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1. 收到细胞株包裹时， 请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形， 若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养， 或立即冷冻保存(置于–70 °C， 隔夜后， 移到liq N2)。细胞复苏的原则－快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。具体操作一. 实验前准备：1.将水浴锅预热至37℃2.用75％酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。二．取出冻存管：1.根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。2.从液氮罐中取出细胞盒，取出所需的细胞，同时核对管外的编号。三．迅速解冻：1.迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化。2.约1-2min后冻存管内液体完全溶解，取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁，再拿入超净台内。四.平衡离心：用架盘天......阅读全文
培养细胞就像养育BABY一样，要精心照料，用心呵护。最好每天都去看看它们，满足它们所需要的物质需求，防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外，还要注意很多小细节，以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。 那培养细胞都要注意哪些小细节呢？就让我们一起来看看吧！ 1.细胞生长的
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法是一种在单细胞悬液中检测分泌某种特定蛋白质的细胞和定量分析产生该特定蛋白质的细胞频率的有力工具。1983年，Crekinsky等运用ELISPOT技术成功检出分泌特异性抗体的细胞频率，经过不断发展，目前该技术已广泛用于检测产生、分泌多种其他效应分子的细胞(如细胞因
抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用( ADCC )是抗体作用的一种机制， 病毒感染的细胞或其他病变细胞通过该机制被识别进而被细胞介导的免疫系统组分杀伤。Promega公司推出的ADCC Reporter Bioassay (ADCC 报告基因生物活性检测试剂盒 ) 应用生物发光法，通过测量
转染是否成功的影响因素很多，如需要转染的细胞类型（对于困难的细胞系尤其如此），需要被转染的分子（DNA、RNA、寡核苷酸、蛋白质），转染试剂等。但无论在何种情况下，转染的成功均取决于转染效率、低细胞毒性以及重现性这几个要素。细胞：分裂细胞相比较非分裂细胞——分裂细胞往往要比静止细胞更易于摄取并表达外
实验概要细胞的活化与复苏实验步骤1 收到细胞株包裹时， 请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形， 若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养， 或立即冷冻保存(置于–70 °C， 隔夜后， 移到 liq N2)。 2 冷冻细胞解冻程序:
3 免疫策略不同实验室使用的免疫策略是不同的，很多免疫策略都同样有效。 目的是扩大宿主体内抗原反应性 B 细胞的数量。体内每次接触到蛋白质抗原，都会增加抗原反应性B 细胞的数量。在对抗原的再次应答中，产生的抗体量会增加，总的免疫球蛋白类别会从以IgM 为主转变为以IgG 为主，特异性抗体
在本章节我们解释了转染体系的关键组分对细胞转染 实验的效率有何影响，并且合理的给予您一些关于如何使它们更有利于您研究方面的提示。 【组织培养试剂】 一般提示：优化您的细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂，并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各
实验方法原理IL-2主要由活化T细胞产生，又为T细胞增殖所必需，故称T细胞生长因子（ TCell Growth factor, TCGF ）。IL-2产生的水平反映T细胞的功能，仅是免疫调节重要的研究对象，而且与临床多种疾病密切相关，CTLL是C57BL/6来源的。鼠杀伤性T淋巴细胞细胞系，由Gil
实验概要学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。实验原理外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂
实验常见问题解答汇集(一) BSP甲基化扩增得到的PCR产物可否直接测序，为什么需要构建TA克隆后测序？ 由于基因组DNA的每个CG位点甲基化程度各不相同，未发生甲基化的C会被重亚硫酸盐修饰成为U，而C若发生甲基化则不变，这样如果进行PCR产物测序就有可能在原有的C位点得到双峰图，
1.悬浮细胞 ●计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200～400g离心5分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。 ●以1×107到5×107细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以0.5×107到1×107在无血清培养基中，再次悬浮细胞。 ●
BSP甲基化扩增得到的PCR产物可否直接测序，为什么需要构建TA克隆后测序？由于基因组DNA的每个CG位点甲基化程度各不相同，未发生甲基化的C会被重亚硫酸盐修饰成为U，而C若发生甲基化则不变，这样如果进行PCR产物测序就有可能在原有的C位点得到双峰图，无法确定甲基化的程度，必需通过回收PCR产物，进
很多小伙伴在养细胞的时候，总是会出现这样或那样的问题，很多时候，那是因为你没有注意以下的细节问题，现在我们一起来看看：细胞培养前的准备在您带上手套开始细胞培养之前, 先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足, 以免在开始实验后再次出入操作台，这样可以降低细胞污染的风险。细胞培养基也应先预热, 选择只预热
为规范和指导按照药品研发及注册的细胞治疗产品的研究与评价工作，国家食品药品监督管理总局组织制定了《细胞治疗产品研究与评价技术指导原则（试行）》（见附件），现予发布。特此通告。食品药品监管总局2017年12月18日细胞治疗产品研究与评价技术指导原则（试行）一、前言近年来，随着干细胞治疗、免疫细胞治疗和
ELISPOT 技术简介 随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 , 使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ ELISA ）检测体液中游离的细胞因子（ CK ）或抗体，但由于游离的循环抗体或 CK 的半哀期不同，使之在体液中
ELISPOT 技术简介 随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 , 使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ ELISA ）检测体液中游离的细胞因子（ CK ）或抗体，但由于游离的循环抗体或 CK 的半哀期不同，使之在体液中
2月17日，The Lancet发表了解放军总医院第五医学中心(302医院)王福生院士团队的病例报告。该团队在1月27日对一例新冠肺炎死亡患者进行了病理解剖。这是全世界有文献记录的首例对新冠肺炎死亡患者的病理解剖。 根据其报道的结果，其肺部表现为弥漫性肺泡损伤和肺透明膜形成，符合ARDS表现
2、冻干菌株复苏补充说明1）志贺氏菌、阪崎肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、奇异变形杆菌、普通变形杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、粘质沙雷伯氏菌、弗氏柠檬酸杆菌、铜绿假单胞菌、芽孢杆菌类、大肠埃希氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、藤黄微球菌：复苏水化液为脑心浸液培养基，复苏培养
（2） ELISPOT 技术的现在 1996年以来随着抗体制备、PVDF膜材篁等技术改良，ELISPOT 分析技术已经逐渐达到科研人员的期待，它已是当世公认最灵敏抗原特定T细胞的体外检测技术。藉由检验新鲜分离PBMC细胞所分泌cytokine的指纹，ELIS
实验步骤 基本方案 1 诱导小鼠急性弓形虫 T. gondii感染材 料T. gondii弓形虫 M E 4 9 株 慢 性 感 染（1 个月以上）的 雌 性 小 鼠（C 57B L /6、 C B A /Ca 或 Swiss-Webster) (见辅助方案 2)。7 0 % (v/V )
1 CAR-T细胞疗法的生物学毒性 CAR-T细胞疗法毒性反应的主要潜在机制包括：CAR-T细胞攻击共表达肿瘤抗原的正常组织或器官，例如抗CD19的CAR-T细胞攻击损伤正常B细胞，甚至可导致B细胞耗竭。[10-11]在某些不可预知的情况下，即使未表达CAR-T细胞的靶抗原，若正常组织所带细
提 纲 一、化疗药物的发展 二、肿瘤的药物治疗 三、抗肿瘤药物筛选及评价 四、体外抗肿瘤活性试验 五、体内抗肿瘤活性试验 一、化疗药物的发展 • 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。 • 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等，
提 纲 一、化疗药物的发展 二、肿瘤的药物治疗 三、抗肿瘤药物筛选及评价 四、体外抗肿瘤活性试验 五、体内抗肿瘤活性试验 一、化疗药物的发展 • 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。 • 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等，
麻醉治疗学是近年来新提出的一项概念，是指通过运用麻醉药物、方法技术和理念来治疗慢性难治性疾病的一门新兴学科。急慢性疼痛曾是麻醉治疗主要的病种之一，通过药物，神经阻滞、射频或损毁等技术手段对急慢性疼痛患者进行诊治，能够安全、舒适地改善患者的症状和生活质量。但随着临床麻醉治疗技术的开展，越来越多的麻
1.癌症 2000年后肿瘤信号网络被逐渐阐释、完善，大量的分子靶向药物进入临床研究、走上市场，近年针对受体酪氨酸激酶靶点如Bcr-Abl(见1.1)、VEGF/VEGFRs(见1.2)、PDGF/PDGFRs(见1.3)、EGFR/HER2(见1.5)、ALk(见1.7)已有多个药物上市，me
实验步骤基 本 方 案 1 多克隆抗磷酸肽抗体的制备材料B S A -琼 脂 糖 亲 和 基 质（Sigma) 填 装（如辅助方案 2 ) 于柱床体积IOml的层析柱磷酸化酪氨酸亲和基质层析柱（IOml 柱床体积；见辅助方案3)磷酸肽-B S A 偶联物免疫家兔的粗制血清PB S /叠氮钠.•含有0
张新超 北京医院急诊科 在临床实践中，没有哪个器官系统病症像心血管疾病在救治时效性方面的意义更为突出。急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）后1 h内得到再灌注治疗，死亡率为1%，6 h内得到治疗，死亡率约为10%～12%
近年来由于抗生素的广泛应用，细菌的耐药问题越来越严重。历史和现实的教训告诉我们：任何一种抗生素一旦问世，很快就会产生耐药株，产生耐药株的时间周期短则几年，长则十几年（表1）。目前，细菌的耐药问题已成为全球的严重问题，为此WHO专门发表了针对细菌耐药问题的专家建议(WHO／CDS／CSR／DRS／20
标准菌株您一定不陌生 今天 我们一起来学习一下它的基本知识吧一、标准菌株的概念及其应用 1.1标准菌株概念 GB/T 27405-2008 实验室质量控制规范食品微生物检测： ①标准培养物：标准菌株、标准储备菌株和工作菌株的统称。 ②标准菌株：至少
空气动力学直径：0.01-100?m；包括：纤维、固态粉尘、液滴、花粉等；又称“总悬浮尘”（TotalSuspendingParticles），评价室外大气环境等级的指标之一。气体运动方式：气体以分子（气体分子<0.001?m）状态存在，它们做无规则的自由扩散运动-布朗运动。哪些灰尘粒径小于1