Antpedia LOGO WIKI资讯

大蒜幼苗叶片mRNA的制备

实验概要本实验以大蒜为试材介绍了mRNA制备的制备方法。主要试剂Trizol试剂,酚仿混合液(1: 1),异丙醇,70%乙醇,RNase-free水,OBB缓冲液,Oligotex凝胶悬浮液,OEB溶液,OW2 buffer,3 M NaAc主要设备高速离心机,1.5 ml离心管,电泳仪,电泳槽,涡旋器,水浴锅实验材料大蒜(Allium Sativum L.)实验步骤1. 植物总RNA的提取; 1) 取100 mg植物材料,于液氮中研磨至粉状,加入1 ml Trizol试剂,上下颠倒数次; 2) 12000转/min离心5分钟,取上清; 3) 酚仿混合液(1: 1)抽提两遍,离心取上清; 4) 加入1体积的异丙淳,沉淀5分钟; 5) 12000转/mi......阅读全文

所有的看家基因(housekeeping genes)的列表+引物设计服务-3

NM_033142                Homo sapiens chorionic gonadotropin, beta pol

所有的看家基因(housekeeping genes)的列表+引物设计服务-2

NM_002128                Homo sapiens high-mobility group box 1 (HMGB1

所有的看家基因(housekeeping genes)的列表+引物设计服务

以下是所有的看家基因的列表,大家在设计引物时,可以直接采用这些基因的序列,本表来自于Trends in Gentics上一篇文献,内容全面,所有的看家基因均标注了基因银行号(Genbank),可以直接到pubmed中查询得出。引物设计可以推荐用primer 5,也可以直接与我们联系设计,有关事宜,请

价值数十亿美元的生物科技公司

   Moderna Therapeutics公司可谓野心勃勃,但是它也有相配套的巨额资金支持。这家羽翼未丰的新创公司是如何成为有史以来最有价值的私有药物公司之一的呢?  在两年半前的一次早餐会上,制药巨头Astra­Zeneca公司新上任的首席执行官Pascal Soriot签署了一份药物研发协议

PNAS:mRNA诊断早期卵巢癌成为可能

  科学家发现卵巢癌特异性mRNA亚基,使早期诊断成为可能  卵巢癌是一种致命的疾病,是出了名的难诊断治疗的癌症。加州大学圣地亚哥医学院以及Moores癌症中心科学家鉴定出了卵巢癌细胞的6个mRNA亚基(信使RNA),使早期卵巢癌的诊断成为可能。更重要的是,在这些mRNA亚基中,有些能编码针对新疗法

真核生物翻译的调控(1)

原核生物基因表达的调控主要在转录水平上进行,而真核生物由于RNA较为稳定,所以除了存在转录水平的调控以外,在翻译水平上也进行各种形式的调控。在蛋白质生物合成的起始反应中主要涉及到细胞中的四种装置,这就是:1.核糖体,它是蛋白质生物合成的场所;2.蛋白质合成的模板mRNA它是传递基因信息的媒介;3.可

RT-PCR实验方法大全

RT-PCR实验有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求:1.做RT前必需测RNA浓度,逆转录体系对RNA量还是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不会出太大问题。 3. PCR,按常规。但如需扩长片段,则对前两步要求较高,需要有完整的cDNA存在,不是单

全球新冠疫苗研发竞速 哪些疫苗已进入临床实验?

美国国立卫生研究院(NIH)于当地时间16日表示,针对新冠病毒的疫苗(“mRNA-1273”)当天在西雅图开始首次临床试验。首批接种疫苗的志愿者有45人,均为18至55岁的健康成年人,其中4人在16日接受注射。美国国立卫生研究院发布消息开始临床试验。/NIH网站“临床试验的启动速度之快,创下纪录。”

16周内研制出疫苗?新型冠状病毒克星驾到

  3天前,当不断上升的确诊数和死亡病例数占据了新闻的头条,很多人可能错过了这样一条消息:总部位于挪威的“流行病防范创新联盟”(CEPI)宣布开启三项合作项目,研发针对新型冠状病毒的疫苗,其中一种属于mRNA疫苗。作为一家在防治其他冠状病毒上有着大量经验的非营利组织,CEPI期望从拿到新型冠状病毒的

史蒂芬霍格将用mRNA治疗粉碎单抗产业

  全球步入了生命科学的黄金时代,不断涌现的单抗药物使得风险投资人得到了满意的回报,而现在这些冒险家开始把目标聚焦到药物发明中很少涉猎的领域:mRNA疗法的研究,以mRNA为基础治疗遗传基因病、癌症以及传染性疾病。  在这项技术上Moderna Therapeutics公司是全球的领跑者。  Mod

mRNA提取、分离纯化

从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之

点评Nature背靠背 |浙大教授解释基因敲除为何没有表型

  Robustness指一个复杂系统适应和应对内部和外界扰断而行使正常功能的能力。遗传系统健壮性(genetic robustness)指一个生命体能缓冲基因组中有害突变的能力。突变是生命进化的原动力,而有害突变是致死。一个稳定的遗传系统既能缓冲突变同时进行世代更迭,这样本体能维持正常功能,突变在

分子生物学常用实验技术(page 2)

一、RNA 制备   模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人

分子实验方法4:RNA的提取和cDNA合成

第一节 概 述  从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工

疫苗新突破:mRNA可供研发肿瘤和流感疫苗

  多年来,普遍接受的观念是不太稳定的、很难操作的mRNA不能有效地应用于医疗,然而,科研人员攻克这一难题后在体内表达药用蛋白看上去是可行的(至少在原则上),如今,mRNA分子成为研究对象的领域涉及到,新的医疗手段(如肿瘤疫苗)、预防性疫苗接种(针对感染性疾病)以及基因&蛋白疗法的替代治疗。

研究首次实现新型冠状病毒样颗粒的表达

  近日,复旦大学生命科学学院和附属中山医院林金钟团队联合上海交通大学徐颖洁团队和上海蓝鹊生物医药公司(蓝鹊生物)在新冠病毒mRNA疫苗研究方面取得重要突破。2月25日,相关论文以“针对新冠病毒疫苗的进展:用修饰信使RNA混合物表达病毒样颗粒”为题在中国科学院科技论文预发布平台ChinaXiv上线。

知识分享:mRNA的分离和纯化

  实验原理   从细胞或组织中得到RNA是一种混合物,其中包括tRNA,rRNA和mRNA,其中RNA为75%~ 85%,tRNA占10%~16%,而mRNA仅占1%~5%,并且mRNA基因序列不同,分子量大小不均一,各基因的表达丰度也不一样。每克细胞可分离出5-10mg RNA。   真核生

简述细胞蛋白水平与mRNA丰度间的依赖关系

  近20年来,高通量技术的发展支持了大规模的基因组、转录组和蛋白质组定量分析。这些数据被用来分析在不同系统和条件下转录组与蛋白质组的定量关系。这些研究有时候会导致一些冲突的结论,尤其是究竟在何种程度上mRNA的量控制了蛋白质的量。    基础生命科学研究和转化生命科学研究的一个核心问题是:基因组

基因的复制与表达

  生物的遗传物质基础是核酸(nucleic acid),它也是基因的基本结构,它们的化学组成分子结构符合遗传物质的稳定性、连续性及多样性的要求。  (一)核酸的化学组成  核酸结构的基本单位是核苷酸(nucleic acid),每个核苷酸由1个磷酸、1个五碳糖和1个碱基3部分组成。核

程红/田斌组揭示mRNA出核因子调控可变加尾的重要功能

  真核细胞中绝大多数前体mRNA(pre-mRNA)的3'端经过切割和多聚腺苷酸化两个步骤的加工后,可以产生具有多聚腺苷酸尾的成熟mRNA【1】。通常哺乳动物的基因含有不止一个多聚腺苷酸位点(PAS),细胞选择使用不同的PAS可产生具有不同长度3'非翻译区、甚至不同编码序列的异构体

正粘病毒培养和增殖

(1)培养〖HT5SS〗 甲型流感病毒虽能引起人和多种动物的疾病,但大多数毒株具有比较明显的宿主特异性。各型流感病毒都能在鸡胚内良好增殖。初代分离时最好应用羊膜腔接种法,但许多毒株也能适应于鸡胚尿囊腔,特别是已在羊膜腔内传代的毒株。丙型流感病毒只能在羊膜腔内增殖。多数流感病毒可在牛胚肾、

Nature:RNA 修饰研究有助表观转录组学进一步发展

  这是一个与 mRNA 结合的细菌核糖体的分子模式图,该核酸蛋白复合体正在合成蛋白质。  随着科研人员逐渐揭开 RNA 修饰的奥秘,帮助我们了解表观转录组学(epitranscriptomics)的工具也变得越来越多了。  2004 年,以色列特拉维夫大学(Tel Aviv University

RACE技术扩增构建全长cDNA文库

实验概要利用RACE(利用PCR技术快速扩增全长mRNA)技术构建全长cDNA文库是传统C库构建技术的改进。本实验即是利用寡核苷酸帽法,进行全长C库的构建,从而掌握RACE技术的原理与基本操作方法。实验原理其原理是利用真核mRNA的3’poly(A)和5’帽子结构作为标签,用通用引物识别并配对标签序

【段子手】两个凄美的生物学故事

  PCR的小女孩《卖火柴的小女孩》改编  实验室里冷极了,没有窗户,不知道是白天还是黑夜。这是一周的最后一天——周末。在这又冷又黑的晚上,一个蓬头散发的小女孩在试验台前坐着。她从家里出来的时候还穿着一件外套,但是有什么用呢?那是一件很大的外套──那么大,不知是哪一年买的。她工作的时候的,就穿上白大

基因差异表达技术

真核生物中,从个体的生长、发育、衰老、死亡,到组织的得化、调亡以及细胞对各种生物、理化因子的应答,本质上都涉及基因的选择性表达。高等生物大约有30000个不同的基因,但在生物体内任意8细胞中只有10%的基因的以表达,而这些基因的表达按特定的时间和空间顺序有序地进行着,这种表达的方式即为基因的差异表达

Science:隐藏的基因控制层影响着从癌症到记忆的一切

  基因上的化学标签可以在不改变DNA序列的情况下影响它们的表达,这一观点曾经令人惊讶,但是现在已经成为教科书上的内容。这种现象,即表观遗传学,现在已经出现在信使RNA (mRNA)上。信使RNA是一种分子,它将基因信息从DNA传递到细胞的蛋白质制造工厂。在上个月的一次会议上,研究人员讨论了RNA表

RNA的提取和cDNA合成原理和实验方法

第一节 概 述   从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了

新型RNA修饰m1A与m7G的物种保守性和动态调控条件

表观转录组学”是通过转录后修饰影响RNA的结构和功能,是近几年来生物学科里最热门的研究领域之一,目前已知的RNA修饰类型超过150种,其中包括m6A、m5C、m1A、m7G、2’-氧-甲基化、ac4C RNA乙酰化等。近期小编发现在探究RNA修饰领域中,各位m6A研究领域的鼻祖们又有了新的动作。

Science:重大发现!mRNA的混合尾巴阻止它过早地遭受降解

  细胞通过控制信使RNA(mRNA)降解在任何给定的时间里控制特定蛋白的数量。鉴于mRNA的核苷酸尾巴在这个过程中起作用,在一项新的研究中,来自韩国基础科学研究院(IBS)RNA研究中心的研究人员鉴定出由不同核苷酸组成的混合尾巴(mixed tail)如何保护mRNA在更长的时间内免受降解。这些发

杨运桂/杨莹开发新技术,首次获得m7G mRNA高分辨率图谱

  在RNA分子中鉴定出超过150种RNA修饰。转录组分析是解码这些化学修饰的潜在功能的关键步骤之一。N7-甲基鸟苷(m7G)是tRNA,rRNA和mRNA 5'cap中存在的最丰富的修饰之一,并且在调节RNA加工,代谢和功能中具有关键作用。除了其在mRNA中的帽位置外,还在内部mRNA区域