蛋白纯化时候,柱子进气的解决方法
有一次本人用HiPrep™ 26/60 Sephacryl S-200 HR以2ML/MIN的速度做GF纯化.结果一时开小差,柱子严重进气.严重到什么程度呢,60厘米的柱子上方20CM都空了,下面40CM则全都是气泡.本人发现后,立刻停泵,并经专家建议后采取以下措施:1:将原来与柱子底部相连的增压器拆下,连到顶部.2:翻转进液方向,由底部向顶部以最大速度输液,我记得好象是用了该柱子的最大流速.结果,柱子恢复如常,其后的纯化曲线也未发现可测飘移.讨论:步骤一的目的是增加柱头压,使空气在液体中的溶解度上升.步骤二则使入侵的气体原路返回,减少气体对柱子的进一步损害.建议,大家如果遇到类似情况一定不要慌,先把机器停下来再说.1万多的柱子应该还是没那么脆弱的.......阅读全文
蛋白纯化时候,柱子进气的解决方法
有一次本人用HiPrep™ 26/60 Sephacryl S-200 HR以2ML/MIN的速度做GF纯化.结果一时开小差,柱子严重进气.严重到什么程度呢,60厘米的柱子上方20CM都空了,下面40CM则全都是气泡.本人发现后,立刻停泵,并经专家建议后采取以下措施:1:将原来与柱子底部相连的增压器
蛋白质纯化所用的柱子有几种，分别有什么作用
一、沉淀法1、 盐析实验原理：中和蛋白质表面电荷并破坏水化膜。蛋白质易溶于水，因为其分子的-COOH -NH2和-OH都是亲水基团，这些基团与极性水分子相互作用形成水化层，包围于蛋白质分子周围形成1~100 nm大小的亲水胶体，从而削弱了蛋白质分子之间的作用力。当大量盐加到蛋白质溶液中，高浓度的盐离
气相色谱进样浓度过大，对柱子造成污染怎么办
这个也可能是进样过载了，需要把进样系统、隔垫等都清洗，柱子也要充分的老化下。 分析测试百科网，分析行业的百度知道，祝你实验顺利，科研有成。。除了这些方法之外，楼主还可以暂时把这个柱子放在别的仪器上分析一下其他的样品（在不干扰其他物质测定的情况下），过一段时间估计就把污染物带干净了。
气相色谱进样浓度过大，对柱子造成污染怎么办
这个也可能是进样过载了，需要把进样系统、隔垫等都清洗，柱子也要充分的老化下。 分析测试百科网，分析行业的百度知道，祝你实验顺利，科研有成。。除了这些方法之外，楼主还可以暂时把这个柱子放在别的仪器上分析一下其他的样品（在不干扰其他物质测定的情况下），过一段时间估计就把污染物带干净了。
c18柱子堵了解决方法
1、先把柱子卸下来看看柱压，如果压力升高是柱子引起的处理柱子，如果柱子卸下来柱压还是挺高那么就不是你的柱子的柱压高，而是别的地方有堵塞。柱子柱压高时可以先用含水比例较大的系统冲一下，要是系统中有盐析出而导致的柱压升高时这样应该可以使柱压适当的降低；冲完后若柱压还是没有降低可用适当比例的异丙醇冲洗
气相色谱如何老化柱子
毛细管柱吗？高温加热。在通着氮气的情况下，开高柱温加热，让色谱柱里面的杂质物质出来。一般刚刚买回来的色谱柱会有一个最高耐受温度，大约低个20℃-50℃左右就可以了。比如这个温度是260℃，用230℃左右的柱温条件烧至少2小时以上。一般是3-5小时，然后就可以使用了。
气相色谱如何老化柱子
毛细管柱吗？高温加热。在通着氮气的情况下，开高柱温加热，让色谱柱里面的杂质物质出来。一般刚刚买回来的色谱柱会有一个最高耐受温度，大约低个20℃-50℃左右就可以了。比如这个温度是260℃，用230℃左右的柱温条件烧至少2小时以上。一般是3-5小时，然后就可以使用了。
气相色谱新柱子活化
新的色谱柱活化：采用100%甲醇1ml/min冲洗60min，再换成流动相进行平衡；如果流动相中含有缓冲盐，在换成流动相前，请使用过渡流动相过渡后再换流动相平衡。 日常维护 1、建议检测前样品和流动相进行过滤； 2、建议每天做完样品后及时进行清洗； 3、常规检测 测试完后，直接把色谱柱
气相色谱峰值变小的原因
峰高偏小？还是峰面积偏小？明显偏小究竟偏小多少？RSD为多少？？一、检查自己的进样量是否一样？进样量不一样峰面积和峰高偏差很正常。二、检查仪器状态是否一样，载气流速，气化室温度，起始温度，升温速率，终点温度，检测器灵敏度等各个参数设置是否相同？特别是检测器的灵敏度对峰面积峰高影响很大。 由于你只说了
气相色谱峰值变小的原因
峰高偏小？还是峰面积偏小？明显偏小究竟偏小多少？RSD为多少？？一、检查自己的进样量是否一样？进样量不一样峰面积和峰高偏差很正常。二、检查仪器状态是否一样，载气流速，气化室温度，起始温度，升温速率，终点温度，检测器灵敏度等各个参数设置是否相同？特别是检测器的灵敏度对峰面积峰高影响很大。 由于你只说了
气相色谱峰值变小的原因
峰高偏小？还是峰面积偏小？明显偏小究竟偏小多少？RSD为多少？？一、检查自己的进样量是否一样？进样量不一样峰面积和峰高偏差很正常。二、检查仪器状态是否一样，载气流速，气化室温度，起始温度，升温速率，终点温度，检测器灵敏度等各个参数设置是否相同？特别是检测器的灵敏度对峰面积峰高影响很大。 由于你只说了
气相色谱柱之柱子的老化
确保载气流过毛细管柱15~30min；缓慢程序升温（5℃/min）到老化温度；最初老化温度≥4hours；如果柱子受到污染。可在推荐的最高色谱柱温度低20℃的条件下，老化柱子； 一般推荐的老化温度为： Tcond = Tmax/2+Tapp/2； 这里：Tcond=老化温度； Tmax=
气相色谱仪柱子的保养
气相色谱仪广泛应用于多个实验领域，我们应该怎么样维护才能有效延长气相色谱仪的使用寿命呢？其中对气相色谱仪的柱子的维护十分重要，下面我们就来介绍下维护要点。1.使用保护柱﹐能够延长气相色谱仪的使用寿命。简单的说﹐气相色谱仪保护柱即是很短的色谱柱﹐填装和所使用液相色谱柱相同的填料。正确使用装在液相色谱柱
气相色谱仪进样后不出峰的原因及解决方法
气相色谱仪进样后不出峰的原因以及解决方法如下： 1.进样针堵塞，样品没有注入汽化室。取下进样针，手动吸取样品并推出，观察能否正常吸入排出。若堵塞可选择溶剂超声清洗，若超声清洗仍不能吸取，则需要更换进样针。 2.样口或色谱柱受污染造成样品严重吸附。可以选择溶剂冲洗汽化室，超声清洗分流平板，分流
蛋白纯化的原理
蛋白质分离纯化常用方法有： 1、沉淀， 2、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析： a.离子交换层析，利用蛋白质的两性游离蛋白质的分离纯化在生物
蛋白纯化的原理
蛋白质分离纯化常用方法有： 1、沉淀， 2、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析： a.离子交换层析，利用蛋白质的两性游离蛋白质的分离纯化在生物
蛋白纯化的原理
蛋白质分离纯化常用方法有： 1、沉淀， 2、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析： a.离子交换层析，利用蛋白质的两性游离蛋白质的分离纯化在生物
蛋白纯化的原则
蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异，利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染，而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异，利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。 蛋白的纯化大致分为粗
纯化蛋白的原理
原理是：与水互溶的有机溶剂（如甲醇、乙醇）能使一些蛋白质在水中的溶解度显著降低；而且在一定温度、pH值和离子强度下，引起蛋白质沉淀的有机溶剂的浓度不同，因此，控制有机溶剂的浓度可以分离纯化蛋白质。例如，在冰浴中磁力搅拌下，在4℃预冷的培养液中缓慢加入乙醇(-25℃),可以使冰核蛋白析出，从而纯化冰核
蛋白纯化的原理
蛋白质分离纯化常用方法有： 1、沉淀， 2、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析： a.离子交换层析，利用蛋白质的两性游离蛋白质的分离纯化在生物
蛋白纯化的原理
蛋白质分离纯化常用方法有： 1、沉淀， 2、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析： a.离子交换层析，利用蛋白质的两性游离蛋白质的分离纯化在生物
病毒纯化和蛋白纯化区别
病毒纯化和蛋白质纯化都是生物制剂工程中常见的分离纯化方法，但它们的对象不同，具体区别如下：1. 病毒纯化与蛋白质纯化对象不同。病毒纯化的目标是将病毒从其它生物物质中进行分离和去除，以获得单个且纯净的病毒颗粒，如用于疫苗生产的病毒载体，而蛋白质纯化的目标是从生物体或来源中提取和纯化单一或多种蛋白质，如
蛋白纯化策略
（六）兴风作浪的乳糖(lactose) 晚上每天都有人做报告，我觉得让我收获最大的是Bill Studier的报告。本来这个报告是后来才听到的，但是由于Burgess的模块是唯一的涉及大肠杆菌钟表达蛋白的，我把这一段提前来说说。Studier这老哥是Brookhaven National Labo
蛋白纯化服务
蛋白纯化服务内容1、纯化抗血清、免疫腹水、细胞上清得到抗体IgG或IgM纯化方法免疫亲和层析纯化法Protein A/G亲和层析法辛酸-硫酸铵沉淀法饱和硫酸铵沉淀法等2、纯化重组蛋白粗品3、纯化客户天然蛋白粗品纯化方法离子交换疏水分子排阻色谱法4、可用客户提供的抗体制备免疫亲和层析柱，使用免疫亲和层
氨基柱在进酸性样品时伤柱子如何恢复？
氨基柱在进酸性样品时，很伤柱子，如使用一段时间后，柱效降低，峰形改变，如何恢复？用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0％NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨)，之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1％。
蛋白纯化仪使用常见的一些问题解决办法
蛋白纯化怎么提纯，蛋白是大分子，和各种分子大小不同的白蛋白，有使用一些更简单的方法，以在蛋白质和小分子材料，并且还分离的蛋白质混合物中分离出来。分离不同分子大小的蛋白质主要是透析，超滤，凝胶过滤，离心分离等的方法。透析和超滤通常用于蛋白质分离方法。待分离的透析混合物放置在由半透膜的透析袋，然后浸入在
气相色谱仪5种常见问题的维修及日常保养方法
气相色谱仪是一款能够快速分离、分析混合物的仪器设备，在石油化工等领域受到了广泛的应用，可根据用途分为工业、备制、分析三种类型。虽然气相色谱仪的型号多种多样，用途不同且性能也会有所差异，但是它们常出现的故障问题与维修保养方法基本一致。 一、柱压高 可能原因：(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等
气相检测环已烷用哪种柱子
增加柱长可提高分离效果。但柱长过长，使分析时间延长。所以在满足一定分离度的条件下，应选用尽可能短的色谱柱。填充柱的柱内径一般为 36 mm，毛细管柱的内径0.10.5 mm。固定液的用量选择：担体的表面积较大时，固定液用量可多些，允许的进样量也相应增加。但从速率方程式的传质项中可知，为了减小液相
肌肉肌球蛋白和肌动蛋白的纯化实验——肌球蛋白的纯化
实验材料冷冻肌肉试剂、试剂盒肌球蛋白抽提溶液仪器、耗材玻璃器皿实验步骤1. 准备下面的贮存液（都冷却到 4℃）。肌球蛋白抽提溶液：0.5 mol/L KCl，0.1 mol/L K2HPO4几升冷的用玻璃器皿蒸馏过的水（dH2O）4 mol/L KCl0.5 mol/L KCI0.5 mol/L C
气相色谱仪载气的纯化
气相色谱仪不同的检测器，各种类型色谱柱和不同分析条件，对载气以及辅助气体纯度要求不同，净化的方法亦有差异。 例如：使用ECD尤其是使用脉冲式ECD作农药残留分析时必须采用99.99%的高纯氮气。一定要把载气中电负性较强的氧和水的含量控制在10ppm以下。FID检测器不论载气（N2），还是燃气（