miRNAqPCRDetectionPrimerSet(miRNA检测试剂盒)实验说明

一、概述 1、介绍 microRNA(miRNA)是一类有大约22 个核苷酸组成的非编码小分子RNA,其广泛存在于真核生物中。miRNA 在个体发育的不同时期及不同组织中有不同的表达模式,都表明了其在发育和分化中起有重大的调控作用。迄今为此,对miRNA 的检测方法主要有Northern Blot 等基于分子杂交的方法,这些方法敏感度低、耗时长、RNA 的用量较大。miRNA Q-PCR etection Kit采用了国际上公认的核酸检测标准技术――Real-Time PCR 技术来对miRNA 进行检测,其具有快速、特异性强、灵敏度高等优点。 2、实验原理 EzOmicsTM miRNA qPCR Detection Primer Set包含了miRNA特异的逆转录引物,以及qPCR正、反向引物套装。其中茎凸环结构状的miRNA特异逆转录引物可特异性的转录成熟的miRNA。再利用高度特异的正反向引物......阅读全文

miRNA-qPCR-Detection-Primer-Set(miRNA检测试剂盒)实验说明

  一、概述   1、介绍   microRNA(miRNA)是一类有大约22 个核苷酸组成的非编码小分子RNA,其广泛存在于真核生物中。miRNA 在个体发育的不同时期及不同组织中有不同的表达模式,都表明了其在发育和分化中起有重大的调控作用。迄今为此,对miRNA 的检测方法主要有Northe

miRNA-qPCR-Detection-Primer-Set(miRNA检测试剂盒)实验说明

一、概述1、介绍microRNA(miRNA)是一类有大约22 个核苷酸组成的非编码小分子RNA,其广泛存在于真核生物中。miRNA 在个体发育的不同时期及不同组织中有不同的表达模式,都表明了其在发育和分化中起有重大的调控作用。迄今为此,对miRNA 的检测方法主要有Northern B

miRNA的qPCR检测

测序技术的引入促使miRNA研究领域进入快速发展阶段,然而qPCR仍是验证测序数据的重要标准。本文将为您介绍使用qPCR进行miRNA分析的基本要点,希望能帮助新人快速入门。什么是miRNA?miRNA是一类小的非编码RNA,能够与RNA诱导沉默复合物(RISC)结合,通过作用于mRNA,进而介导转

miRNA--克隆实验

实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达,还有一部分则起着调控基因表达的作用。实验材料 寡核

miRNA克隆实验

            实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因

miRNA克隆实验

在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达,还有一部分则起着调控基因表达的作用。本实验来源「RNA 实验指导手册」主

miRNA-mimics-miRNA-inhibitor

miRNA mimics 是模拟生物体 内源的miRNAs,运用化学合成的方法合成,能增强内源性miRNA的功能。miRNA inhibitor 是化学修饰的专门针对细胞中特异的靶miRNA的抑制剂。近年来人工合成的miRNA(artificial miRNA,amiRNA)已经成功应用于沉默预期靶

miRNA海绵—长效抑制miRNA

随着研究的深入,已知miRNA的数量与日俱增,目前Sanger miRBase数据库中收录的人miRNA已达721条。不过,大部分miRNA的功能仍是未知数。在基因功能研究中,最有效的方法是阻止特定基因的功能,然后了解其后果。miRNA同样如此。然而,相比之下,miRNA的功能研究要困难得多。为什么

miRNA海绵—长效抑制miRNA

miRNA海绵随着研究的深入,已知miRNA的数量与日俱增,目前Sanger miRBase数据库中收录的人miRNA已达721条。不过,大部分miRNA的功能仍是未知数。在基因功能研究中,最有效的方法是阻止特定基因的功能,然后了解其后果。miRNA同样如此。然而,相比之下,miRNA的功能研究要困

植物miRNA及piRNA的逆转录

miRNA在植物的发育、抗病、和应激反应中发挥着重要作用。一般认为,这些小的非编码RNA通过靶向mRNA剪切,在后转录水平调节植物的基因表达。这些基因表达中的靶向变化由数百个成熟miRNA的差异表达所调控,每个成熟miRNA结合在靶mRNA的特定序列上。因此,对植物的成熟miRNA调控和表达进行分析

miRNA研究

一、miRNA研究的基本问题和研究方法二、miRNA研究的综合解决方案1. miRNA微阵列芯片服务Agilent miRNA 芯片(21.0) Affymetrix miRNA 4.0 芯片2. miRNA测序服务  miRNA-seq文库构建流程  miRNA测序数据分析流程3. miRNA R

GEN:miRNA检测行业热度不减

  MicroRNAs (miRNAs)是一种存在于真核生物的内源性非编码小RNA,具有抑制靶向mRNA转录、翻译或者剪切靶向mRNA并促使其降解的功能。它会组装进入沉默复合体(RISC),识别并与靶向mRNA互补配对,从而降解或者阻止mRNA翻译。  miRNAs负责调控多种生理过程,包括细胞周期

疾病检测新指标miRNA(一)

microRNA(miRNA)是真核生物中广泛存在的一种由 non-coding 区域转录的小片段 RNA,长度仅有 19~25 个核苷酸。根据 miRBase 数据库,在所有物种发现的 miRNAs,至今已超过 2 万个。miRNA 透过与标的 mRNA 的特异性结合,经由 post-tr

疾病检测新指标miRNA(二)

杨医师等人在另一个研究中,分析小鼠在遭受革兰氏阳性菌感染后,血液中miRNA表达谱的变化(Hsieh CH et al., 2013)。枯草杆菌(Bacillus_subtilis)、粪链球菌(Streptococcus faecalis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus au

qpcr原理及流程

一、QPCR原理“qpcr原理是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法;应用于对PCR进程进行实时检测。检测方法:加尾法和颈环法miRNA很短,用mRNA的反转录方法无法得到足以定量的cDNA。所以,miRNA的反转要求将miRNA序列进行延长,目前

Nature发布miRNA重要发现:脂肪细胞的miRNA信号

  脂肪细胞并不简单,Joslin糖尿病中心的科学家发现这种细胞并不只是静静的待在我们身体中,而且能释放出激素和其它信号蛋白,影响多种组织,其中一种竟然是miRNA。利用脂肪细胞研发基因治疗方法,也许能用于治疗肝脏或其它器官的代谢疾病,还有癌症等。  这一研究成果公布在2月15日的Nature杂志上

检测血液中miRNA的简便技术

  癌变肿瘤会脱落一些微小的指示遗传分子,称为microRNAs。最近,密歇根大学的研究人员开发出一种有效的方法,能在血液中检测到它们。相关研究结果发表在六月二十二日的《Nature Biotechnology》。  研究人员称,他们这种方法可通过一种廉价的血液测试,同时对多种类型的癌症进行筛选——

mirna-pcr电泳多久

一般是根据PCR产物大小和所用电压来决定时间的吧一般溴酚蓝跑到胶的1/3处就可以了。电压大,就时间短,第一次跑,还是在边上观察着点吧,分子小,时间不长的。

MicroRNA(miRNA)的概念

MicroRNA(miRNA):是含有茎环结构的miRNA前体,经过Dicer加工之后的一类非编码的小RNA分子(~21-23个核苷酸)。MiRNA,以及miRISCs(RNA-蛋白质复合物)在动物和植物中广泛表达。因之具有破坏目标特异性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能,miRNA被认为在调控发

如何设计miRNA-mimics

miRNA mimic能模拟细胞中内源性成熟miRNA的高水平表达,以增强内源性miRNA的调控作用,是miRNA功能研究的一大利器。miRNA mimic是一种简单高效的miRNA研究工具,只需用转染试剂包裹即可转染进入细胞,无需构建载体的繁琐操作,无需病毒防护方面的担忧,用转染对照即可观察其转染

从体液中高效提取microRNA

  谈到microRNA(miRNA)的提取,大部分试剂盒都是针对哺乳动物细胞和组织,血液的也有,但针对体液的产品,至今好像仍是空白。为此,丹麦 Exiqon公司近日推出了miRCURY™ RNA Isolation Kit C Biofluids,能够从血清、血浆、尿液及其他体液中提取小分

TRIzol影响实验结果?miRNA文章被撤回

  韩国首尔大学的科学家Narry Kim(金娜蕊)及其研究小组近日撤回了一篇关于microRNA(miRNA)衰减的文章,因为她们发现,所用的TRIzol试剂会对富含GC的miRNA或具二级结构的miRNA产生不同影响。   这篇文章去年发表于《Molecular Cell》杂志上。研究

miRNA检测的三种方法

MicroRNA (miRNA)是一种机体内源性表达的单链小分子RNA,位于基因组非编码区,本身不具有开放阅读框(open reading frame,ORF),具有高度保守性,时序性和组织特异性。miRNA广泛存在于各种真核细胞中,不编码任何蛋白质,长度仅为20~24nt。成熟的miRNA 5′端

miRNA检测的三种方法

MicroRNA  (miRNA)是一种机体内源性表达的单链小分子RNA,位于基因组非编码区,本身不具有开放阅读框(open reading frame,ORF),具有高度保守性,时序性和组织特异性。miRNA广泛存在于各种真核细胞中,不编码任何蛋白质,长度仅为20~24nt。成熟的miRN

从小鼠和人中克隆miRNA实验方法

Supplementary information to miRNAs cloned from mouse and humanAn online clearinghouse for miRNA gene name assignments (http://www.sanger.ac.uk/Softwa

Isolation-of-microRNA-(miRNA)

实验概要        This protocol utilizes the powerful guanidine isothiocyanate–phenol:chloroform extraction method which allows the rapid isolation of t

micro-RNA(miRNA)综述3

未来要解决的问题miRNAs在多个物种中广泛被发现,而且在进化上高度保守。这些“小玩意儿”留给我们一大堆谜团:miRNA的确切功能是什么?它的目标靶是什么?作用机制是什么?也许需要对植物或者线虫的基因组进行miRNAs突变株的筛选,在果蝇中可以用targeted- disruption缺失miR

micro-RNA(miRNA)综述2

miRNA的作用方式最早被发现的两个miRNAs――lin-4 and let-7被认为是通过不完全互补结合到目标靶mRNA3'非编码区端,以一种未知方式诱发蛋白质翻译抑制,进而抑制蛋白质合成,阻断mRNA的翻译。多个果蝇miRNAs也被发现和他们的目标靶mRNAs的3'非编码区

miRNA研究之RNA标记

RNA标记RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求:1.  操作简单,灵敏度高2.  不影响碱基配对的特异性3.  不影响R

micro-RNA(miRNA)综述1

RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的“过渡”,但越来越多的证据清楚的表明,RNA在生命的进程中扮演的角色远比RNA我们早前设想的更为重要。RNA干扰(RNA interference)的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识,更因为可以简化替代基因敲除而成为研究基因功能的