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小胶质细胞原代培养

实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料 新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒 含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+0.04%的EDTA)仪器、耗材 37℃恒温摇床实验步骤 1按照培养少突胶质细胞的方法,待10d后细胞分层生长。显微镜下可见满视野圆形、折光性强的小胶质细胞,附着在贴壁生长、紧密连接在一起、铺满培养瓶的星形胶质细胞层上面,甚至可见许多圆形小胶质细胞飘落在培养液中,此时可以开始纯化。2.将培养瓶固定到37℃恒温摇床上,80-200r/min,振摇2h左右。3收集振摇下来的小胶质细胞,种植到多聚赖氨酸包被的培养皿中,加入新的含10%胎牛血清的DMEM培养基继续培养,每2-3d换液1次。4.小胶质细胞在体外较难进一步分裂增殖,但如果根......阅读全文

小胶质细胞原代培养实验

实验方法原理利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+

小胶质细胞原代培养实验

基本方案             实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下

小胶质细胞原代培养

实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料 新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒 含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋

皮层星形胶质细胞的原代培养实验

贴附差异法             实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的

皮层星形胶质细胞的原代培养实验

贴附差异法             实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的

少突胶质细胞原代培养

少突胶质细胞来源于1-2 天的大鼠。断头后大鼠大脑收集到Ham’s F-12培养液中,移除脑膜和血管。皮质用机械匀浆进行匀浆然后将细胞悬液依次通过230μm和104μm尼龙网进行过滤。细胞通过1000rpm 7分钟离心进行收集,用添加12.5%胎牛血清的DMEM进行重悬细胞。最后以2.0×1

星形胶质细胞(astrocyte)原代培养

星形胶质细胞来源于2天的大鼠。断头后的大鼠大脑收集在含有11mM 碳酸氢钠,71mM葡萄糖和1%抗菌素的DMEM溶液中。移除脑膜,血管和白质。大脑皮层用机械分裂法进行匀浆,然后将细胞悬液经230μm,104μm 和73.3μm孔的铁丝网依次过滤。然后用700g 速度10分钟离心收集细胞,

皮层星形胶质细胞的原代培养

实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的皮层来源的混合胶质细胞中去除少突胶质细胞和小胶质细胞,其中星形胶质细胞的贴附力最强。用这种方法获得的星形胶质细胞纯度很高(95%以上),且细胞具有较好的增

小鼠原代小胶质细胞吞噬功能的分析

实验概要本实验主要介绍从小鼠大脑分离的神经胶质细胞的吞噬功能。实验步骤为了检测小胶质细胞的吞噬功能,利用凋亡的神经祖细胞作为目标,因为在体外环境下它能最模拟自然条件下小胶质细胞的吞噬目标。1. 将神经祖细胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中进行分离

小鼠原代小胶质细胞吞噬功能的分析

实验概要本实验主要介绍从小鼠大脑分离的神经胶质细胞的吞噬功能。实验步骤为了检测小胶质细胞的吞噬功能,利用凋亡的神经祖细胞作为目标,因为在体外环境下它能最模拟自然条件下小胶质细胞的吞噬目标。1. 将神经祖细胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中进行分离