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常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。 一：柱子可以分为：加压，常压，减压1.压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。 2.减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。 3.加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩......阅读全文
过柱子，即柱层析或柱色谱的俗称，是有机化学中最常用也是最基础的一种分离手段。有机化学实验者最常做的三件事莫过于加反应、点板(TLC)和过柱子了，过完柱子拿到了纯的产品这个实验才算是告一段落了，当然之后一般还需要做一些其他的数据表征。作为一个几乎天天跟柱子打交道的有机化学实验者，有过把产物过没了的
由于部分新手刚接触过柱，需要系统地了解过柱的方法技巧，我把一个从事多年化学工作，有丰富实验经验的先生的过柱经验转载过来，希望对大家有用。（看了请及时回帖，谢谢~~） 常说的过柱应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过
实验概要本实验介绍了用蛋白纯化试剂盒(HisTrap HP Kit)进行蛋白质纯化的过程。主要试剂高分子量蛋白Marker购自上海华舜生物工程有限公司蛋白纯化所用的试剂盒(HisTrap HP Kit)购自Amersham Biosciences ( USA)公司0.45 pm滤膜，磷酸缓冲液，咪唑
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法，这些方法在使用的过程中往往会遇到诸如鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题，如何解决这些问题呢? 1.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，
1 实验过程探讨 1.1 主要仪器与试剂 使用北京瑞利分析仪器公司出产的WFX一1C型原子吸收分光光度计； 使用北京利飞光学仪器有限责任公司出产的KY―I型金空心阴极灯； 使用核工业部北京第五研究所出产的124～250m（60～120目）4
3.结果分析:实验测得的藻蓝蛋白纯度只有0.509，比较我们班其他组的结果相差不算太大，但其他班有的组测得藻蓝蛋白得纯度可达到 1.7左右，相对于这个纯度，我们所提取得藻蓝蛋白纯度时偏低的，影响藻蓝蛋白纯度的原因主要有以下几个：1)冻融次数:本实验时采用冻融法破碎细胞，冻融法破碎细胞主要是因为藻体在
实验原理葡聚糖凝胶（Sephadex）过滤法测定蛋白质分子量的原理，主要是依据这种凝胶具有分子筛作用，一定型号的凝胶具有大体上一定大小的孔径。在一定的凝胶柱内，凝胶孔隙所占的体积称为内水容积Vi，凝胶颗粒间的自由空间所占的体积称为外水容积V0。当样品流经凝胶柱时，大于孔隙的大分子完全不滲入到凝胶内部
在气相色谱分析中，我们总希望在较短的时间内，用较短的柱子达到满意的分析结果，为此，在进行分析时，需要选择适当的操作条件。此时应考虑如下两个问题。 第一柱子对各组分的选择性要好，即能将复杂样品中的各组分分离开。从色谱图上看，各组分色谱峰之间的距离要大，而选择性的好坏与固定相的性质、柱温等因素有关。
色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相，以及色谱柱的制备和操作条件。 1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论，那什么样的柱子可以反冲，什么不可以。反冲后是正者用，还是反着用。具体到各型号
实验方法原理 实验材料 用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒 PBS／叠氮化物MgCl2仪器、耗材 分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的
实验材料用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒PBS／叠氮化物MgCl2仪器、耗材分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的柱子实验步骤1. 将
孔雀石綠（MG）是一种合成的工业染料[1]。由于其还具有有效杀灭真菌、寄生虫等病原微生物的作用，在水产养殖中曾被用来预防和治疗受精卵和成鱼的水霉病、鳃霉病和小瓜虫病等，以及用于活鱼运输、暂养和环境的消毒等[2]。然而，孔雀石绿在生物体内有大量蓄积时，表现出高毒、代谢周期长、“三致”等毒副作用，还对生
1. 柱压高 压力单位换算：1bar＝0.987大气压＝14.503psi＝0.1MPa＝1.0197kg/cm2 （1）新柱（未进过样品或只进过柱效测试标样）压力高： 以原厂报告上完全一样的条件下测试比较，若压力在报告压力值上下浮动200-300psi以内，可视为正常范围；若高于出厂报告
1.液相色谱柱柱压高 压力单位换算：1bar＝0.987大气压＝14.503psi＝0.1MPa＝1.0197kg/cm2 （1）新柱（未进过样品或只进过柱效测试标样）压力高： 以原厂报告上完全一样的条件下测试比较，若压力在报告压力
1. 柱压高 压力单位换算：1bar＝0.987大气压＝14.503psi＝0.1MPa＝1.0197kg/cm2（1）新柱（未进过样品或只进过柱效测试标样）压力高：以原厂报告上完全一样的条件下测试比较，若压力在报告压力
1.液相色谱柱柱压高 压力单位换算：1bar＝0.987大气压＝14.503psi＝0.1MPa＝1.0197kg/cm2 （1）新柱（未进过样品或只进过柱效测试标样）压力高： 以原厂报告上完全一样的条件下测试比较，若压力在报告压力
柱床体积Vt可以通过加入一定量的水至层析柱预定标记处，然后测量水的体积来测定。外水体积Vo可以通过测定完全排阻的大分子物质的洗脱体积来测定，一般常用蓝色葡聚糖-2000作为测定外水体积的物质。因为它的分子量大（为200万），在各种型号的凝胶中都被排阻，并且它呈蓝色，易于观察和检测。&n
实验步骤基 本 方 案 1 多克隆抗磷酸肽抗体的制备材料B S A -琼 脂 糖 亲 和 基 质（Sigma) 填 装（如辅助方案 2 ) 于柱床体积IOml的层析柱磷酸化酪氨酸亲和基质层析柱（IOml 柱床体积；见辅助方案3)磷酸肽-B S A 偶联物免疫家兔的粗制血清PB S /叠氮钠.•含有0
一、问：这段时间一直在做生物碱，流动相选择的是乙睛：0.02mol/l磷酸二氢钾（26：74），现在实验做完了，最后冲柱子。先长时间乙睛：水冲柱，再用甲醇：水冲柱，最后用甲醇冲柱。柱压一直很高，请问各位，是否不该这样冲柱？该怎样解决？ Jimmy_ok：乙睛和甲醇没有多大区别的，只是乙睛黏
1.层析柱的选择层析柱大小主要是根据样品量的多少以及对分辨率的要求来进行选择。一般来讲，主要是层析柱的长度对分辨率影响较大，长的层析柱分辨率要比短的高；但层析柱长度不能过长，否则会引起柱子不均一、流速过慢等实验上的一些困难。一般柱长度不超过100cm，为得到高分辨率，可以将柱子串联使用。层析柱的直径
2．加样蛋白浓度低于20 mg/mL，上样体积小于柱体积的1/3。3. 在整个实验过程中，流速必须得到一定的控制。过大，会使填料压缩紧密，导致流速过低，层析柱有可能堵塞而实验失败，流速过小，实验时间过长，引起酶的活性变化。对于CM Sepharose FF填料，最适流速在100cm/h以下。
相色谱是实验室的要设备之一，应用范围广，是实验分析工作者的好帮手，但是，在使用过程中也会遇到各种各样的问题，快速的解决这些问题可以更有效的服务于我们的检测工作。一、何谓气相色谱?它分几类?凡是以气相作为流动相的色谱技术，通称为气相色谱。一般可按以下几方面分类：1、按固定相聚集态分类：(1)气固色谱：
一、样品信息样品组分结构式柠檬黄新红 苋菜红靛蓝胭脂红 日落黄诱惑红 亮蓝 二．实验目的 参照《食品中合成着色
液相色谱柱的色谱柱在使用一段时间后，会出现一定的常见故障，如果不能很好的判断并解决就会影响色谱柱的使用效果，从而影响样品的分析结果。当我们遇到这种情况要怎么办呢。 液相色谱柱常见的几种故障判断及排除方法： 1、当色谱柱压高于正常值，有三种情况： （1）柱端过滤器堵塞。排除方法：拆下过滤器用硝
固相萃取技术作为一种样品前处理方式，有机溶剂消耗量少，可批量处理样品，既可富集，又能除杂质。但目前该技术在国内市场的应用仍有限，这与使用方式和期望有关，也与技术本身的局限性有关。固相萃取可以作为前处理手段的一个很好补充，但是在使用时，一定要了解其优点和缺点，扬长避短。 固相萃取（Solid
1 色谱柱柱压问题 色谱柱柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在345kPa 以内或在50PSI之间(在使用梯度洗脱时，柱压平稳缓慢的变化是允许的)。压
本文提供了液相色谱-串联质谱法(LC-MS)检测饲料原料中维生素A、维生素D3、维生素E的方法，该检测方法可以实现维生素A、维生素D3、维生素E的联检，且LC-MS方法灵敏度较高，比现行高效液相色谱法高1000倍以上。LC-MS方法可应用于饲料原料、粮食、农产品、食品等维生素A、维生素D3、维生
【液相色谱仪系统】液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。 常见问题及解决方法 一、柱压问题 柱压问题是使用液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好
液相色谱作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确方式操作的话，就容易导致一些棘手的小问题。其中常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。 【液相色谱仪系统】液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也
液相色谱作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确方式操作的话，就容易导致一些棘手的小问题。其中常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。 【液相色谱仪系统】液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也