迹法（ 以抗原分析为例）基本上可分为抗原分离、抗原印迹和抗原检定三个步骤。在每一步中因采用的具体实验方法不同, 可构成多种免疫印迹分析系统。

免疫印迹法试剂准备

　　1、SDS-PAGE试剂：见电泳实验。　　2、匀浆缓冲液：1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml；10%SDS 6.0ml；β-巯基乙醇 0.2ml；ddH2O 2.8ml。　　3、转膜缓冲液：甘氨酸2.9g；Tris 5.8g；SDS 0.37g；甲醇200ml；加ddH2O定容

免疫印迹（Wb)的原理

(1)是一种蛋白质测定的技术,集合凝胶电泳的高分辨率,固定免疫测定的敏感及特异性和不需要对靶蛋白进行放射性核素标记,在固相膜上保持的时间很长等优点。(2)可以在样本中检测到微量到微量的抗原,以及在多克隆抗体中检测到单克隆抗体,还可以对已经转移到固相膜上面的蛋白质进行连续的分析。

免疫印迹法检测原理

免疫印迹法是在蛋白质电泳分离和抗原抗体检测的基础上发展起来的一项检测蛋白质的技术，它将SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的高分辨力与抗原抗体反应的高特异性相结合。第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。抗原等蛋白样品经SDS处理后带负电荷，在聚丙烯酰胺凝胶中从阴极向阳极泳动，分子量越小，泳

什么是免疫印迹法？

　　免疫印迹法 (Western Blot) 是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法，如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。免疫印迹法 (immun

什么是免疫印迹法

　　免疫印迹法 (Western blotting) 是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法，如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。 免疫印迹法(i

免疫印迹技术(Immunoblotting－technique)

免疫印迹技术又称蛋白质印迹(Western blotting)是一种借助抗原鉴定特异性抗体的有效方法，该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。本实验以检测可提取性核抗原(ENA)抗体为例。【实验原理】先将ENA混合抗原经SDS-PAGE电泳，使各种抗原成分根据分子量不

免疫印迹技术和免疫斑点技术

免疫印迹技术又称Western印迹法，它将凝胶电泳与固相免疫结合，首先通过蛋白质电泳技术将需要区分的蛋白质转移至固相载体如NC膜等上，再借助酶免疫、放射免疫等技术进行测定。该法能分离分子大小不同的蛋白质并确定其分子质量，常用于检测多种病毒抗体或抗原。免疫印迹技术又称Western印迹法，它将凝胶电泳

蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）——Western印迹法

实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒裂解液PBSG 250考马斯亮蓝溶液NaClSDS上样缓冲液电泳缓冲液转移缓冲液丽春红染液封闭液TBSTTBS洗脱抗体缓冲液显影液定影液抗体化学发光试剂仪器、耗材高压锅玻璃匀浆器高速离心机分光光度仪-20℃低温冰箱垂直板电泳转移装置恒温水浴摇床多用脱色摇床实验步骤一、操

反向免疫印迹的方法介绍

中文名称反向免疫印迹英文名称reverse immunoblotting定　　义一种用于分析抗体反应克隆性质的技术。即用等电聚焦法分离待测样品中各组分，再以电泳法转印至硝酸纤维素薄膜或其他材料上，加入同位素标记的抗原共温育，反应后用酶标记抗体与之结合，从而判定与之起反应的克隆性质和数量。应用学科免疫

免疫印迹法试验操作步骤

一蛋白质样品获得:细菌诱导表达后,可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞,真核细胞加匀浆缓冲液,机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃,13,000r离心15min。取上清液作为样品。二电泳:制备电泳凝胶,进行SDS-PAGE。三转移:(半干式转移)1、电泳结束后将胶条割至合适大小,用转膜缓冲液平

蛋白质免疫印迹实验

蛋白质免疫印迹实验             实验步骤 操作流程 (1)制备与凝胶大小一致的硝酸纤维素膜一张，吸水滤纸 2 张

免疫印迹的技术优势

免疫印迹法是一项分析抗原、抗体的技术。它具有下列优点:1、 湿的固定化基质膜柔韧, 易于操作;2 、固定化的生物大分子可均一的与各种免疫探针接近, 不会象凝胶那样受孔径阻隔;3、 免疫印迹分析只需少量试剂;4、 孵育、洗涤的时间明显减短;5、可同时制作多个拷贝, 用于多种分析和鉴定;6、结果以图谱形

从免疫印迹到抗体纯化

一、材料和试剂 1.  PVDF或硝酸纤维素膜（Amersham，GEhealthcare）2.  透析袋（PierceCat#68035）3.  丽春红S（Sigma，Cat#P7170）4.  脱脂奶粉（Carnation，any your favorite brand in local st