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细胞集落形成实验

实验十四 细胞集落形成实验非整倍体无限细胞系和癌细胞株中,仍然存在不同细胞亚群,它们的功能和生长特点有些差异,其中有些亚群细胞对培养环境有较大的适应性和具有较强的独立生存能力,细胞集落率高。纯化细胞群来自一个共同的祖细胞,细胞遗传性状、生物学特性相似,利于实验研究。原代培养细胞和二倍体有限细胞系,细胞集落率很低。细胞集落化培养之前,应先测定细胞集落形成率,以了解细胞在极低密度条件下的生长能力。目前认为仅有肿瘤干细胞具有形成集落的能力,集落抑制率常用于抗癌药物敏感试验、肿瘤放射生物学试验。集落抑制率=(1-(实验组集落形成率/对照组集落形成率))×100%(一)原理细胞集落形成率 单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞,大小在0.3-1.0mm 之间。集落形成率表示细胞独立生存能力。常用方法有平板集落形成试验、软琼脂集落形成试验。(二)实验用品1.材料:Hela细胞。2.器......阅读全文

造血干细胞的分化

  一、多能干细胞  多能干细胞是由Till和McCulloch等在60年代初,应用脾集落形成细胞定量法,首先在小鼠体内证明的。他们给经射线照射的小鼠输入同系鼠骨髓细胞,在10~14天后在脾内形成可见的结节,它是由单一骨髓细胞发育分化而成的细胞集落,称之为脾集落形成单位(colony

细胞集落形成实验

实验概要非整倍体无限细胞系和癌细胞株中,仍然存在不同细胞亚群,它们的功能和生长特点有些差异,其中有些亚群细胞对培养环境有较大的适应性和具有较强的独立生存能力,细胞集落率高。纯化细胞群来自一个共同的祖细胞,细胞遗传性状、生物学特性相似,利于实验研究。原代培养细胞和二倍体有限细胞系,细胞集落率很低。细胞

肿瘤细胞的软琼脂集落培养实验

在体外培养基中由一个祖先细胞增殖形成的细胞团,称之为集落。肿瘤细胞能无限繁殖,所以具有这种能力,而成熟分化的细胞则不能形成集落。实验方法基本方案 实验方法原理 HL-60细胞是一种急性早幼粒细胞白血病细胞,在体外无需加刺激因子,可在软琼脂培养基中形成集落。二甲基亚砜是一种细胞分化诱导剂,经二甲基亚砜

肿瘤细胞的软琼脂集落培养实验

肿瘤细胞的软琼脂集落培养实验             实验方法原理 在体外培养基中由一个祖先细胞增殖形成的细胞团,称之为集

肿瘤细胞的软琼脂集落培养实验

            实验方法原理 在体外培养基中由一个祖先细胞增殖形成的细胞团,称之为集落。肿瘤细胞能无限繁殖,所以具有这种能力,而成熟分化的细胞则不能形成集落。HL-60细胞是一种急性早幼粒细胞白血病

云序Mol Cancer成果教您如何写出外泌体的10分文章

  文章导读   2020年3月20日,云序客户上海交通大学附属第一人民医院田聆教授课题组在高分期刊Moleular Cancer杂志(影响因子10.679)发表了关于外泌体在胰腺癌肿瘤再生长中的研究。肿瘤再生长是放射治疗失败的主要原因。以往的研究表明,死亡的肿瘤细胞通过促进残留的肿瘤再生细胞(T

Mol Cancer成果教您如何写出外泌体的10分文章

  2020年3月20日,云序客户上海交通大学附属第一人民医院田聆教授课题组在高分期刊Moleular Cancer杂志(影响因子10.679)发表了关于外泌体在胰腺癌肿瘤再生长中的研究。肿瘤再生长是放射治疗失败的主要原因。以往的研究表明,死亡的肿瘤细胞通过促进残留的肿瘤再生细胞(TrCs)的增殖,

肿瘤细胞的软琼脂集落培养和测定

 一、原理    在体外培养基中由一个祖先细胞增殖形成的细胞团,称之为集落。肿瘤细胞能无限繁殖,所以具有这种能力,而成熟分化的细胞则不能形成集落。HL一60细胞是一种急性早幼粒细胞白血病细胞,在体外无需加刺激因子,可在软琼脂培养基中形成集落。二甲基亚砜是一种细

肿瘤细胞的软琼脂集落培养实验

肿瘤细胞的软琼脂集落培养实验可用于:(1)细胞分化的基础研究;(2)临床肿瘤治疗的疗效检验等方面。实验方法原理在体外培养基中由一个祖先细胞增殖形成的细胞团,称之为集落。肿瘤细胞能无限繁殖,所以具有这种能力,而成熟分化的细胞则不能形成集落。HL-60细胞是一种急性早幼粒细胞白血病细胞,在体外无需加刺激

细胞集落形成

细胞集落形成             实验方法原理 细胞集落形成实验是检测培养细胞增殖能力的有效方法之一。由于它是通过检验

细胞集落形成

            实验方法原理 细胞集落形成实验是检测培养细胞增殖能力的有效方法之一。由于它是通过检验活细胞的增殖能力,因此避免了在生长曲线绘制时将死细胞或不能再分裂细胞计数在内而导致的实验结果误差。

软琼脂克隆形成实验

            实验方法原理 软琼脂克隆形成实验主要用于非贴壁生长的细胞,某些细胞(如正常成纤维细胞)在悬浮状态下不能增殖,不适用此法。某些恶性肿瘤细胞,不仅在贴壁状态下能增殖,在悬浮状态下也能增殖

软琼脂克隆形成实验

            实验方法原理 软琼脂克隆形成实验主要用于非贴壁生长的细胞,某些细胞(如正常成纤维细胞)在悬浮状态下不能增殖,不适用此法。某些恶性肿瘤细胞,不仅在贴壁状态下能增殖,在悬浮状态下也能增殖

软琼脂克隆形成实验

软琼脂克隆形成实验可用于:(1)细胞分化的基础研究;(2)临床肿瘤治疗的疗效检验等方面。实验方法原理软琼脂克隆形成实验主要用于非贴壁生长的细胞,某些细胞(如正常成纤维细胞)在悬浮状态下不能增殖,不适用此法。某些恶性肿瘤细胞,不仅在贴壁状态下能增殖,在悬浮状态下也能增殖,其在软琼脂中形成克隆的能力反映

细胞集落形成

实验方法原理细胞集落形成实验是检测培养细胞增殖能力的有效方法之一。由于它是通过检验活细胞的增殖能力,因此避免了在生长曲线绘制时将死细胞或不能再分裂细胞计数在内而导致的实验结果误差。    细胞集落形成实验的原理是单个细胞在体外持续增殖6代以上,其后代形成一个细胞群体,称

原代细胞的培养与建系-3

下面为美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)入库细胞的基本要求:   (1)培养简历 组织来源日期、物种、组织来源、性别、年龄、供体正常或异常健康状态,细胞已传代数等。   (2)冻存液 培养基和保护剂名称。 &

抗肿瘤药物研究及新药筛选

  提 纲   一、化疗药物的发展   二、肿瘤的药物治疗   三、抗肿瘤药物筛选及评价   四、体外抗肿瘤活性试验   五、体内抗肿瘤活性试验   一、化疗药物的发展   • 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。   • 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等,

抗肿瘤药物研究及新药筛选

  提 纲   一、化疗药物的发展   二、肿瘤的药物治疗   三、抗肿瘤药物筛选及评价   四、体外抗肿瘤活性试验   五、体内抗肿瘤活性试验   一、化疗药物的发展   • 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。   • 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等,

体外哺乳类细胞基因突变(HGPRT)试验原理及注意事项-3

结果评价:阳性结果的判定:受试物组在任何一个剂量条件下的突变频率为阴性(溶媒)对照组的3倍或3倍以上,可判定为阳性。受试物组的突变频率增加,与阴性(溶媒)对照组比较具有统计学意义,并有剂量-反应趋势,则可判定为阳性。受试物组在任何一个剂量条件下引起具有统计学意义的增加并有可重复性,则可判定为阳性。阴

细胞增殖生长方面实验_接种存活率和克隆形成率法

实验方法原理细胞被制成分散的悬液后,以低密度(2~5 个细胞/cm2)被接种到底物上,贴壁并能存活生长形成细胞小群(克隆)的细胞百分数值称接种存活率,用以表示细胞群的活力。由于检测接种存活率时是借观察克隆(通常为16~50 个细胞)形成情况,又因每个克隆都来自一个细胞,因此也称克隆形成率。细胞接种存

体外哺乳类细胞(V79/HGPRT)基因突变试验

- 中华仓鼠肺细胞染色体突变实验药物毒理体外经典实验。国家都有标准了就可以想象重要性了。自己做了一个PDF文件,方便大家收藏。中华人民共和国国家标准GB 15193.12一91体外哺乳类细胞(V79/HGPRT)基因突变试验V79/HGPRT gene mutation test----------

CD34阳性细胞计数-1

外周血现已被广泛地被用作骨髓移植、癌症患者接受大剂量化疗或放疗后骨髓重建造所需血干细胞(Hemotopoietic Progenitor Cells HPC)的来源。外周血源性干细胞现主要被运用自体移植,其应用面也逐步拓展至异基因骨髓移植中。使用外周血替代骨髓作为造血干细胞的来源有着以下优点:1,易

云序Mol Cancer成果教您如何写出外泌体的10分文章(二)

(2)垂死的肿瘤细胞释放的外泌体增强了ALDH1A1+ TRC的存活作者认为肿瘤再生细胞(TRC)可能是外泌体的主要受体。由于目前没有办法鉴定TRC,因此作者收集了放射后存活的胰腺癌细胞,并通过高通量测序分析了癌症干细胞相关基因的表达谱。发现与未辐射的对照组相比,有62个基因表达被上调, 

m6A修饰的YTHDF1与介导EIF3C对卵巢癌进展的影响

  m6A是真核生物中最常见的一类RNA修饰,能够在多种生物过程中发挥重要作用,例如癌症发生发展、细胞分化、压力应答、免疫反应以及神经发育等。2019年m6A修饰曾创下单月发表100+篇10分影响因子的辉煌。2020年1月何川教授团队再次带领m6A登上顶级期刊Science,预示着m6A等RNA修饰

m6A修饰的YTHDF1与介导EIF3C对卵巢癌进展的影响

  m6A是真核生物中最常见的一类RNA修饰,能够在多种生物过程中发挥重要作用,例如癌症发生发展、细胞分化、压力应答、免疫反应以及神经发育等。2019年m6A修饰曾创下单月发表100+篇10分影响因子的辉煌。2020年1月何川教授团队再次带领m6A登上顶级期刊Science,预示着m6A等RNA修饰

稀释法克隆培养

            实验方法原理 低密度接种细胞,培养至集落形成,细胞染色(用于克隆形成率和存活检测 ) 或用于筛选时分离细胞、然后扩增为细胞株。

稀释法克隆培养

实验方法原理低密度接种细胞,培养至集落形成,细胞染色(用于克隆形成率和存活检测 ) 或用于筛选时分离细胞、然后扩增为细胞株。实验材料CHO细胞                       &

实体瘤细胞的诱导分化

用实体瘤研究诱导分化比白血病少,实体瘤细胞种类多,其特性不一,诱导分化判定标准各不相同,分化指标一般包括形态和功能的变化,增殖能力下降,致瘤性消失。具体实例有以下几种。 (一)人黏液表皮样癌MEC-1细胞分化诱导实验: MEC-1细胞是一种低分化黏液表皮样癌细胞系,为上皮样细胞,体外增殖迅速

从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞...

从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞实验实验方法原理 实验材料 人关节软骨试剂、试剂盒 胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶(0.05%)和EDTA(0.53 mmol L)PBSA配制胎牛血清牛血清白蛋白(BSA)10μg ml和1 mg ml PBSC配制血清纤连蛋白 10μg m1 PBS

从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞

从人关节软骨中分离软骨祖细胞 从人滑膜中分离软骨祖细胞、培养、分化 人软骨祖细胞的分化             实验方法原理