一步法CrystalRT数字PCR(CrystalRTdPCR)直接进行RNA绝对...

一步法Crystal RT-数字PCR(Crystal RT-dPCR)直接进行RNA绝对定量检测一步法反转录-PCR(RT-PCR)广泛用于RNA分析,如基因组表达、病毒检测,从生命科学研究到诊断的许多领域,都有所应用。一步法Crystal RT-数字PCR实现了直接对RNA样本进行多重靶标基因的检测(内参基因、多重目标基因)和病毒RNA的绝对定量,无需标准曲线,同时实现了基因表达的细微差异的精确检测。一步法Crystal RT-数字PCR技术(Crystal RT-dPCR)实现了同一个反应中,通过三个荧光通道进行三种不同的mRNA分析,可以显著且准确地区分1.5倍的基因表达差异(图1)。图1:一步法Crystal RT-数字PCR(Crystal RT-dPCR)对人总RNA中mRNAs进行绝对定量对人总RNA进行1.5倍倍比稀释,浓度变化范围0.06ng/µl-3.6ng/µl,通过一步法Crystal RT......阅读全文

一步法Crystal-RT数字PCR(Crystal-RTdPCR)直接进行RNA绝对...

一步法Crystal RT-数字PCR(Crystal RT-dPCR)直接进行RNA绝对定量检测一步法反转录-PCR(RT-PCR)广泛用于RNA分析,如基因组表达、病毒检测,从生命科学研究到诊断的许多领域,都有所应用。一步法Crystal RT-数字PCR实现了直接对RNA样本进行多重靶

crystal数字PCR如何实现的核酸绝对定量?

crystal数字PCR技术是一种核酸分子的绝对定量技术,原理是将PCR反应体系分配到大量微小的反应器中,在每个微反应器中包含或不包含 1 个或多个拷贝的目标核酸分子 (DNA 模板) ,进行"单分子模板"PCR 扩增。扩增结束后,通过阳性反应单元(通过终点荧光信号判断)的数目和统计学方法计

基于EVAGREEN®方法的CRYSTAL数字PCR绝对定量检测

基于EVAGREEN®方法的CRYSTAL数字PCR绝对定量检测EvaGreen®是一种无致突变性、无细胞毒性的DNA结合染料,NaicaTM Crystal全自动微滴芯片数字PCR仪系统可兼容EvaGreen®染料进行的数字PCR实验分析。反应体系中游离的的EvaGreen®染料不发出荧光信号,但

NaicaTM-crystal-微滴芯片式数字PCR系统

   导语:数字PCR技术是基于PCR技术发展起来的核酸检测和定量的最新技术,在众多应用中,在精准医疗方面的应用尤为突出。法国Stilla Technologies公司专注于开发新一代核酸绝对定量技术,其旗下品牌Naica TM Crystal全自动微滴芯片数字PCR仪系统具有高灵敏度、高精

qPCR-和-Crystal-dPCR-进行复杂生物样本DNA/RNA绝对定量的比较

复杂生物样本(含PCR抑制剂)中DNA/RNA绝对定量的解决方案: Crystal dPCR更耐受抑制剂dPCR和qPCR(Real-time PCR)技术定量检测DNA/RNA时抑制剂的影响对比众所周知,数以千种的化学物质会抑制PCR反应有作用,而生物样本往往都会含有类似的化合物,在DNA/RNA

Crystal-Violet-Assay

This is a simple assay useful for obtaining quantitative information about the relative density of cells adhering to multi-well cluster dishes. The dy

福立Crystal-9000气质联用仪申报ANTOP奖

  春风十里,ANTOP 2019第一期申报工作正在如火如荼的进行,多家科学仪器企业竞相参与申报,这里将为您介绍ANTOP奖项“打榜”产品。  为响应国家“一带一路”高新技术合作战略方针,福立仪器自2018年与俄罗斯分析仪器第一品牌Chromatec进行深入合作。创建共建品牌Fuli-Chromat

RT-PCR反应原理

RT- PCR反应原理从细胞或特定组织中提取总RNA。逆转录实验。扩增内参和目的基因并比较基因表达差异。RT-PCR反应受多个因素影响,如硫酸镁的浓度, 引物退火的温度,扩增的循环数等。   ◇建议选择0.5-3.0 mM (相差0.5 mM)的硫酸镁作初步实验。   ◇对于具有较高Tm的引物,增加

数字PCR简介

1985年美国科学家Kary Mullis发明PCR方法以后,PCR已经成为生命科学研究领域中最常规的实验方法之一。PCR是用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,可看作是生物体外的特殊DNA复制。PCR的最大特点,是能将微量DNA大量扩增。最传统的一代PCR采用琼脂糖电泳的方式对PCR产物进

高灵敏数字PCR方法新冠病毒混样检测的运用

基于Naica自动化数字PCR系统和Apexbio新冠病毒检测试剂盒,混样检测灵敏度高于RT-PCR单样本检测,混样检测数字PCR方法灵敏度:3拷贝/PCR,RT-PCR单样本检测WHO:5拷贝/PCR,该方法可以将检测试剂用量减少约80%,检测成本可减少10倍,检测能力增加10倍。随着全球新冠病例

第三代数字PCR技术应用分享

数字PCR技术即Digital PCR技术真正实现了对目标DNA或RNA分子进行绝对定量,在精密度、准确度和灵敏度方面有无与伦比的优势,同时解除了对Ct值和标准品的依赖,提高了抑制剂的耐受能力,因此被称作第三代PCR技术。 Naica crystal 全自动微滴芯片数字PCR仪系统自动化生成25

浙江福立Crystal-9000气质联用仪喜获2019第一季ANTOP奖

  分析测试百科网讯 伴随着炎炎夏日的到来,ANTOP 2019第一季评奖已经到了尾声。经过广大网络用户踊跃参与和热情投票,经过专家的严格评审,浙江福立分析仪器股份有限公司Crystal 9000 气质联用仪成功获得“一带一路”高端科学仪器合作奖ANTOP奖。  为响应国家“一带一路”高新技术合作战

数字PCR在造血干细胞移植后嵌合状态检测的应用

背景导读—何为嵌合状态的检测?骨髓和外周血干细胞移植是许多恶性和非恶性疾病的有效治疗方法。造血干细胞移植后,受体产生新的血细胞,这些血细胞在遗传上来自于供体DNA。确认新的造血系统来源于供体是临床复发监测的重要组成部分。一般采用血细胞基因型检测的方式,称为嵌合体分析。完全供体细胞嵌合状态意味着100

BioDigital.青数字PCR:实现更高通量的核酸绝对定量

  ——上海小海龟科技有限公司总裁吴东平博士专访  分析测试百科网讯 2021年3月28日,第十八届中国国际检验医学暨输血仪器试剂博览会(简称“CACLP”)在“山城”重庆悦来国际博览中心召开。在本次展会上,上海小海龟科技有限公司(简称小海龟科技)为观众带来了全自动化数字PCR解决方案。分析测试百科

血浆中ctDNA甲基化数字PCR检测攻略Naica数字PCR的应用

基因调控区的DNA甲基化状态的改变可导致多种癌症的发生。这种表观遗传学改变在生物学上是稳定的,并存在于循环肿瘤DNA(ctDNA)中,使其适合于早期检测和无创动态监测肿瘤负荷。数字PCR技术凭借其较高的灵敏度、精准度以及对抑制剂的耐受度,在对低拷贝样品检测时表现出了极大的优势。在转移性和II/III

One-Step-RT-PCR-PreMix(染料法)使用说明

One Step RT- PCR PreMix(染料法) 使 用 说 明 书 【前言】 本产品提供了一个灵敏、高效、快速地扩增并检测 RNA 的完整系统。One Step RT- PCR preMix 包含所有 RT-PCR 所需的、并经优化的 Reaction Buffer、RT 酶混合物等,使用

微滴芯片数字PCR技术在检测新冠病毒的应用

国家卫健委发布了《新型冠状病毒肺炎防控方案(第五版)》,其中在实验室检测技术指南中明确提出,核酸检测结果阴性不能排除新型冠状病毒感染。3月4日,国家卫健委发布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》 中提到了以下两点:对疑似病例要尽可能采取包括快速抗原检测和多重PCR核酸检测等方法对呼吸道病

科研人员研发出病毒抗原定量检测试剂盒

  病毒核酸检测作为新冠病毒感染确诊的金标准,也存在一些问题,比如只可定性检测、假阴性偏多、检测结果不稳定等。近日,复旦大学附属中山医院葛均波院士团队利用已公开的新冠病毒核酸序列,迅速研发了基于数字PCR技术平台的核酸定量检测试剂盒。  数字PCR是一种核酸分子绝对值定量技术,能够直接数出DNA分子

浅析IVD最成熟的技术领域蕴藏的机遇

IVD增速最快的细分行业当属分子诊断,而分子诊断主要包括核酸诊断和生物芯片技术。核酸诊断主要分为聚合酶链式反应(PCR)和荧光原位夹杂(FISH)。PCR目前在分子诊断细分技术中最为成熟且应用最广。在这一技术红海的最远处,数字化PCR技术因为其先进性尚处于蓝海竞争市场,国内外企业积极参战,让这一领域

如何使用KeyPro污染净化仪防止RNA的降解和保证PCR的结果...

如何使用KeyPro污染净化仪防止RNA的降解和保证PCR的结果准确性在此次的新型冠状病毒疫情中,核酸检测作为确诊的金标准发挥着重要的作用。众所周知,本次新冠病毒的核酸检测流程为采样(咽拭子、肺泡灌洗液),提取病毒RNA,再经过RT-qPCR或者一步法RT-数字PCR检测样本。但近期关于核酸检测准确

Naica数字PCR技术解析在Favipiravir药物抗B型流感病毒的应用

病毒性肺炎(viral pneumonia)是由病毒侵犯肺实质细胞而造成的肺部炎症,常由上呼吸道病毒感染向下蔓延引起。随着呼吸道病毒检测技术的进步,病毒性肺炎的发病率和死亡率逐渐得到认识,研究人员发现流感病毒感染占病毒性肺炎患者的大多数。流感病毒是季节性流感和偶发性流感大流行的病原体。世卫组织估

RTPCR技术的定义和检测方法

   1.定义:是以RNA为模板,联合逆转录反应(reverse transcription,RT)与PCR,可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的RNA 模板。 RNA扩增包括两个步骤:在单引物的介导下和逆转录酶的催化下,合成RNA的互补cDNA;加热后cDNA与RNA链解离,然后与另一引

RTPCR的定义与检测方法

1.定义:是以RNA为模板,联合逆转录反应(reverse transcription,RT)与PCR,可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的RNA模板。 RNA扩增包括两个步骤: 在单引物的介导下和逆转录酶的催化下,合成RNA的互补cDNA;加热后cDNA与RNA链解离,然后与另一引物退火

什么是RTPCR,RTPCR的定义与检测方法?

1.定义:是以RNA为模板,联合逆转录反应(reverse transcription,RT)与PCR,可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的RNA模板。 RNA扩增包括两个步骤: 在单引物的介导下和逆转录酶的催化下,合成RNA的互补cDNA;加热后cDNA与RNA链解离,然后与另一引物退火

RNA提取与RTPCR(2)

融解RNA一般使用TE。 保存RNA应该尽量低温。为了防止痕量RNase的污染,从富含RNase的样品(如胰脏、肝脏)中分离到的 RNA需要贮存在甲醛中以保存高质量的RNA,对于长期贮存更是如此。从大鼠肝脏中提取的RNA,在水中贮存一个星期就基本降解了,而从大鼠脾脏中提取的 RNA,在水

Realspace-and-realtime-dynamics-of-CRISPRCas9-visualized-by-...(二)

ResultsRNA-induced structural stabilization in Cas9We first observed apo-Cas9 and pre-assembled Cas9–RNA on a mica surface treated with 3-aminopro

总RNA提取实验——一步法

实验材料RNA试剂、试剂盒乙酸钠氯仿异戊醇异丙醇乙醇SDS酚仪器、耗材离心机分光光度计摇床实验步骤1.  组织来源材料:100 ng 组织加1 ul 变性液,在玻璃Teflon匀浆器中将其匀浆。2.  培养细胞:离心弃悬浮细胞培养液或倒去单层培养细胞培养液(不需用生理盐水洗涤),每107细胞加入1

教你如何同时鉴别和定量耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

还记得来自Nature的伦敦音吗?转成正宗曼德瑞,教你如何同时鉴别和定量耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( MRSA)北京时间10月24日来自英国伦敦LGC的丹尼斯·奥沙利文,在全球范围内分享了她所在的分子与细胞生物学团队通过Naica crystal 数字PCR仪的三色检测通道,成功地在一次反应中达到

数字PCR技术

数字PCR作为第三代PCR技术,它是将分子生物学与现代微机电、微纳制造等工程技术相结合的典范。数字PCR以聚合酶链式反应的理论和技术体系为基础,结合现代微机电和光学检测技术,实现单分子水平的核酸精确定量检测。数字PCR的核心思想是将核酸样品平行划分为大规模单分子水平的微反应单元,然后对众多微反应单元

pcr产物没有纯化能够直接进行双酶切吗

PCR产物经PCR纯化试剂盒纯化后,可以做EcoRI和BamHI的双酶切。酶切、纯化都可以用PCR纯化试剂盒完成,只有一种情况例外,PCR模板为质粒,且这个质粒和要用的载体有相同的抗性。此时需要跑一次胶来丢掉模板质粒,否则在连接产物转化的平板上长出的菌落许多是模板质粒,而不是你所构建的质粒。PCR产