线粒体分离实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 RSBMS 缓冲液仪器、耗材 Dounce 匀浆器实验步骤 1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞，转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB（使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液）10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol/L Tris-HCl，pH 7.52. 让细胞膨胀 5~10 分钟。用相差显微镜监测膨胀过程。3. 用研杵 B ( 小间隙型）研磨几下使膨胀细胞破碎。4. 立刻加入 8 ml 2.5x MS 缓冲液至终浓度为 1x MS。用封口膜封住匀浆器顶端，倒转数次使溶液混匀（如果要进行标志酶检测，还要留下部分匀浆 )。2.5 x MS 缓冲液：525 mmol/L 甘露醇175 mmol/L 蔗糖12.5 mmol/L Tris-HCl，pH 7.52.5 mmol/L EDTA，pH 7.51 x MS 缓冲液：210 mmol/L......阅读全文
线粒体分离实验
从组织培养细胞中分离线粒体 从组织中分离线粒体 用蔗糖密度梯度法纯化线粒体 实验材料 细胞
线粒体分离实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 RSBMS 缓冲液仪器、耗材 Dounce 匀浆器实验步骤 1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞，转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB（使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液）10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210
线粒体分离实验—从组织中分离线粒体
实验材料肝脏试剂、试剂盒MS仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 取出肝脏，注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中，剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片，用匀浆缓冲液（1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的
线粒体分离实验—从组织培养细胞中分离线粒体
实验材料细胞试剂、试剂盒RSBMS 缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞，转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB（使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液）10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol
线粒体的分级分离实验
高速离心法实验材料线粒体 仪器、耗材离心机 实验步骤 1. 将装有上清
线粒体的分级分离实验
实验材料 线粒体仪器、耗材 离心机实验步骤 1. 将装有上清液的高速离心管，从装有冰块的烧杯中取出，配平后，以17 000 rpm 离心20分钟，弃上清，留取沉淀物。2. 加入0.25 mol/L 蔗糖-0．003 mol/L 氯化钙液1 ml，用吸管吹打成悬液，以17 000 rpm 离心20
线粒体分离实验—用蔗糖密度梯度法纯化线粒体
实验材料线粒体悬液试剂、试剂盒蔗糖溶液Tris-HClEDTA仪器、耗材Bockman SW28 号转头实验步骤1. 在用于 Bockman SW28 号转头（或与其等同的产品）的 Uitradear 离心管中，小心地在 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液上加一层 15 ml 1.5 mol
线粒体的分级分离实验——高速离心法
实验材料线粒体仪器、耗材离心机实验步骤1. 将装有上清液的高速离心管，从装有冰块的烧杯中取出，配平后，以17 000 rpm 离心20分钟，弃上清，留取沉淀物。2. 加入0.25 mol/L 蔗糖-0．003 mol/L 氯化钙液1 ml，用吸管吹打成悬液，以17 000 rpm 离心20分钟。
线粒体的分离与观察
一、实验目的1. 初步掌握用差速离心法分离大鼠肝细胞线粒体的方法。2. 学习并掌握高速离心机和匀浆器的使用方法。二、实验原理线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化，并通过偶联磷酸化生成ATP，供给细胞生理活动之需。
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验
实验材料黄化苗 试剂、试剂盒匀浆缓冲液 清洗缓冲液
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验
实验材料黄化苗试剂、试剂盒匀浆缓冲液清洗缓冲液Percoll 梯度溶液仪器、耗材分光光度计实验步骤在选好植物材料和匀浆缓冲液后，接下来关键的因素包括匀浆方法、缓冲液的 pH、使用的缓冲液与植物组织之间的比例、研磨时间及温度等（见注释 5) 。3.1 匀浆根据植物组织的不同可以采取不同的匀浆方法，或者
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验（一）
实验材料 黄化苗试剂、试剂盒 匀浆缓冲液清洗缓冲液Percoll 梯度溶液仪器、耗材 分光光度计实验步骤 在选好植物材料和匀浆缓冲液后，接下来关键的因素包括匀浆方法、缓冲液的 pH、使用的缓冲液与植物组织之间的比例、研磨时间及温度等（见注释 5) 。3.1 匀浆根据植物组织的不同可以采取不同的匀浆方
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验（二）
3.5 纯度鉴定可以通过各种细胞器标志性酶的活性来确定线粒体的污染程度。过氧化物酶体可以鉴定过氧化氢酶、羟基丙酮酸还原酶或者乙二醇氧化酶的活性；叶绿体可以用叶绿素含量，白色体可以用类胡萝卜素的含量或碱性焦磷酸酶的活性；乙二醛循环体可以用异柠檬酸裂解酶的活性；内质网可以用对抗霉素 A 不敏感的细胞
如何从培养细胞中分离线粒体
看你的目的，是要分离线粒体蛋白（不需要线粒体有活性），还是要做线粒体功能？但是方法一般是把细胞磨碎（有特殊的匀浆器），然后密度梯度离心。如果需要纯度很高，那还要超速离心。需要提醒的就是，这样提取线粒体需要大量，大量的细胞。说明书上说，如Hela，要1-2ml。。。。就是说细胞离下来，得有1-2个ml
绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
实验方法原理 利用差速离心，将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来，再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA，然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A，硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核
绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
实验方法原理 利用差速离心，将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来，再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA，然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A，硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核酸酶 A。通过 CsCl 梯度离心，线粒体 RNA 沉
线粒体电镜照片观察实验
实验方法原理 线粒体同内质网一样，除原核细胞和哺乳动物成熟的红细胞外，其他所有细期线粒体(mitochodri)。一个细胞中线粒体的数目、形状和大小常因细胞和生理状况等不同而有较大的差别，如某种海藻中只有一个线粒体，玉米根品中有100~300
线粒体电镜照片观察实验
电子显微镜常用的有透射电镜（transmissionelectronmicroscope，TEM）和扫描电子显微镜。与光镜相比电镜用电子束代替了可见光，用电磁透镜代替了光学透镜并使用荧光屏将肉眼不可见电子束成像。实验方法原理线粒体同内质网一样，除原核细胞和哺乳动物成熟的红细胞外，其他所有细期线粒体(
线粒体电镜照片观察实验
实验方法原理线粒体同内质网一样，除原核细胞和哺乳动物成熟的红细胞外，其他所有细期线粒体(mitochodri)。一个细胞中线粒体的数目、形状和大小常因细胞和生理状况等不同而有较大的差别，如某种海藻中只有一个线粒体，玉米根品中有100~3000 个，而海胆卵母细胞中线粒体多达30 万个;在光学显微镇粒
线粒体电镜照片观察实验
实验材料 兔子试剂、试剂盒 詹纳斯绿B染液Ringer氏液仪器、耗材 显微镜载玻片盖玻片实验步骤 一、线粒体的光镜切片观察1. 用詹纳斯绿B染色的兔肝细胞光镜切片，肝细胞中的线粒体呈蓝绿色的颗粒。二、线粒体的电镜照片观察1. 不同细胞中线粒体的形态和数目不同。线粒体的外形多样，如圆形、椭圆形、哑
线粒体的活体染色实验
实验方法原理活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿 B是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。实验材料兔子试剂、试剂盒显微镜手术器材解剖盘平皿载玻
线粒体电镜照片观察实验
实验方法原理 线粒体同内质网一样，除原核细胞和哺乳动物成熟的红细胞外，其他所有细期线粒体(mitochodri)。一个细胞中线粒体的数目、形状和大小常因细胞和生理状况等不同而有较大的差别，如某种海藻中只有一个线粒体，玉米根品中有100~300
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究
2.2.3－绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
实验方法原理利用差速离心，将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来，再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA，然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A，硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核酸酶 A。通过 CsCl 梯度离心，线粒体 RNA 沉淀下来。最
细胞核与线粒体的分级分离
一、所需试剂及设备小白鼠、冰块、玻璃匀浆器、普通离心机、台式高速离心机、普通天平、光学显微镜、载玻片、盖玻片、刻度离心管、高速离心管、滴管、10ml量筒、25m1烧杯、玻璃漏斗、解剖剪、镊子、吸水纸、纱布、蜡盘、平皿、牙签。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺
细胞核与线粒体的分级分离
实验概要通过细胞匀浆和离心的方法分级分离细胞的组分，以了解其原理及过程。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过
细胞核与线粒体的分级分离
实验概要掌握细胞核与线粒体的分级分离的实验技术。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究亚细胞成分的化
细胞组分的分析方法——线粒体的分离与观察
一.实验目的用差速离心法分离动、植物细胞线粒体。二.实验原理 线粒体（mitochondria）是真核细胞特有的，司能量转换的重要细胞器。细胞中的能源物质——脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化，并通过藕联磷酸化生成ATP，供给细胞生理活动之需。对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行