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免疫学细胞因子的定量检测,Elispot酶联斑点分析技术二

(2) ELISPOT 技术的现在 1996年以来随着抗体制备、PVDF膜材篁等技术改良,ELISPOT 分析技术已经逐渐达到科研人员的期待,它已是当世公认最灵敏抗原特定T细胞的体外检测技术。藉由检验新鲜分离PBMC细胞所分泌cytokine的指纹,ELISPOT 分析技术可提示T细胞免疫系统的两个重要参数:抗原特定T细胞的clone族群大小;和免疫效应细胞的信号传导路径Th1/Th2。 多年来经过数十个研究团队的致力研究,对于ELISPOT分析技术本身的几个问题,也有了科学上的验证。目前一般公认,ELISPOT技术允许科研人员在单细胞水平上识别抗原特定T细胞,主要针对经由CD4或者CD8细胞的免疫反应。在适当的实验设计下,ELISPOT Cytokine 斑点的数量分析显示斑点是由一个单细胞所生成,同时斑点形态学与Time Respo......阅读全文

流式细胞仪技术(FCM)原理及应用

 流式细胞术(FCM)简述  流式细胞术 (Flow Cytometry)是70年代发展起来的一种利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理化及生物学特性(细胞大小、DNA/RNA含量、细胞表面抗原表达等)进行定量、快速、客观多参数相关检测分析的新技术。它借

流式细胞仪技术(FCM)

流式细胞术(FCM)简述流式细胞术 (Flow Cytometry)是70年代发展起来的一种利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理化及生物学特性(细胞大小、DNA/RNA含量、细胞表面抗原表达等)进行定量、快速、客观多参数相关检测分析的新技术。它借鉴了荧光显微镜技术与血球计数原理,同时利用荧光染料,激光

流式细胞仪技术(FCM)原理及应用

流式细胞术(FCM)简述  流式细胞术 (Flow Cytometry)是70年代发展起来的一种利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理化及生物学特性(细胞大小、DNA/RNA含量、细胞表面抗原表达等)进行定量、快速、客观多参数相关检测分析的新技术。它借鉴了荧光显微

流式细胞仪在生物学中的应用

流式细胞仪在生物学中的应用 耿慧霞 ,王 来 ,王 强 (河南大学生命科学学院 ,河南开封 475001) 摘 要 :简要论述了流式细胞仪(flow cytometry ,FCM) 的工作原理 ,并对其在生物学基础科学研究中的应用进行阐述 ,包括 对细胞凋亡、细胞周期、免疫细胞、细胞受体的研

免疫资料——免疫学常用简称介绍

1:抗体查询常用名词Reactivity (物种与抗体反应):Species with which the antibody reactsHost Species (宿主):Host in which

MHC Tetramer 技术:检测抗原特异性 T 细胞的金标准

MHC 四聚体(MHC Tetramer)是一类免疫学试剂,由四个主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)与抗原肽结合的单体分子组成,并标记有荧光,用于 T 细胞免疫分析的 MHC 四聚体检测(MHC Tetramer Assay,

ELISpot实验操作流程

ELISPOT全名为酶联免疫斑点检测,英文:Enzyme-linked Immunospot Assay。它结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(即ELISA技术),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理,一句话概括就是:用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表

梳理疾病生物标志物最新进展

  个体化医疗正越来越受到临床医学界的重视,而生物标志物是实施个体化医疗的基础。生物标志物(Biomarker)是近年来随着免疫学、分子生物学和基因组学技术的发展而提出的一类与细胞生长、增殖、疾病发生等有关的标志物;能反映正常生理过程或病理过程或对治疗干预的药物反应,在早期诊断、疾病预防、药物靶点确

ELISPOT

随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用,使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合,而不能确切的反映体内的抗体

动物细胞培养及外源基因导入的原理和操作步骤

实验概要通过本实验掌握传代细胞培养的基本方法,了解无菌操作的基本原则。掌握磷酸钙介导的贴壁细胞的通用转染方法。了解细胞凋亡的形态特征,掌握细胞凋亡DNA梯度(“DNA Ladder”)电泳检测法。实验原理细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点,一是研究对象是活的细胞,可长时期

动物细胞培养及外源基因导入的原理和方法

细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点,一是研究对象是活的细胞,可长时期地监控、检测甚至定量评估其形态、结构和生命活动等;二是可以人为地严格控制研究条件,便于研究各种物理、化学、生物等外界因素对细胞生长、发育和分化等的影响,有利于单因子分析;三是研究的样本可以达到比较均一性。

动物细胞培养及外源基因导入的原理和操作步骤(一)

实验原理细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点,一是研究对象是活的细胞,可长时期地监控、检测甚至定量评估其形态、结构和生命活动等;二是可以人为地严格控制研究条件,便于研究各种物理、化学、生物等外界因素对细胞生长、发育和分化等的影响,有利于单因子分析;三是研究的样本可以达到比较

流式细胞术(FCM)简述

流式细胞术(Flow Cytometry)是70年代发展起来的一种利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理化及生物学特性(细胞大小、DNA/RNA含量、细胞表面抗原表达等)进行定量、快速、客观多参数相关检测分析的新技术。它借鉴了荧光显微镜技术与血球计数原理,同时利用荧光染料,激光技术,单抗技术以及计算机技

详解RANDOX 生物芯片

Evidence®是一个全自动的生物芯片分析系统。核心技术是RANDOX的生物芯片,在一块9mm×9mm的固态基质表面,运用了的有机金属硅烷化芯片表面处理技术和纳米分配技术,分布25个分散独立测试区(DTR),每个DTR由可与分析物特异结合的抗体或其他物质组成。RANDOX的表面硅烷化处理技术,可以

四聚体——抗原特异性T细胞检测金标准

实验概要       抗原特异性T细胞在细胞免疫应答中发挥着核心作用,因此定量测定抗原特异性T细胞数量在判定机体细胞免疫功能方面提供重要的信息。传统的抗原特异性T细胞功能检测方法有经典的Cr51释放试验、有限稀释法(LDA)、酶联免疫斑点试验(ELISPOT)

浅述分子诊断的前世今生及未来

  分子诊断与治疗是当代医学发展的必然   纵观医学诊断和治疗学科的发展历程,正是由于包括物理学、化学、免疫学、分子生物学等学科在内的一个个犹如星斗般灿烂的重大发现和发明,才使得医学诊断与治疗学科与时俱进,不断丰富、发展与完善。 分子诊断学发展历程   以DNA双螺旋结构的模型提出为标志,分子

分子诊断与分子治疗是当代医学发展的必然

  医学科学发展的实践已经并且必将继续表明,科学与技术的发明和重大发现对医学科学的发展产生着重要的影响。诊断与治疗是医学科学的两个重要方面和组成部分,诊断与治疗学科的发展与进步也无不打上不同时代科学技术进步的烙印。   纵观医学诊断和治疗学科的发展历程,正是由于包括物理学、化学、免疫学、

应用单细胞基因表达研究艾滋病疫苗在细胞水平上的反...

应用单细胞基因表达研究艾滋病疫苗在细胞水平上的反应差异Fluidigm 技术应用· 单细胞基因表达· BioMark系统· 96.96整合微流体动态芯片 文中提到的研究是Lukas Flatz博士在美国国家卫生研究院做博士后时所进行的工作。他现在是瑞士洛桑医院大学皮肤科的医生和研究员。&n

应用单细胞研究艾滋病疫苗在细胞上的差异

  Fluidigm 技术应用   单细胞基因表达   BioMark系统   96.96整合微流体动态芯片   文中提到的研究是Lukas Flatz博士在美国国家卫生研究院做博士后时所进行的工作。他现在是瑞士洛桑医院大学皮肤科的医生和研究员。   简介   美国

一文了解12月HIV研究亮点进展

  人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV),即艾滋病(AIDS,获得性免疫缺陷综合征)病毒,是造成人类免疫系统缺陷的一种病毒。1983年,HIV在美国首次发现。它是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒(lentivirus),属逆转录病毒的一种。HIV通过

流式细胞仪构成与工作原理

流式细胞仪构成与工作原理 张 艺 (南京师范大学生命科学院 ,江苏 南京 210046) [摘 要]流式细胞仪是分选细胞结构与功能 ,准确迅速选标记细胞的仪器。本文讲述流式细胞仪的主要组件,工作原理及其实 际应用。 [关键词]流式细胞仪 ;流式细胞术 [中图分类号] T H776 [文献

流式细胞仪在医学研究与检验工作中的应用

流式细胞仪(flow cytometry, FCM)是一种对单细胞或其他生物粒子膜表面以及内部的化学成分进行快速定量分析与分选的医学仪器。它集光学、电子学、流体动力学、细胞化学、生物学、免疫学和计算技术于一体,可以高速度分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精密度高、准确性

流式细胞仪在医学研究与检验工作中的应用

流式细胞仪(flow cytometry, FCM)是一种对单细胞或其他生物粒子膜表面以及内部的化学成分进行快速定量分析与分选的医学仪器。它集光学、电子学、流体动力学、细胞化学、生物学、免疫学和计算技术于一体,可以高速度分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精密度高、准确性好

流式细胞仪在医学研究与检验工作中的应用

流式细胞仪(flow cytometry, FCM)是一种对单细胞或其他生物粒子膜表面以及内部的化学成分进行快速定量分析与分选的医学仪器。它集光学、电子学、流体动力学、细胞化学、生物学、免疫学和计算技术于一体,可以高速度分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精密度高、准确性好

活体成像——让肿瘤细胞无处遁形

在科普今天的知识前,不禁让小编回忆起大学校园的美好时光,那个时候小编还是个走在绿树荫下的青涩少年啊,在一次参加关于肿瘤免疫学的学术会议上,看到了类似下面这种图,我就在想,这小鼠是修炼了什么内家功法,被打通任督二脉了?那五颜六色的东东是什么?经过向老师还有身边的小伙伴们请教才知道,这是利用活体成像技术

人ucMGP检测试剂盒(ELISA法)仅供科研

  人ucMGP检测试剂盒(ELISA法)仅供科研使用范围:仅供科研使用,不得用于临床。   产品用途:用于测定血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。   检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭elisa试剂盒等种属   产品保存:2~8℃、有效期6个月,我司elisa试

结核感染T细胞斑点试验在结核性心包炎诊断中的应用

 背景:近年研究表明,结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)通过酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测外周血中经结核菌特异性抗原刺激后释放干扰素的T细胞,诊断活动性结核分枝杆菌感染具有较高的敏感性⋯ ,本研究主要针对我院收治的高度怀疑结核性心包炎的患者进行ELISPOT检测,评价该方

人SP-DELISA试剂盒-实验测定质量

  人SP-DELISA试剂盒-实验测定质量使用范围:仅供科研使用,不得用于临床。   产品用途:用于测定血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。   检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭elisa试剂盒等种属   产品保存:2~8℃、有效期6个月,我司elisa试剂盒为

蛋白质分析技术(Western Blot、ELISA、免疫荧光与免疫组化技术)

1 原理:将通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或PVDF膜上,然后与能特异性识别待检蛋白的抗体进行反应,洗涤去除没有结合的特异性抗体后,加入标记的、能识别特异性抗体的种属特异性抗体,反应一段时间后再次洗涤去除非特异性结合的标记抗体,加入适合标记物的检测试剂进行显色或发光等,观察有无特

Western Blot、ELISA、免疫荧光与免疫组化技术

  1 原理:   将通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或PVDF膜上,然后与能特异性识别待检蛋白的抗体进行反应,洗涤去除没有结合的特异性抗体后,加入标记的、能识别特异性抗体的种属特异性抗体,反应一段时间后再次洗涤去除非特异性结合的标记抗体,加入适合标记物的检测试剂进行