肾小管细胞氧化性损伤模型

材料:DMEM培养基(Gibco BRL Co生产), 无糖DMEM培养基(Gibco BRL Co生产),NRKSIE 鼠。肾小管细胞株(购于华西医科大学内科实验室),乳 酸钠(国产分析纯试剂)。 方法 肾小管细胞培养 NRKSIE鼠肾小管细胞 用0.25% 胰蛋白酶消化,将小管细胞分离成单个细胞悬液,用含100 mL/L 胎牛血清的DMEM培养基,于37℃5%(体积分数)CO2 孵箱中培养。每 24 h更换培养液一次,培养2~3 d,待细胞生长成片备用。实验 将细胞转种于96孑L板,细胞密度 为lO ·mL ,孵育24 h。培养液中加入 H 20 2,浓度为5mmol/L ,作用 30 min。讨论:肾小管氧化性损伤在肾脏的缺血一再灌注损伤和中 毒性损伤中起着重要作用。为了从细胞水平阐明活 性氧自由基对。肾小管细胞的作用,本实验用5 mmol/L H2 0 2建立了肾小管氧化性损伤模型。H2 0 2虽 不是自由基,......阅读全文

肾小管细胞氧化性损伤模型

材料:DMEM培养基(Gibco BRL Co生产), 无糖DMEM培养基(Gibco BRL Co生产),NRKSIE 鼠。肾小管细胞株(购于华西医科大学内科实验室),乳 酸钠(国产分析纯试剂)。 方法 肾小管细胞培养 NRKSIE鼠肾小管细胞 用0.25% 胰蛋白酶消化,将小管细胞分离成单个细胞

内皮细胞损伤模型

一、细胞因子损伤模型将内皮细胞铺板后待即将单层融合时,换无血清或低血清培养基,加入细胞因子如IL-2,TNF-alpha、IFN等,共同孵育一段时间,或者加入药物与之共孵育,或者加细胞因子之前先加入药物孵育后,再加细胞因子,结束后测一些指标如MTT、LDH、NO、等等看药物对细胞因子损伤的保护作用。

常见体外肝细胞损伤模型

1.四氯化碳体外损伤肝细胞模型原代培养的正常大鼠肝细胞培养24h(贴壁良好)后,置培养皿于一密闭的塑料盒,内置四氯化碳0.4M容积,37度90min,造成肝细胞损伤的模型,后转入正常培养,进行下一步实验。(即熏蒸法)肝细胞培养12h后,吸弃上清,更换培养液并加入CCL4 8mM(事先用DMSO溶解,

Aβ损伤模型

取出生1-2d的乳鼠,用麻醉剂处死。在D-hanks液中取大脑并分离海马组织,胰蛋白酶消化,获得细胞悬液,胎盘蓝染色进行死活细胞记数,将细胞以5×105/ml的密度接种于预先经L-多聚赖氨酸处理的96孔和24孔培养板,其中24孔板中预先放置有盖玻片。细胞维持在培养液中,置入5%CO2,饱和湿度的培养

骨骼肌细胞损伤模型的建立

1  材料 地塞米松磷酸钠注射液(江苏第三制药厂,批号000706) ;RPMI - 1640 培养基(GIBCO ,USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、链霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco ,Lot :12885655) ; 四甲基氮

骨骼肌细胞损伤模型的建立

1  材料 地塞米松磷酸钠注射液(江苏第三制药厂,批号000706) ;RPMI - 1640 培养基(GIBCO ,USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、链霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco ,Lot :12885655) ; 四甲基氮

视神经损伤模型实验

实验方法原理 作为中枢神经的重要组成部分,视神经及其胞体已成为中枢神经损伤修复的重要研究对象。中枢神经损伤修复研究中的许多重大发现,最初都是以视神经损伤为模型开展的。其中最为著名的,是苏国辉和Aguayo采用周围神经移植诱发视网膜神经节细胞(以下简称节细胞)再生的开拓性研究。视神经由众多神经纤维组成

体内肝损伤模型(酒精)

一、材料 纯系SD雄性大鼠,体重180g~200 g,由浙江大学医学院实验动物中心提供。食用酒精选用北京酿酒总厂出品的56度红星二锅头。二、方法 将大鼠随机分成5组,饲养在23℃~25℃室内,自由进食、进水;根据大鼠体重,A、B、C、D组每日用56°红星二锅头白酒以10ml/1Kg分别灌胃 0、4周

视神经损伤模型实验

视神经横断模型及荧光金逆行标记 坐骨神经移植及荧光金逆行性标记 荧光金逆行性标记(上丘及外侧膝状体)             实验方法原理 作为中枢神经的重要组成

脊髓星形胶质细胞机械性损伤的体外培养模型

1.材料与方法取新生的wistar 大鼠脊髓,剪碎,0125 %胰蛋白酶消化1h ,用含血清的DMEM培养液终止胰蛋白酶的作用; 而后吹打成散在的单个细胞,进行细胞计数,按5 ×105 个Pcm2 密度进行接种。培养至第10天时加10mM Leu2methy12ester 除杀小胶质细胞。于16d

臭氧损伤衰老动物模型

实验材料2-3月灵小鼠20月龄大鼠试剂、试剂盒水混合饲料垫料仪器、耗材木制臭氧发生柜鼠笼饮水壶衰老的自由基学说认为:衰老与自由基引起的生物膜脂质过氧化导致膜结构损伤和功能失活有密切关系。生理情况下,自由基不断产生,也不断被机体内防御自由基的酶系统消除,从而维持生理性低水平、有利无害、稳定平衡的自由基

肝损伤动物模型介绍

这真是一个可怕的事实:同为黄种人,生长在中国的肝病发病率却是生活在欧美的3倍!中国无疑成为了“肝病大国”,约12个人就有1人患肝病。面对如此严峻的现状,对肝相关疾病机制研究和药物开发就变得极为迫切。肝脏是人体重要的器官,执行合成代谢、解毒和免疫防御等许多功能。外界环境各类因素常导致肝损伤,长期的肝损

培养乳鼠心肌细胞的缺氧损伤模型和缺氧预处理(APC)模型

原代心肌细胞培养及APC模型的制作参照先前报道的方法[2]。即取出生后1-2 d乳鼠心尖部组织, 胰酶消化, 离心后用含20%小牛血清的DMEM培养基制成细胞悬液, 过滤, 按差速贴壁分离法纯化心肌细胞, 以1×105 cells/cm2接种于24孔板, 每24 h更换培养液。贴壁生长2 d, 于实

研究揭示肾小管损伤的线粒体稳态失衡新分子机制

急性肾损伤(Acute kidney injury,AKI)是一种急性肾功能紊乱,以血浆肌酐和尿素氮明显增加,同时尿输出量明显降低为特点。AKI已成为世界范围内的公共卫生问题,荟萃分析表明全球成人住院患者急性肾损伤的发生率颇高,面对严峻的AKI流行病学现状,尚没有可明显改善AKI,或增强肾脏修复功能

研究揭示肾小管损伤的线粒体稳态失衡新分子机制

  急性肾损伤(Acute kidney injury,AKI)是一种急性肾功能紊乱,以血浆肌酐和尿素氮明显增加,同时尿输出量明显降低为特点。AKI已成为世界范围内的公共卫生问题,荟萃分析表明全球成人住院患者急性肾损伤的发生率颇高,面对严峻的AKI流行病学现状,尚没有可明显改善AKI,或增强肾脏修复

UVB致皮肤角质形成细胞的损伤模型的制作方法

材料和方法1 试剂:胎牛血清(北京军医兽医防治中心) ,DMEM培养液(GIBCO ,美国) ,碘化丙啶PI(Sigma) ,Triton2X100 (BDH) ,Hoechst33342(Sigma) ,RNase (Sigma) 。2 细胞及实验分组:人角质形成细胞株Colol6 (由北京师范大

脊髓机械性损伤模型的制作实验——大鼠脊髓NYU模型

实验方法原理脊髓挫伤是临床最常见的脊髓损伤类型(交通事故、高空坠物、运动损伤等造成),NYU模型是应用最广泛的鼠类脊髓挫伤模型,该模型可以很好地模拟临床,适用于病理和脊髓再生等多方面研究。双侧椎板(T8)去除术后,使用脊髓撞击仪(NYU大鼠脊髓撞击仪I型),以不同重量的下落重物撞击脊髓,造脊髓撞击伤

新模型研究血管损伤影响脊髓损伤后的结局恢复

  显微注射技术   中枢神经系统不具有像周围神经系统一样的可塑性,并且外伤是一种不可逆损伤。除了最初的机械性损伤,还将伴随长期持久的级联性损伤,即继发性损伤,继发性损伤发生后会引起进一步的轴突损伤和神经元死亡。继发性损伤机制包括出血、组织缺血、血脊髓屏障破裂、炎症、谷氨酸盐毒性,以及脱髓鞘,细胞

脊髓机械性损伤模型的制作实验

实验前的准备及暴露脊髓 大鼠脊髓NYU模型 大鼠脊髓挤压伤模型 大鼠脊髓半横断模型 大鼠脊髓全横切模型             实验方法原理

脊髓机械性损伤模型的制作实验

实验方法原理 对于各种大鼠或小鼠脊髓损伤模型而言,前提都是要去除相应节段椎板,清晰暴露需要损伤的脊髓节段,因此本节所有大、小鼠损伤模型中都是以打开飞节段椎板为前提进行的进一步损伤。实验材料 实验动物试剂、试剂盒 1%戊巴比妥钠碘伏仪器、耗材 手术刀眼科摄(2个)眼科剪乳突撑开器小型咬骨钳针持线剪缝针

脊髓机械性损伤模型的制作实验——大鼠脊髓挤压伤模型

实验方法原理脊髓夹伤模型可模拟临床上脊柱移位所致脊髓持续受压损伤,同样是应用较多的模型。该类模型可获得相对稳定的脊髓损伤,适用于病理和脊髓再生等多方面研究,尤其是脊髓受损程度(挤压强度和/或持续时间)与所导致的神经病理损伤后果的关系。现有脊髓夹伤模型种类较多,分别应不同造模目的而设计。其中应用较多的

脊髓机械性损伤模型的制作实验——大鼠脊髓半横断模型

实验方法原理半横断及全横断损伤在临床上较为少见,但其为干细胞移植、神经纤维再生及功能修复等方面的研究提供了良好的研究模型,使之也成为较为常用的模型。实验原理主要采用手术刀或刀片切断脊髓,使损伤部位的脊髓失去解剖连续性及生理上的联系而制作成的脊髓损伤模型。实验材料实验动物试剂、试剂盒1%戊巴比妥钠碘伏

脊髓机械性损伤模型的制作实验——大鼠脊髓全横切模型

实验方法原理行椎板去除术后,用11-0线从腹侧穿过,然后用刀片切断脊髓。实验材料实验动物试剂、试剂盒碘伏仪器、耗材11-0丝线实验步骤①脊髓暴露后,用立体定向仪将大鼠固定;②用显微外科摄将硬脊膜轻轻提起,用眼科剪将硬膜剪开;③再提起硬脊膜然后用三角针将11-0线从硬膜的腹侧面穿过;④用刀片横切大鼠脊

Neat1促进肾小管上皮细胞凋亡促慢性肾脏疾病急性肾损伤

  慢性肾脏病(CKD)是肾功能下降到一定阈值以下后的进展性和不可逆转的疾病,目前还没有决定性的治疗方法。进行性肾小管间质纤维化是CKD导致终末期肾病(ESRD)的共同特征。急性肾损伤(AKI)是一种以肾功能迅速下降为特征的临床症状,长期以来一直被认为是完全可逆的。  然而,最近的研究表明,在AKI

视神经损伤模型实验——视神经横断模型及荧光金逆行标记

实验方法原理作为中枢神经的重要组成部分,视神经及其胞体已成为中枢神经损伤修复的重要研究对象。中枢神经损伤修复研究中的许多重大发现,最初都是以视神经损伤为模型开展的。其中最为著名的,是苏国辉和Aguayo采用周围神经移植诱发视网膜神经节细胞(以下简称节细胞)再生的开拓性研究。视神经由众多神经纤维组成,

125IUdR致C6胶质瘤细胞损伤的模型

一、材料:125I-UdR购自中科院北京原子能所,放化纯度>95%。脱氧腺苷(AdR)、脱氧鸟苷(GdR)、脱氧胞苷(CdR)、脱氧尿苷(UdR)均为Sigma公司产品。 二、方法 1、细胞培养:当癌细胞贴壁生长超过瓶壁的70%,用胰蛋白酶消化30-40s,传代培养。肿瘤细胞每3-4d传代1次。

体外肝细胞损伤模型建立(CCl4和H2O2)

1 大鼠肝细胞的分离和培养 大鼠4%戊巴比妥麻醉,门静脉插管,先以无钙灌流液灌流,继以37℃通入O2的Ⅳ型胶原酶灌流液继续循环灌流15 min。将肝脏移至一平皿内,轻轻撕去肝包膜后,加入含5%小牛血清的清洗液,用吸管吹打成单个肝细胞悬液,200目尼龙网过滤,低速离心(500 r·min-1,1 mi

人类外伤性脑损伤的果蝇模型

  一项研究说,科研人员建立了一种果蝇模型用于研究外伤性脑损伤(TBI)的直接和长期后果。找到外伤性脑损伤(TBI)的有效疗法具有挑战性,这部分是由于治疗结果因为损伤的位置和严重程度以及遗传和环境因素而有很大不同。为了解决这个问题,David Wassarman及其同事开发了一种外伤性脑损伤(T

肾小管细胞受损后炎症的原因

  是对药物治疗的过敏毒性与大多数病例有关的仅是少数药物(在80多种相关药物中)药物相关性病因的识别很重要因为严重的肾脏损害经常可预防或逆转结节病军团菌病钩端螺旋体病链球菌病毒感染和某些中草药亦可能有关。常见抗生素类药物(如氨基糖苷类、青霉素类、头孢菌素类、两性霉素、四环素族、磺胺类、阿霉素、抗结核

肾小管细胞受损后炎症的检查

  肾活检是明确诊断的唯一方法指征。包括诊断不能肯定或肾衰进展肾小球通常是正常的最早期表现是间质水肿典型的随后出现间质淋巴细胞浆细胞嗜酸性细胞和少量嗜中性白细胞浸润严重病例中可见炎性细胞侵入衬在小管基底膜的细胞间空隙(小管炎)在其他标本中可能见到继发于甲氧苯青霉素磺胺类药分枝杆菌和真菌的肉芽肿反应非