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JACS:揭示荧光蛋白光异构化途径的结构证据

光异构化反应由于其灵敏的感光生物学功能,被广泛的应用于化工领域,如光学数据储存、分子转换。光异构反应中,以双键顺反异构化最为常见。共轭体系如绿色荧光蛋白(GFP)双键的异构化有两种途径,单键翻转(OBF)和键角扭转(HT)(Figure 1)。OBF途径只有τ键旋转,而HT途径相邻的φ键随着τ键旋转,OBF途径的原子轨道所需要的体积比HT途径大。因此,OBF途径常发生在允许自由运动的环境中,而HT途径常发生在空间受限的环境中。(图片来源:J. Am. Chem. Soc.) 为了探寻绿色荧光蛋白(GFP)双键光学异构化的途径,作者以rsEGFP2(可逆转换增强绿色荧光蛋白2) 为模型进行检测。rsEGFP2具有易结晶的特点和良好的光学特性。β-桶状折叠的rsEGFP2发光团自然条件下呈现顺式构象,在488nm的激光照射下很容易异构化为反式构象,相反,在405nm的激光照射下,反式构象异构化回顺式构象。rsEGFP2还有一个......阅读全文

JACS:揭示荧光蛋白光异构化途径的结构证据

  斯坦福大学Steven G. Boxer课题组揭示了荧光蛋白光异构化途径,以单个氯邻位取代的rsEGFP2为模型,通过测得Cl-rsEGFP2晶体结构的顺反构型,区分荧光蛋白(GFP)光异构化途径(OBF/HT)。X-射线单晶衍射和超显微技术辅助证实相关机理解释。相关成果发表在J. Am. Ch

单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)简介

摘要对单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)的研究分析近几年被广泛应用于生物及医学研究的诸多领域,筛查SNPs的方法很多,各具特色,并一直不断地发展.本文对筛查SNP的几种常用及最新方法做一简要介绍,其中包括PCR-RFLP,分子信标等.细胞外基质

包涵体蛋白溶解后的重折叠实验

实验步骤 一、常规操作方案 下面这个典型流程对许多蛋白质都有很好的效果。本 操 作 方 案 是 根 据 N g u y e n 等(1993)首先开发的方案改编而成,并用于冷泉港蛋白质纯化与鉴定课程的不溶性重组蛋白纯化部分(Bu

包涵体蛋白溶解后的重折叠实验

实验步骤一、常规操作方案下面这个典型流程对许多蛋白质都有很好的效果。本 操 作 方 案 是 根 据 N g u y e n 等(1993)首先开发的方案改编而成,并用于冷泉港蛋白质纯化与鉴定课程的不溶性重组蛋白纯化部分(Burgess and K n u t h , 1996)。其他类似的流程也可能

【综述】重组蛋白糖基化表征的进展与展望

  内容  1. 前言:生物制品糖基化表征的重要性  2. 糖蛋白表征用分析方法  2.1 糖基化特性  2.1.1 多糖的直接分析  2.1.2 糖谱分析  2.1.3 N-糖的异质性分析  2.1.4 单糖的分析  2.2 多糖分析用技术  2.2.1 糖分离技术  2.2.2 多糖检测技术  

2019年度黑龙江省自然科学基金项目拟立项名单公示

序号项目名称联合单位301籽鹅开产节律基因的筛选、功能验证及调控机制黑龙江八一农垦大学302承载三明治式免疫激活因子的LTB-MEP-PEI纳米微球免疫活性研究黑龙江八一农垦大学303玉米移栽生物质钵育秧盘制备方法及成型机理研究黑龙江八一农垦大学304黑龙江主产区稻米有机挥发性成分分布特征及影响因子

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验             实验步骤

多项仪器研发项目列入863计划和2014备选项目

  一、前沿生物技术主题  1.蛋白质测序新技术新装备及配套试剂国产化  (1)阵列毛细管柱蛋白质分离-阵列点样装置  研制二维阵列毛细管分离新装置,第一维分离柱可分离48个馏分,第二维维阵列毛细管分离柱可同时分离48个流份;开发阵列紫外检测器; 研制多柱点样头并行点样器和流份收集器;开发

中科院优博、院长奖获得者科研启动专项资金评选结果公布

根据《关于印发<中国科学院“优秀博士学位论文、院长奖获得者科研启动专项资金”管理办法>的通知》的有关规定,2011年度中国科学院“优秀博士学位论文、院长奖获得者科研启动专项资金”评审遴选已完毕,获资助人员及项目公布如下:  

激光扫描共焦显微镜技术及应用(二)

五、激光扫描共焦显微镜技术的应用定位、定量三维重组动态测量¨ 活细胞或组织内游离Ca2+浓度的测量¨ 活细胞内H+浓度( pH值)的测量¨ 自由基的检测¨ 药物进入细胞的动态过程、定位分布及定量 应用:细胞膜电位的测量      荧光漂白恢复(FRA

盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验

盘绕螺旋结构的设计和优化技巧             实验步骤 本节讨论盘

盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验

虽然表观上简单,盘绕螺旋(coiled coil ) 模体是高度专一的,并在理解三级结构及其形成方面具有重要意义。最常观察到的盘绕螺旋形态——平行二聚态,其一般的结构类型仍有待全面的描述。尽管如此,其结构已呈现出在某些特定位置需要某些特定类型氨基酸的严格规则。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德

JACS/Angew/AM 11篇,赵东元、彭笑刚、楼雄文、张强等成果速递

  1. JACS:用于检测癌细胞和肿瘤中溶酶体甲醛含量的双“锁钥”钌复合探针  生物医学研究表明,过量的甲醛生成是造成组织癌变、癌症进展和转移的关键因素之一。响应性分子探针可以检测活细胞和肿瘤中溶酶体内的甲醛,并对药物引发的甲醛清除过程进行监测,这也有助于未来的癌症诊断和治疗监测。  大连理工大学

粪便检验及进展

  粪便是由未消化的食物、经消化后未吸收的食物残渣与消化系统分泌物、消化道粘膜脱落物以及微生物、寄生虫等组成的混合物。进行粪检验可以获得被检者消化系统功能、病理变化以及微生物和寄生虫感染等广泛的信息,具体来说,进行粪检验,一可以了解消化道及通向消化道的肝、胆胰等器官是否有梗阻、炎症和出血等

流式细胞术在高等植物研究中的应用

流式细胞术(Flow cytometry,简称FCM)是20世纪70年代发展起来的一种对细胞的物理性质及化学性质,如细胞大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测定并可分类收集的技术。该技术超越了传统显微分析技术,能在瞬间对大量细胞进行准确的分析。这种快速有效的细胞分析技术已广泛应用于

ClonePix技术快速筛选和开发高表达GPCR的哺乳细胞系(一)

ClonePixTM 2系统提供了一种全新、快速评估哺乳细胞系GPCR靶蛋白表达水平的方法 1.  用哺乳表达系统快速评估GPCR靶蛋白的內源表达水平 2.  增加发现最优细胞反应器的可能性 3.  减少细胞系/抗体开发的时间—避免有限稀释法    

CRISPR/Cas9蛋白切割DNA过程中的调控和校验机制

  清华大学生命科学学院陈春来研究组在《Cell Reports》杂志发表了研究论文,题目为“The Conformational Dynamics of Cas9 Governing DNA Cleavage Are Revealed by Single-Molecule FRET”(利用单分子F

IHC/ICC/IF实验前需要知道的几个要点

IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚?它们都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术,由于技术相对简单且直观,在科研和临床上都得到了大量使用。但是影响最终检测效果的变量非常多;每一个具体的检测都会遇到多个需要调整的变量。具体到选择何种方法来保存组织样本;固定标本该用醇还是醛;如何选择最合适的一抗;抗原修

包涵体的纯化和复性总结

关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌?  细胞的破碎方法  1.高速组织捣碎

包涵体的纯化-2

1.2.7重组融合蛋白的纯化 PrP-pET-32a(+)转化表达菌E.coli BL21(DE3),TB培养基中,25℃,AMP 200 ug/ml,摇床(250 r/min)培养至OD600约为1.5,更换等体积新鲜TB培养基,加入IPTG至终浓度1 mM,AMP 200 ug/ml,

包涵体的纯化和复性总结-2

8、包涵体复性液配方 对于包涵体复性,一般在尿素浓度4M左右时复性过程开始,到2M 左右时结束。对于盐酸胍而言,可以从4M开始,到1.5M 时复性过程已经结束。TRIS系统和PBS系统都没有明确的规定,这些需要你在实验过程中不断试验,确定合适的缓冲系统;不过复性过程主要

IHC/ICC/IF实验前需要知道的几个要点~!

  IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚?它们都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术,由于技术相对简单且直观,在科研和临床上都得到了大量使用。但是影响最终检测效果的变量非常多;每一个具体的检测都会遇到多个需要调整的变量。具体到选择何种方法来保存组织样本;固定标本该用醇还是醛;如何选择最合适的一抗;抗

浙江大学JBC发表生化研究新发现

  来自浙江大学的研究人员在视网膜中鉴别出了一个新型的脂褐素成分iisoA2E,并确定了它在视网膜色素上皮细胞中的效应。相关研究成果发表在10月29日的《生物化学杂志》(JBC)上。   文章的通讯作者是浙江大学药物院的特聘研究员吴亚林(Yalin Wu)博士,其主要研究方向有黄斑变性疾病的致病机

阿尔兹海默症最新研究进展一览

  本期为大家带来的是有关阿尔兹海默症相关领域的最新研究成果,希望读者朋友们能够喜欢。  1. eLife:靶向代谢功能障碍的疗法或有望治疗阿尔兹海默病  DOI:10.7554/eLife.50069  近日,一项刊登在国际杂志eLife上的研究报告中,来自耶鲁—新加坡国大学院(Yale-NUS

生物物理所基于光致电子转移扩展荧光蛋白的传感性质

  9月11日,美国化学会杂志JACS 在线发表了中国科学院生物物理研究所王江云研究组的最新研究成果——《基因编码非天然氨基酸作为光致电子转移探针扩展荧光蛋白的传感性质》。该研究利用基因密码子扩展技术,实现了在活细胞中编码一系列卤代酪氨酸(3-氯代酪氨酸(ClY)、3,5-二氯代酪氨酸(Cl2Y)、

GPCR-G蛋白复合物形成过程的结构见解

G蛋白偶联受体(GPCR)构成最大的细胞表面受体家族,其感知细胞外信号并激活细胞内途径。激动剂结合的GPCR与鸟苷二磷酸(GDP)结合的Gαβγ异源三聚体相互作用,导致GDP释放和鸟苷三磷酸(GTP)结合,然后异源三聚体的功能性解离和下游途径的激活。GPCR通常优先激活调节不同细胞信号传导途径的三种

追求卓越 上海通微携液相色谱全线产品亮相BCEIA 2019

  分析测试百科网讯 2019年10月23日,第十八届北京分析测试学术报告会暨展览会(BCEIA 2019)在北京国家会议中心隆重开幕。上海通微分析技术有限公司此次带来了覆盖纳流到制备级的液相色谱全线产品,其中新品有EasySep®-3030液相色谱系统、UM 5800 Plus蒸发光散射检测器、P

实时定量PCR应用中的优化方案

 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)自诞生之日起就决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法,而且也是一个能对核酸分子进行精确定量的有力工具[1]。随着分子生物学技术研究的不断进展,定量PCR技术取得了突飞猛进的发展,不仅建立了一系

真核细胞表达系统的类型与常用真核细胞表达载体

原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统,由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷,人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。自上世纪70年代基因工程 技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今

阴彩霞团队合成探针Ly-NT-SP,用于溶酶体中SO2检测

  近日,山西大学分子科学研究所阴彩霞教授课题组合成了探针Ly-NT-SP,用于溶酶体中SO2的检测。探针Ly-NT-SP在pH 5.0的PBS溶液中在535 nm有明显的荧光发射。紫外光照射后,Ly-NT-SP中的螺吡喃基团异构化为半花菁形式(Ly-NT-MR),其荧光发射峰红移至630 nm。此