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淋巴细胞转化实验

实验材料 肝素试剂、试剂盒 199培养液小牛血清链霉素青霉素PHA仪器、耗材 注射器针头试管吸管离心机实验步骤1. 采肝素抗凝血1~2毫升(1毫升血中加肝素20单位)充分混匀。37℃静置1~2小时。红细胞沉淀后,吸取血浆层并捎带些红细胞。移入另一无菌试管中。计算白细胞数然后2000 rpm 离心10分钟。弃上清液。用199培养液将沉淀的白细胞配成1×107/毫升细胞悬液。2. 取细胞悬液0.6毫升(6×106细胞)加入含有2.4毫升199培养液的培养瓶中。3. 按每毫升营养液加30 ug PHA加入PHA。4. 37℃孵育68~72小时。培养过程中,每天翻动培养瓶1~2次。5. 培养后。振荡培养瓶。将细胞重新悬起,然后移入试管中。6. 1000 rpm 离心5分钟。7. 尽量弃去上清液,将沉淀物混匀,取一滴放在载玻片上,推成血膜(头、体、尾分明)......阅读全文

淋巴细胞转化实验

淋巴细胞转化实验在临床上应用可用于(1)反映出受试者T细胞总体水平的应答功能,判断细胞免疫状态和探讨发病机制(2)选择适宜的移植供体(3)寻找迟发型变态反应的原因(4)估计疾病的疗效和预后。实验方法原理正常机体的T淋巴细胞在体外培养过程中受到特异性抗原或有丝分裂原刺激。可转化为淋巴母细胞。细胞免疫缺

混合淋巴细胞培养(3H-TdR掺入法)

实验概要熟悉混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte cultue,MLC)的原理;掌握分离淋巴细胞的方法;学习用同位素标记进行混合淋巴细胞培养的操作方法。实验原理混合淋巴细胞培养或称混合淋巴细胞反应(MLR)是将二个无关个体的淋巴细胞混合在一起培养,由于二者的淋巴细胞膜上的组织相容性抗原

淋巴细胞转化形态学检查法

实验概要本实验对淋巴细胞的转化进行了形态学检查。主要试剂1. 植物血凝素  目前国内已有成品出售(广州医药工业研究所),可根据需要,作适当稀释后使用。一般为每毫升培养液加入PHA 50~75μg。也可自制,即从广东食用红肾豆(鸡子豆)或东北菜豆中提取,经效价滴定后,按每毫升培养液加

淋巴细胞转化试验方法

T细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)或特异性抗原刺激后,可出现代谢旺盛、蛋白质和核酸合成增加、细胞体积增大并能进行分裂的淋巴母细胞,此称为淋巴细胞转化现象。淋巴细胞转化率的高低,可以反映机体的细胞免疫水平,因此,可作为测定机体免疫功能的指标之一。本实验采用形态学方法进行淋

免疫力检测方式方法

免疫力检测方式方法:一、 目前常用的有关免疫力的检查1 常规血液学检查——依据白细胞及淋巴细胞比例来判断免疫力状况,缺点是参考范围广,无法精确判断免疫力状况。2 淋巴细胞的检查——免疫细胞的活性检测,如淋巴细胞转化实验,根据淋巴细胞转化程度测定免疫应答功能。但功能需结合细胞定量检查,结果更可靠。 3

T淋巴细胞转化实验的基本原理

T淋巴细胞转化实验的基本原理T细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化.淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一.T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原

将B细胞重编程为功能性T淋巴细胞研究(一)

来一个关于B细胞重新编程为T细胞的精彩故事^_^且听我慢慢讲来[1] ……目前已经有很多研究证明通过特定转录因子的表达可以将多能或多能细胞导向分化成特定类型的细胞或从一个谱系转变为另一个谱系。比如Gata1的表达将单核细胞前体转化为红系-巨核细胞和嗜酸性粒细胞[2-4] ,Ceb

混合淋巴细胞培养实验

实验方法原理 两个无关个体功能正常的淋巴细胞在体外混合培养时,由于HLAⅡ类抗原不同,可相互刺激对方的T细胞发生增殖,此外双向混合淋巴细胞培养(two way MLC);若将其中一方的淋巴细胞先用丝裂酶C处理或射线照射使之细胞中DNA失去复制能力,但仍能刺激另一方淋巴细胞发生转化,称为单向混

T淋巴细胞转化实验的基本原理

T淋巴细胞转化实验的基本原理T细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化.淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一.淋巴细胞转化试验有形态计数法、MTT 法

常用抗体的应用范围及选用(三)

(三)肌组织及其相关肿瘤的常用抗体1.肌间线蛋白(Desmin,DM)在横纹肌的微细结构中,有明暗带之分,在明暗带的中央有一薄膜称为工膜。在心肌纤维结构中,也有相似的工膜。这些结构的主要成份就是由肌间线蛋白构成的。此外,在心肌的闰盘,平滑肌中,也含有肌间线蛋白。Desmin为一种中间丝蛋白,正常时可

T 淋巴细胞转化试验

实验概要本文介绍了T 淋巴细胞转化试验(T Lymphocyte Transformation Test)的基本原理和操作步骤。实验原理T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。淋巴细胞转化率的高低

3H胸腺嘧啶核苷掺入检查法

实验概要3H胸腺嘧啶核苷(3Hthymidine,3HTdR)掺入试验,是体外淋巴细胞转化试验较客观、重复性好、结果准确的方法之一。实验原理当淋巴细胞受分裂原(PHA等)或特异性抗原刺激发生转化时,必然伴有DNA的大量合成,若将具有放射性的3HTdR加到培养液内,则可被作为合成DNA的原料而摄入转化

丝瓜提取物对衰老小鼠学习记忆力、脑组织形态...(二)

1.5.5   ELISA法检测 血清中细胞因子ILK , IFN、的浓度 取全血标本离心20分钟,取上清液进行检测,严格按eBioscienc;e公司提供的EI1SA试剂盒中的检测方法测定血清中细胞因子IL 2 , IFN-r的浓度。用酶标仪在450nm波长依序测量

混合淋巴细胞培养实验

混合淋巴细胞培养(MLC)或称混合淋巴细胞反应(MLR)以往为用于器官移植前的组织配型,以测定受体和供体主要组织相容性抗原(HLA抗原)相容的程度。由于MLC中淋巴细胞接受同种异型抗原的刺激而发生活化、增殖,产生种类众多的细胞因子,促进NK、LAK和CTL等杀伤细胞的分化,因此MLC又是免疫调节研究

淋巴细胞增殖实验

淋巴细胞增殖法对于(1)免疫学的研究(2)淋巴细胞的T细胞,吞噬细胞等的功能研究。实验方法原理淋巴细胞在体外经某种物质刺激,细胞代谢和形态相继变化,在24——48h细胞内蛋白质和核酸的合成增加,产生一系列增殖的变化,如细胞变化、细胞浆扩大、出现空泡、核仁明显、核染色质疏松等,由淋巴细胞转变为淋巴母细

人类染色体核型分析实验原理及操作步骤

实验原理核型(karyotype)一词在20世纪20年代首先由苏联学者T. A. Levzky等人提出。核型分析的发展有三项技术起了很重要的促进作用,一是1952年美籍华人细胞学家徐道觉发现的低渗处理技术,使中期细胞的染色体分散良好,便于观察;二是秋水仙素的应用便于富集中期细胞分裂相;三是植

EB病毒转化成淋巴细胞实验

实验概要本实验介绍了EB病毒转化为淋巴细胞的方法。实验材料1. 感染性EB病毒通常取自绢猴细胞系B95-8的限制培养基。该细胞系源于EB病毒感染的绢猴外周淋巴细胞,产生高滴度感染病毒。2. 全血实验步骤1. 混合10ml全血和10ml RPMI 1640 生长培养基生长培养基 RPMI 1640 8

微核实验在染色体水平检测DNA损伤实验(一)

实验步骤一、材料1. 胞质分裂阻滞微核试验2. 微核的着丝点检测(1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。(2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。(3) 过氧化物酶标记的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基联苯溶液(D A B ): I m g /m L 溶于

混合淋巴细胞培养

混合淋巴细胞培养 混合淋巴细胞培养(Mixed Lymphocyte Cultivate,MLC)或称混合淋巴细胞反应(Mixed Lymphocyte Reaction,MLR)常用于器官移植前的组织配型,以测定受体和供体主要组织相容性抗原(HLA抗原)相容的程度。由于MLC中淋巴细胞接

微核实验在染色体水平检测DN A损伤实验

实验步骤 一、材料 1. 胞质分裂阻滞微核试验 2. 微核的着丝点检测 (1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。 (2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。 (3) 过氧化物酶

丝瓜提取物对衰老小鼠学习记忆力、脑组织形态...(一)

丝瓜提取物对衰老小鼠学习记忆力、脑组织形态学及免疫功的影响目的:观察丝瓜提取物对衰老小鼠学习记忆能力、脑组织形态学及免疫功能的影响。方法:经筛选的昆明种小鼠随机分为对照组、衰老组、ALL瓜提取物187.5 mg/kg,375 mg/kg,750 mg/kg3个剂量组。除对照组以外,均在颈背部

如何选择BTX转基因仪(电转仪)?(一)

1、确定目标对象:也就是你所有转的目的物是什么东西?     细胞系和细胞类型     细胞类型包括人类、哺乳动物、细菌、植物、藻类、霉菌、寄生虫等     细胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyce

微核实验在染色体水平检测DN A损伤实验(二)

2 用阿糖胞苷微核实验检测人淋巴细胞 (V G 1 期 DNA 剪切修复损伤的方法在对暴露于各种遗传毒物的人 G 。期淋巴细胞的 M N 进行检测后发现,对于主要引起碱基损伤和 DNA 加合物而不是 DNA 链断裂或者纺锤体损伤的化学物质和紫外辐射而言, MN 的形成与细胞毒性相比明显程度较

大鼠的饲养与管理

  大鼠(Rat),啮齿目、鼠科、大鼠属,属野生褐色大鼠(Rattus norvegicus) 的变种。原产于亚洲中部及原苏联部分的温暖地区。十八世纪后期开始人工饲养,十九世纪中叶首次用于心理学的研究。1906年这个鼠群中的一部分被送到费城(Philadelphia)的Wistar研究所,

IL-1生物学活性检测

实验方法原理 IL-1与小鼠胸腺细胞共同培养时,IL-1可刺激小鼠胸腺细胞增殖。进一步通过3H-TdR掺入法或染料摄入法判定小鼠胸腺细胞增殖量,推定IL-1的生物学活性。通过检测IL-1的生物学活性,可了解单核-巨噬细胞等的功能。实验材料 小鼠胸腺细胞试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液L

IL-1生物学活性检测实验——小鼠胸腺细胞增殖法

白细胞介素-1(IL-1)主要是由活化的单核-巨噬细胞合成和分泌的一种细胞因子,具有活化淋巴细胞、协同刺激胸腺细胞增殖、参与抗体产生和促炎症反应等多种生物学功能。IL-1有IL-1α和IL-1β构成,结合同种受体,表现相同的生物学活性。实验方法原理IL-1与小鼠胸腺细胞共同培养时,IL-1可刺激小鼠

人类染色体核型分析

实验概要学习和掌握人类染色体核型分析的方法,进一步识别和鉴定人类染色体。实验原理核型(karyotype)一词在20世纪20年代首先由苏联学者T. A. Levzky等人提出。核型分析的发展有三项技术起了很重要的促进作用,一是1952年美籍华人细胞学家徐道觉发现的低渗处理技术,使中期细胞的染

T淋巴细胞转化实验

实验方法原理T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一。 淋巴细胞转化试验有形态计数法、MTT 法和同位

T淋巴细胞转化实验

            实验方法原理 T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。淋巴细胞转化率的高低可以

T淋巴细胞转化实验

            实验方法原理 T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。淋巴细胞转化率的高低可以