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试剂、试剂盒 cDNA 样品rRNA 引物和探针目的基因的引物和探针Tag Man Universal PCR Master Mix 超纯水仪器、耗材 序列监测仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂来自方案 5 的 cDNA 样品20X18SrRNA 引物和探针（AppliedBiosystems)20X 目的基因的引物和探针（AppliedBiosystems)2XTagManUniversalPCRMasterMix(4304437,AppliedBiosystems,FosterCity,CA)DEPC 处理的超纯水 (BiotecxLaboratories)(储存于 4°C)试剂储存于-20°C2. 特殊货备AppliedBiosystems7700 序列监测仪（PEAppliedBiosystems，FosterCity，CA)二、方法1. 稀释来自方案 5 的 cDNA，1:1002. 用 1ul 稀释溶液做对......阅读全文
实时荧光定量PCR在人感染猪流感诊断中的作用彭年才12 张镇西1 兰邹然3 黄兵3 李红东2 李明2 苗保刚2 1西安交通大学生物医学分析技术与仪器研究所 2西安天隆科技有限公司 3山东省动物疾病预防与控制中心200
实时荧光PCR检测技术众所周知，PCR（聚合酶链反应）技术自从1985年问世以来，经过十几年的发展，已成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段，是一种极为敏感的放大系统。相比于传统的临床诊断方法，核酸诊断是分子水平上的诊断技术，可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷，比如，核酸诊断能
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后，我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析，也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析。无论定性还是定量分析，分析的都是PCR终产物。但是在许多
【摘要】 目的 对本室利用Taq Man MG技术建立的HSV-2实时定量PCR法进行方法学评价及临床应用。 方法 收集60名近期有流产史妇女的全血及血清标本，分别用FQPCR和ELISA法同时检测，并进行比较；另对FQPCR从重复性、灵敏度、线性范围、特异性几方面进行方法学评价。结
结核病是严重危及全球的公共卫生问题之一，自1985年以来结核病疫情在全球范围内急剧上升，据世界卫生组织报道，目前全球有近1/3的人感染了结核杆菌，即20亿人口感染了结核杆菌，其中活动性肺结核病人约2 000万，每年新增结核病人约800～1 000万，每年约有300万人死于结核病［1～3］。结核病已成
【摘要】目的 建立结核分枝杆菌的荧光定量PCR检测方法,探讨荧光 PCR检测痰标本中结核分枝杆菌的应用价值。方法 根据结核分枝杆菌基因保守序列设计引物和探针，并构建标准品。对102例培养涂阳的结核痰液标本和45例非结核感染者的痰标本，应用荧光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法检测结核分枝杆菌。 结果 荧
简介：什么是PCR芯片？实时定量PCR是检测基因表达zui灵敏，zui可靠的方法。通过在试验过程中，实时监测荧光染料的信号变化，反映样品中的基因拷贝数。实时定量PCR线性范围广（能达到5个数量级），因此可以检测同一样品中表达量极低的基因和表达量很高的基因。但是，由于实时定量PCR需要制备
利用实时定量PCR和2－△△CT法分析基因相对表达量 METHODS 25, 402–408 (2001)Analysis of Relative Gene Expression Data Using Real-Time Quantitative PCR and the 2－△△CT M
聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）自诞生之日起就决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法，而且也是一个能对核酸分子进行精确定量的有力工具[1]。随着分子生物学技术研究的不断进展，定量PCR技术取得了突飞猛进的发展，不仅建立了一系
实践中的问题实时定量PCR已广泛地运用于分子生物学的各个领域，就目前的应用情况来看，虽然取得了很好的效果，但是其在方法学上的选择、敏感性问题、重复性问题等都一直是争论不休的，本文将就这些问题做出探讨。1. 方法的选择：研究者在实验中往往想要得到目的基因的绝对量，因为绝对定量对目的基因的表达差异有直接
MicroRNA (miRNA)是一种机体内源性表达的单链小分子RNA，位于基因组非编码区，本身不具有开放阅读框(open reading frame，ORF)，具有高度保守性，时序性和组织特异性。miRNA广泛存在于各种真核细胞中，不编码任何蛋白质，长度仅为20～24nt。成熟
实时荧光定量PCR（Real-time PCR，QPCR，荧光定量）分类以及实验步骤介绍实时荧光定量PCR（Real-time PCR，QPCR，荧光定量）技术（Real-time quantitative PCR），是指在（QPCR，荧光定量）反应体系中加入荧光基因，
实时荧光定量PCR技术（Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction简称Real Time PCR，如果用于RNA检测，这被称为逆转录实时PCR即Real-time RT-PCR）是实时PCR法，它是指对DNA或经过反转入（RT-PCR
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后，我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析，也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析。无论定性还是定量分析，分析的都是PCR终产物。但是在
浅析乳制品中高危害食源性致病菌--阪崎肠杆菌的快速检测摘 要：2006年国家出台的《婴幼儿配方乳粉生产许可证审查细则》中明确要求采用国际通行的“荧光PCR仪”作为出厂检验必备设备，此要求已成为乳品企业生产许可证核发的必要条件。本文简单综述了国际通行的保证食品安全的食
分析测试百科网讯，根据《新型冠状病毒肺炎防控方案（第五版）》，作为新型冠状病毒肺炎诊断的“金标准”，除湖北地区在核酸检测基础上增加CT检测外，全国其它地区以及全球各地区，目前都以核酸检测阳性为确诊依据。核酸检测除了100多家试剂盒企业推出产品，主要比拼产能、灵敏度、获得医疗器械注册证的速度外，所
PCR技术的诞生 1985年，美国科学家Kary Mullis发明了具有划时代意义的PCR技术他因此在1993年获得诺贝尔奖 PCR是什么？ PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强
目前疫情的防控工作取得了阶段性的成效，基于实时荧光定量PCR的核酸检测技术在新冠病毒快速鉴定及确诊中发挥了重要作用。什么是实时荧光定量PCR？实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）技术，简称qPCR,是在PCR反应体系中加入荧光物质（荧光染料或荧光标记的特异性探针
近年来，随着微生物基因组学的发展，微生物基因检测迎来了新的机遇。2000年，Makino等已经完成V．p的基因组测序，V．p毒力基因及特异的基因序列得到进一步确定。根据V．p特异基因序列，设计引物，进行PCR检测，是现阶段检测V，p的最快速准确的方法。目前应用于检测V．p的PCR方法主要有任意引物
一、什么是miRNA?MicroRNAs (miRNAs)是一种大小约21—23个碱基的单链小分子RNA，是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成，不同于siRNA（双链）但是和siRNA密切相关。据推测，这些非编码小分子RNA（miRNAs）参与调控基
分析测试百科网讯 2015年10月27日，国内分析测试行业影响力最大的展会2015 BCEIA在北京国家会议中心举办。作为业内规模和质量最高的盛会之一，此次BCEIA上主要有三家厂商展出了四款最新的PCR技术，分析测试百科网小编进行了详细盘点。
PCR概念PCR，中文名是聚合酶链反应(基因扩增)基本原理 类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR是模拟体内DNA复制过程，在体外特异性扩增DNA片段的一种技术。PCR的应用领域：1、遗传病和某些疑难病的诊断2、病原体的检测。某些恶性疾病一般用微生
嗜酸乳杆菌是重要的益生菌，被大量应用在食品中。研究表明嗜酸乳杆菌能在乳制品中产生乳酸，并能通过氨基酸代谢增加风味。嗜酸乳杆菌主要作用有降低pH值、产生抗菌素（如嗜酸菌素和乳酸杀菌素等），在一定程度上抑制肠道中有害微生物的有害作用。有研究发现嗜酸乳杆菌对大肠杆菌、腹泻致病菌等均有抑制作用；大量的嗜酸乳
1、Ct值的定义在荧光定量PCR技术中，有一个很重要的概念--Ct值。C代表Cycle，t代表threshold，Ct值的含义是：每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。2、荧光域值（threshold）的设定PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号，荧光域值的缺省设置是3-
提起 PCR，在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳，无人不知无人不晓，其影响之深，应用之广可见一斑。 1985 年，美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应（PCR），实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而，采用 E-coli D
提起 PCR，在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳，无人不知无人不晓，其影响之深，应用之广可见一斑。 1985 年，美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应（PCR），实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而，采用 E-
分析测试百科网讯 近日，美国食品和药物管理局（FDA）进一步扩展了赛默飞SARS-CoV-2实时PCR测试的紧急使用授权。 该测试名为Applied Biosystems TaqPath COVID-19 Combo Kit，最初于3月13日获得EUA授权，并于3月24日和4月20日进行了扩展
实时荧光定量PCR——一种科学准确的定量方法实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前已得到广泛应用。本文试就其定量原理、
功能强大的五色平台已经过校准，可提供种类的染料：FAM™/SYBR® Green I、VIC®/JOE™、NED™/ TAMRA™/Cy®3、ROX™/Texas Red® 和 Cy®5 染料 独特设计的快速加热块可在速运行的时候保证热均一性 在不影响延伸时间或分析质量的情况下，快速
METHODS 25, 402–408 (2001)Analysis of Relative Gene Expression Data Using Real-Time Quantitative PCR and the 2－△△CT MethodKenneth J. Li