DNA荧光染色的样品制备实验

试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤 DNA是细胞内含量比较恒定的参量,随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料(如PI)可选择性地定量嵌入核酸(DNA/RNA)的双螺旋碱基之间,与细胞特异性结合,DNA含量与荧光染料的结合量成正比,因此通过测定荧光强度可获知细胞的增殖情况。1. 将固定过的细胞离心(500~1000rpm,5min)弃上清液,再用PBS洗涤2次。2. 用PBS调整细胞浓度,每份为1×106个细胞/100μl。3. 加入1000μl DNA......阅读全文

DNA荧光染色的样品制备

试剂、试剂盒 PBS仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪实验步骤 DNA是细胞内含量比较恒定的参量,随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料(如PI)可选择性地定量嵌入核酸(DNA/RNA)的双螺旋碱基之间,与细胞特异性结合,DNA含量与荧光染料的结合量成正比,因此通过测定荧光强度可获知细胞的

DNA荧光染色的样品制备实验

试剂、试剂盒PBS仪器、耗材DNA荧光染料流式细胞仪实验步骤DNA是细胞内含量比较恒定的参量,随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料(如PI)可选择性地定量嵌入核酸(DNA/RNA)的双螺旋碱基之间,与细胞特异性结合,DNA含量与荧光染料的结合量成正比,因此通过测定荧光强度可获知细胞的增殖情况

DNA荧光染色的样品制备实验

            试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤

DNA荧光染色的样品制备实验

            试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤

DNA荧光组织化学染色的方法

一步双染色法先将两种荧光标{己抗体按适当比例混合(A+B),按直接法进行染色。二步双染色法先用TRITC标记的A抗体进行免疫荧光染色,再用FITC标记的B抗体染色,根据两种抗体的动物种属不同,可用直接法也可用间接法,结果A抗原呈现橘红色荧光,而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中,常用的方法是免疫荧光组织

核酸染色实验——DNA

核酸是细胞内的一种大分子化合物,核酸不仅存在于细胞核内,也存在于细胞质中,动物、植物和微生物等都含有核酸。核酸可分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)。经过染料和化学试剂,能够清楚地显示 DNA 和核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)物质。实验方法原理在一般情况下,通过盐酸水解后使 DNA 残基

细胞支原体污染的荧光检测方法:DNA萤光染色法

DNA萤光染色法 ·原理︰利用萤光染剂(bisbenzimide, Hoechst 33258)侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域,因为支原体之DNA中A-T含量占多数(55~80%),所以可将其染色而侦测。被支原体污染

原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法

基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观

原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法

基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观

荧光染色显示Y染色质法

实验方法原理在间期细胞核中,女性X染色质和男性Y染色质均可用特殊染色法显示出来。女性的两个X染色体中的一个,在间期时的染色质呈异固缩(Heteropyconosis),呈深染的小体称Barr氏体。Barr氏体位于间期细胞核内面,呈三角形或半月形小体,易为碳酸复红或硫堇等染料着色。正常女性Barr氏体

荧光测DNA浓度

Steve HahnLast updated 9/30/98This Dye measures DNA concentration using a fluorescent dye which binds only double stranded DNA. The fluorescence of th

病毒免疫荧光实验_​荧光抗体染色

实验材料细胞小玻片标本试剂、试剂盒荧光抗体实验步骤荧光抗体染色按不同反应机制,可有以下几种:1.直接法 用已知特异性病毒抗体与荧光素结合,制成荧光特异性抗体,直接与细胞或组织中相应病毒抗原结合,在荧光显微镜下即可见病毒或病毒抗原存在部位呈现特异性荧光。此法特异简便,但一种荧光抗体只能检查一种抗原,特

免疫荧光染色技术

抗原物质固定剂固定条件(min)蛋白质抗原95%~100%乙醇室温3~10酶、激素丙 酮4℃ 30免疫球蛋白四氯化碳病 毒丙酮、四氯化碳、无水乙醇室温5~10或4℃ 30~60多糖、细菌等微火加热,甲醇、10%甲醛、丙酮室温5~10或4℃ 30~60类 脂 (异嗜性抗原)10%甲醛,10%佛茂尔(F

骨组织的荧光染色

Fluorescent Label in BoneSome fluorescent compounds, which are fixed in newly formed calcified tissue, are used to label bone deposition. Such labels

吖啶橙荧光染色

【临床意义】  红细胞系统细胞核发深绿色荧光。原始红细胞有时可看到粉红色核仁。粒细胞系统细胞核发黄绿色荧光。原始粒细胞有时也可看到粉红色的核仁。但嗜酸性粒细胞的细胞核发深绿色荧光,比红细胞系统还要深一些。  淋巴细胞核的荧光稍带灰绿色。  各系统细胞的胞浆内因含有核糖核酸(RNA),所以均发红色荧光

细胞免疫荧光染色

实验概要细胞免疫荧光染色实验原理利用抗原抗体反应,鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后,用特异性抗体(一抗)识别目的蛋白,再用一抗的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团,通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、1

LSCM免疫荧光染色

免疫荧光染色 使用预冷的 PBS 缓冲溶液洗涤细胞,去除残留的培养液。立即加入 4% 多聚甲醛(PFA)固定液。在室温固定15 min。用 PBS 洗涤残留的固定液后,用 0. 5% Triton X-100 处理细胞 5 min,这样可以通透细胞膜,使抗体等大分子能通过细胞膜,进到固定细胞的内部。

SYPRO-Ruby-荧光染色实验

实验方法原理到目前为止,在常用来检测经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后的蛋白质的方法中,SYPRORUBY 可能是最灵敏的突光染色方法了,它能检测出仅含 1?2ng 蛋白的条带。遗憾的是,如此微量的蛋白条带经染色后用肉眼却不可见,需要一个荧光扫描仪检测(SYPRORuby 的最大激发光和发射光的波长分别是

组织免疫荧光染色

  概述:  织免疫荧光染色多是使用组织的冰冻切片,因为在切片过程中基本上暴露了细胞和细胞核内结构,故不需要使用细胞通透剂(Triton-100,NP-40)。染色后的切片应放置冰箱内避光保存,防止荧光淬灭。常用的荧光素有:异硫氰酸(fluorescein isothiocyanate,FITC,发

SYPRO-Orange-荧光染色实验

实验材料单向凝胶电泳分离后的蛋白样品仪器、耗材铝箔荧光扫描仪塑料容器实验步骤1.电泳结束后,将凝胶置于盛有试剂 A 的塑料容器中,试剂 A 的量要足够覆盖整块凝股。例如,一’块典型的 mini 胶(8 cmXIOcm 或 8 cmX8 cm) 需用 50~IOOml 的试剂 A。2.用铝箔遮盖好容器

荧光免疫染色和DAPI染色实验步骤

免疫染色实验方法和步骤免疫染色(immunol staining)包括免疫荧光(immunol fluorescence)、免疫组化(immunol histochemistry)、免疫细胞化学(immunol cytochemistry)等,可以参考如下步骤进行操作。 1. 样品准备(Sample

染色体外DNA的定义

中文名称染色体外DNA英文名称extrachromosomal DNA定  义存在于染色体外的DNA。包括线粒体DNA、叶绿体DNA和质粒DNA等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

染色体外DNA的定义

中文名称染色体外DNA英文名称extrachromosomal DNA定  义存在于染色体外的DNA。包括线粒体DNA、叶绿体DNA和质粒DNA等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

染色体DNA的提取

一、实验目的与原理DNA是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象。DNA的提取是分子生物学实验技术中的最重要、最基本的操作。本实验通过植物样品在液氮下研磨以粉碎组织,通过裂解液裂解细胞,有机溶剂反复抽提,使DNA进入水相与蛋白质成分分开,在RNase作用下,降解RNA以纯

DNA的Feulgen染色法

1.目的与原理实验目的:学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。实验原理:DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,使细胞内含有

DNA的Feulgen染色法

1.目的与原理 实验目的: 学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。 实验原理: DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚

DNA的Feulgen染色法

1.目的与原理实验目的:   学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。实验原理:   DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,

免疫荧光染色(间接法)

1、切片固定后用毛细滴管吸取经适当稀释的免疫血清滴加在其上,置于染色盒中保持一定的湿度,37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗两次,10min,用吸水吸去或吹干余留的液体。 2、再滴加间接荧光抗体(如兔抗人 -球蛋白荧光抗体等),同上步骤,染色30min,37℃,缓冲盐水

细胞免疫荧光染色实验

实验原理利用抗原抗体反应,鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后,用特异性抗体(一抗)识别目的蛋白,再用一抗的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团,通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec

角膜荧光素染色的概述

  角膜荧光素染色法,是一种了解角膜上皮有无缺损及角膜混浊是否为溃疡等的检查方法,可用1%~ 2%荧光素钠滴于下穹窿结膜囊内,1~2分钟后观察,角膜上皮缺损的部位有黄绿着色。 亦作泪膜破裂时间 (BUT) 的测定。