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冷冻组织切片制作

实验试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇实验设备载玻片,Whatman 1#滤纸,低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织实验步骤1. 将未受损伤的组织切剖成小样本,约lcmXIcmX0.4cm。2. 将标本放在卡片的一端。标记该卡片,将带有标本的一端浸入液氮中。60s后,取出标本并放在干冰上。修剪卡片,使其大小刚好比组织块稍大些,转入预冷的(-70℃)带有标记的小瓶中。3. 切片前,用1%明胶包被洁净的载玻片。加热至50℃使明胶溶于水中,冷却,加入0.02%叠氮钠。将玻片浸入明胶溶液中30s,取出,自然干燥。4. 按照仪器使用说明书,用低温恒温器制备冷冻切片。通常切片厚度在5-10gm之间。用包被过的载玻片收集切片。5. 让切片自然干燥。浸入新鲜配制的......阅读全文

组织学切片机分类及应用

切片机分为很多种类,包括药材类切片机,器材类切片机,食品类切片机,组织切片类切片机等。按其结构又可分为摇动式切片机、轮转式切片机、滑动式切片机、推动式(雪橇式)切片机等。组织切片机是一种对人体组织及动植物组织作病理切片分析的设备。组织切片机一般分为:轮转式切片机和冷冻切片机。轮转式切片机:是借转动手

冷冻切片的制作方法及注意事项

冷冻切片的方法及注意事项一、实验前准备⒈清理实验台及仪器⒉开启冷冻切片机并将冷冻切片机预降至所需温度(- 15~-20 ℃*)⒊准备好处理好的载玻片、刀片、胶水以及药品二、取材解剖之后迅速取出所需的新鲜组织,用干纱布或滤纸擦干后不需固定直接取材(24×24×2mm*),以防形成冰晶造成切片中形成形状

微生物实验冰冻切片的方法及注意事项

一、实验前准备⒈清理实验台及仪器⒉开启冷冻切片机并将冷冻切片机预降至所需温度(- 15~-20 ℃*)⒊准备好处理好的载玻片、刀片、胶水以及药品二、取材解剖之后迅速取出所需的新鲜组织,用干纱布或滤纸擦干后不需固定直接取材(24×24×2mm*),以防形成冰晶造成切片中形成形状不一的空泡,使细胞内结构

冷冻切片的方法及注意事项

一、实验前准备1、清理实验台及仪器2、开启冷冻切片机并将冷冻切片机预降至所需温度(- 15~-20 ℃*)3、准备好处理好的载玻片、刀片、胶水以及药品二、取材解剖之后迅速取出所需的新鲜组织,用干纱布或滤纸擦干后不需固定直接取材(24×24×2mm*),以防形成冰晶造成切片中形成形状不一的空

组织微阵列的制作

实验概要本文介绍了组织微阵列(TMAs)的制作原理及基本操作流程。实验原理组织微阵列原理是借鉴计算机平行分析的思维 ,对生物信号进行平行分析。利用微点阵技术 ,借助于机械手将成千上万的组织片点阵固定于固相载体上,可进行常规 HE染色 ,也可以与标记的样品进行聚合酶链反应、荧光原位杂交、免疫组

打破铁律的方法只有一个

  高效率尽显技术优势   “近年来,虽然国内外生命科学领域的研究发展很快,但由于缺乏与海量候选基因再筛查和功能分析相配套的、性能可靠的、多用途高通量的下游检测技术,同时也没有一种利用一个组织块同时完成上述全部实验内容的技术方法,从而很难保证用于上游检测和下游核实的组织样本来源于(基本)相同的

组织芯片制备的技术路线和基本制作过程

组织芯片制作机细针打孔法实验材料组织蜡块试剂、试剂盒莱卡石蜡蜂蜡水冰块仪器、耗材载玻片组织芯片制作机塑料盒温箱冰箱切片机冰袋APES切片黏合剂取样针通过组织芯片制作机细针打孔的方法,从众多的组织蜡块(称为供体蜡块,donor)中采集到数十至上百的圆柱形小组织(组织芯,tissue core),并将其

免疫组化的经验总结(1)-常见问题

免疫组织化学的概念: 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体

组织芯片的制备——石蜡块组织芯片

实验方法原理首先制作模具蜡块(受体,recipient)。从供体蜡块(donor)上取样,取样针分别有 0.6 mm、1.0 mm、1.5 mm 和 2.0 mm 几种,在 1 个大小 45 mm×20 mm 的模具蜡块上,以 0.6 mm 取样针间隔 0.1 mm,可排列 1000 余个位点,如取

电镜与样品制备技术

电镜样品取材方法 1 动物及人体组织的取材 动物组织的取材,应在麻醉(1%戊巴比妥钠按5ml/kg体重腹腔注射)或断头急性处死,解剖出所需器官,用解剖剪刀剪取一小块组织,放在干净的纸板上,滴一滴冷却的固定液,用新的、无油污锋利的(双面)刀片将材料切成大约1㎜宽,2~3㎜长的小块,从中挑选损伤小的小条

cRNA探针在原位杂交组织化学

Angerer及其同事们首先应用RNA探针于原位杂交(见Cox et al 1984),核酸探针为单链的RNA分子,产生自具有质粒逆转录系统的cDNA克隆(图20-2)。由于它是单链的,不像双链的DNA探针,在溶液中不会再退火(reanneal),因此,较大百分比的探针可参与杂交反应,较cDNA探针

膜片钳用脑片的振动切片机ZQP-86的简介和操作说明

ZQP-86型振动切片机,是科研人员参考国外技术资料研制而成的,从切片功能和效果上与进口振动切片机相近,性价比高,它广泛地应用于科研、教学、化工、医疗卫生等单位将近30年。客户遍布全球各大研究院校,Indiana University,School of Medicine;Murdoch Unive

电子断层成像技术及其应用

电子断层成像技术构建的线粒体的全新结构,向传统教科书上的观点发起挑战。传统观点认为线粒体内膜向内突出形成冠状的嵴,而断层成像显示为内膜向内突起形成管腔结构。迄今为止,电子断层成像技术已广泛应用到快速冷冻(plung-freezing)的样品研究中去。自从快速冷冻和制作较厚的冷冻切片成为常规技术以来,

免疫细胞化学技术在肾脏疾病中的应用范围

第一节 免疫细胞化学技术在肾脏疾病中的应用范围在肾脏疾病时,免疫细胞化学技术主要应用于肾脏穿刺组织的检查,也可应用于血清或肾脏洗脱液及尿液的特殊检查,兹分述如下:一、肾脏组织的检查肾穿刺组织一般应切割为三小块,分别作冰冻切片、石蜡切片及超薄切片,进行荧光显微镜、光学显微镜及透射电镜观察。所应用的免疫

冷冻组织切片的制作

实验概要本实验介绍了冷冻组织切片制作的基本操作流程。主要试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇主要设备载玻片,Whatm

冰冻切片固定实验

实验方法原理原位杂交中所用冰冻切片必须用多聚甲醛固定,然后再脱水。实验材料冰冻组织试剂、试剂盒PFAPBS乙醇仪器、耗材加湿盒实验步骤1.  将承有切片的载玻片放入加湿盒中,加4%PFA覆盖整个切片,盖上加湿盒,如为预先未固定过的组织,则于室温放置20 min,如是固定过的组织则放置5 m

量子点标记干细胞移植入心肌损伤部位并实现在体三...

量子点标记干细胞移植入心肌损伤部位并实现在体三维荧光成像干细胞移植对于修复受损心肌组织具有潜在的临床应用前景,有研究者将干细胞注射入心肌作为生物起搏器,但是,如果这些细胞偏离移植部位,将会形成局部心律失常,有潜在的致命风险。因此,迫切需要对移植的干细胞进行在体示踪观察。绿色荧光蛋白和传统荧光染料在体

免疫酶细胞化学实验技术-3

一、对照实验  1.吸收实验  应用尚无文献报告的抗血清/自己制备的抗血清进行ICC染色时,需用相应的抗原吸收抗血清后,再孵育标本,判断结果的可信性(结果应为阴性)。常用的吸收实验分固相吸收和液相吸收两种(见本书第一章 ),对于不能形成沉淀,难以用离心沉降法分离的一些小分子多肽类抗原,以固相吸收为佳

原位杂交组织化学实验技术4

 二、生物素标记cRNA探针在原位杂交组织化学中的应用  (一)光敏生物素标记cRNA探针的应用  以线性质粒DNA为模板合成未加标记物的cRNA探针,使其最终浓度为0.5~1.0μg/μl(500~1000ng/μl),再与等体积的光敏生物素(1μg/μl)混合。在150瓦卤素灯下,距离光源20c

机智!MIT大牛妙招将纳米级光学显微镜带入临床

  近日,来自MIT生物工程学院的Edward S Boyden教授与陈飞博士,赵永兴博士以及哈佛大学医学院研究人员合作开发了一种非常简单易操作的技术,显微扩张技术,只需使用婴儿尿不湿中的高分子材料,就可以将普通光学显微镜的分辨率提升到70纳米,并且可以广泛应用于临床病理检测。  同时他们还发现,借

超薄切片机在单个动物特定组织基因和蛋白多个基因调...

超薄切片机在单个动物特定组织基因和蛋白多个基因调节网络同时研究中的应用Compresstome VF-700超薄切片机实现单个动物特定组织基因和蛋白多个基因调节网络的同时研究研究者使用最新型的切片仪器Compresstome VF-700(Precisionary Instruments Inc.,

SEM特殊样品的制备技术,你知道吗?

  一、直接观察法  1.基本描述:样品不经过任何处理,直接粘贴到样品托上入镜观察  2.适用范围:适合于低倍条件下, 观察含水量少的、表面有一定导电能力的、对分辨率要求不高的样品.  3.基本步骤:取材→风洗水洗后风干或不洗→粘样→常压或低压观察  4.适用样品: 植物干标本,干种籽,干果、果壳,

解读《肿瘤个体化治疗检测技术指南》:9大检测技术

  肿瘤的个体化治疗基因检测已在临床广泛应用,实现肿瘤个体化用药基因检测标准化和规范化,是一项意义重大的紧迫任务。  为进一步提高肿瘤个体化用药基因检测技术的规范化水平,7月31日,国家卫生计生委个体化医学检测技术专家委员会,在广泛征求意见的基础上,制订了《肿瘤个体化治疗检测技术指南(试行)》。  

冰冻切片的制作技巧及心得(一)

下面发一个有关冰冻切片制作的资料,来自于国外病理医生的经验和心得,现翻译过来供大家参考,欢迎提出不同的见解。冰冻切片技术1.从锋利的刀片开始我发现使用新的锋利的刀片时常常做出高质量的片子。我觉得在医疗场合中某些尽量省钱的做法显得有些因小失大。一般我对每位患者的标本都使用一组新的刀片,当片子的质量开始

病毒免疫荧光实验_病毒染色标本的制备

实验材料待检测病毒试剂、试剂盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯仪器、耗材玻片实验步骤1. 培养细胞小玻片标本的制备 根据所检测病毒种类,选择敏感细胞进行培养,如乙型肝炎病毒用乳地鼠肾细胞 (BHK21 细胞)培养,森林脑炎病毒用绿猴肾细胞 (Vero 细胞)培养,登革热病毒用白纹伊蚊

免疫组化染色步骤

石蜡切片免疫组化染色步骤1、载玻片的处理:    抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysin

免疫组化常见问题及解决方法

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗

中国检科院公开招标3704万元实验室仪器设备

  分析测试百科网讯 近日,中国检验检疫科学研究院发布2017年实验室仪器设备采购项目招标的公告,此次发布的公告涉及气相色谱仪、全自动蒸馏仪、超高灵敏度二噁英分析仪等57台仪器,总预算3704万元。  采购项目的名称、数量、简要规格描述或项目基本概况介绍:  项目名称:中国检科院2017年实验室仪器

结构生物学里程碑:低温电子显微镜技术时代来临

   X射线晶体衍射技术(X-RAY CRYSTALLOGRAPHY)即将成为历史,低温电子显微技术(CRYO-ELECTRON MICROSCOPY)引起了揭示细胞内隐秘机制的革命。  在剑桥大学一幢建筑的地下室里,一场技术革命正在酝酿。  一个笨重的、大约3米高的金属盒子通过连接细胞的橙色缆线,

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