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DNA荧光染色的样品制备实验

试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤 DNA是细胞内含量比较恒定的参量,随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料(如PI)可选择性地定量嵌入核酸(DNA/RNA)的双螺旋碱基之间,与细胞特异性结合,DNA含量与荧光染料的结合量成正比,因此通过测定荧光强度可获知细胞的增殖情况。1. 将固定过的细胞离心(500~1000rpm,5min)弃上清液,再用PBS洗涤2次。2. 用PBS调整细胞浓度,每份为1×106个细胞/100μl。3. 加入1000μl DNA......阅读全文

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

DAPI 简易细胞核形态染色试剂盒产品说明书

  DAPI 简易细胞核形态染色试剂盒产品说明书   主要用途    DAPI 简易细胞核形态染色试剂是一种旨在通过使用荧光染料 DAPI 与细胞核 DNA 特异性结合,并发出荧光检测信号,用于分析和观察细胞核形态或 DNA 含量以及双重染色或重叠染色定位的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科

DAPI 简易细胞核形态染色试剂盒产品说明书(中文版)

   DAPI 简易细胞核形态染色试剂盒产品说明书(中文版)   主要用途   DAPI 简易细胞核形态染色试剂是一种旨在通过使用荧光染料 DAPI 与细胞核 DNA 特异性结合,并发出荧光检测信号,用于分析和观察细胞核形态或 DNA 含量以及双重染色或重叠染色定位的权威而经典的技术方法。该技术

FCM对外周白细胞的免疫荧光分析

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更

蓝色荧光细胞核染色分析试剂盒使用说明

主要用途YIJI蓝色荧光细胞核染色分析试剂是一种旨在通过使用荧光染料DAPI与细胞核DNA特异性结合,并发出荧光检测信号,用于分析和观察细胞核形态或DNA含量以及双重染色或重叠染色定位的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞核(动物、人体、植物、昆虫等)的观察。产

FCM对外周白细胞的免疫荧光分析

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更

细胞荧光化学实验

荧光法较一般光学方法具有灵敏度高、特异性强、方法简便等优点,因此近年来荧光组织化学特别是免疫荧光技术有了很大的发展。利用荧光技术可研究细胞内化学成分的分布与定位,研究细胞与组织中物质的吸收与转运,进行病理鉴别以及细胞免疫等方面的研究。 当用一种波长的光(如紫外光)照射某种物质时,这种物质会

流式细胞术简介

一、流式细胞术发展简史  流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是:①测量速度快,最快可在1秒种内计测数万个细胞;②可进行多参数测量,可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量,并具有明显的统计学意义;③是一

单细胞凝胶电泳法检测单细胞DNA损伤

单细胞凝胶电泳(single-cell gel eiectrophoresis,SCGE)又称慧星试验(comet assay)是一项较新的电泳方法。自1978年被Rydcbert B.等人成功地用于检验DNA单链断裂以来,经过不断的改进,已成为一种快速、灵敏、简便的检测DNA损伤的方法,广泛地应用

DAPI 简易细胞核形态染色试剂盒说明

主要用途DAPI 简易细胞核形态染色试剂是一种旨在通过使用荧光染料 DAPI 与细胞核 DNA 特异性结合,并发出荧光检测信号,用于分析和观察细胞核形态或 DNA 含量以及双重染色或重叠染色定位的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的

DAPI 简易细胞核形态染色试剂盒使用说明

主要用途DAPI 简易细胞核形态染色试剂是一种旨在通过使用荧光染料 DAPI 与细胞核 DNA 特异性结合,并发出荧光检测信号,用于分析和观察细胞核形态或 DNA 含量以及双重染色或重叠染色定位的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的

琼脂糖凝胶中DNA的检测

            实验方法原理 琼脂糖凝胶中的核酸通过染色,可以在波长为 300 nm 的紫外灯下检测。介绍琼脂糖凝胶中核酸染色的两种方法:溴化乙锭(ethidium bromide, EB ) 染色

琼脂糖凝胶中DNA的检测

实验方法原理 琼脂糖凝胶中的核酸通过染色,可以在波长为 300 nm 的紫外灯下检测。介绍琼脂糖凝胶中核酸染色的两种方法:溴化乙锭(ethidium bromide, EB ) 染色法和 SYBR Gold 染色法。试剂、试剂盒 溴化乙锭SYBR Gold实验步骤 1. 凝胶溴化乙锭染色法观察琼脂糖

琼脂糖凝胶中DNA的检测

琼脂糖凝胶中的核酸通过染色,可以在波长为 300 nm 的紫外灯下检测。介绍琼脂糖凝胶中核酸染色的两种方法:溴化乙锭(ethidium bromide, EB ) 染色法和 SYBR Gold 染色法。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理琼脂糖凝胶中的核酸通过染色,可以在波长

检测细胞凋亡的实验方法比较

◆ TUNEL 与 ELISA 检测凋亡的方法比较TUNEL法   细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3

DAPI染色液的使用方法及注意事项

DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是经过精心优化几乎适用于所有常见细胞和组织细胞核染色的染色液。DAPI,即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride,也称DAPI dihydrochloride,分子式

细胞培养用血清中的纳米细菌和黑胶虫有关系么

引言芬兰科学家Ciftcioglu et al进行哺乳动物细胞培养时发现细胞内存在一种原核微生物,能通过100 nm的滤菌器,Kajander将其命名为纳米细菌(nanobacteria)。纳米细菌广泛存在于自然界的矿物质中和生物体内,能感染人类、牛、鹿和其它哺乳动物,是一种人畜共患的致病原。纳米细

常用的分子生物学基本技术

核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成双链。杂交的

法医DNA检测仪器及其发展动向分析

摘    要:实践证明,法医DNA检测技术和相关仪器在犯罪嫌疑人认定、亲权鉴定和系列串并案侦破中发挥了显著作用,是我国公安一线侦察破案和打击犯罪的重要技术手段。以法医DNA检测技术为主线,对相关仪器的产生背景、发展历程、工作原理、各类技术优劣,以及国内外研究现

DAPI染色液使用说明

    DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是经过精心优化几乎适用于所有常见细胞和组织细胞核染色的染色液。   DAPI,即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride

细胞凋亡实验

细胞凋亡(Apoptosis) 又称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death,PCD)是指细胞基因调控的一种自主性的自杀现象。即是在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自主结束生命的死亡方式。凋亡一词最早是由年澳大利亚组织病理学家John Kerr通过研究大鼠肝左叶细胞死亡时,

常用细胞凋亡检测方法(三)

三、线粒体膜势能的检测   线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆

染色体Q显带技术

一、原理 Q显带技术早在1970年为Caspersson及其同事们首先用荧光染料染制染色体标本,在荧光显微镜下这些染色体呈现暗亮不同的条纹,为此有些学者(Coming等,1975,1978;Miller等,1973)认为主要是由于染色体中DNA内的AT丰富区对喹吖因荧光有增强作用,故显出亮带;反之

pcna抗体呈阳性怎么办?抗核抗体检查有多重要?

  抗核抗体检查的重要性  有做过免疫检查的姐妹应该已经接触过抗核抗体了,其实抗核抗体(以下简称ANA)是指抗细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。ANA主要是风湿性疾病的筛选试验,因为低效价的ANA可在感染、肿瘤及正常人中出现,未加稀释的常人血清约1/3也可呈阳性反应,因此ANA>1:80才有临床意

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用(一)

多聚集链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术发明至今已近20年了,在这期间技术得到了不断的发展,近年来出现的实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤介绍

  细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。   第一种 细胞凋亡的形态学检测   根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。  

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用(一)

 (张蓓,沈立松  上海第二医科大学附属新华医院上海儿童医学中心实验诊断中心)摘要:多聚酶链反应飞速的发展使其成为了分子生物学实验室重要的工具,实时荧光定量PCR(real-timequantitative PCR)技术以其敏感性高、重复性好、速度快和污染少使PCR技术又

细胞凋亡检测方法

  细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测  根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。  1 光学显微镜和倒

DNA Ladder的测定方法是怎么一回事?

  不同细胞不同状态是有不同死法的,具体是细胞凋亡、坏死、还是程序性坏死,需要进一步排查分析来确定。而细胞凋亡是个复杂的过程,针对凋亡时期不同,检测的方法有所不同。那如何去确定哪条途径被触发,在哪个步骤被阻断,以及抑制剂是否能够抑制呢?下面介绍几种常用的测定方法。  一:细胞凋亡的形态学检测  发生