McAb(单克隆抗体)亲和层析柱纯化

重组人α干扰素作为一种具有广谱抗病毒、抑制肿瘤细胞生长及免疫调节作用的细胞因子新型药物,已在国内外广泛投入临床应用,并取得了显著的疗效。国际上对用于临床的重组干扰素的纯度要求很高,美国NIH规定必须在90%以上,因此生产者普遍采用亲和层析纯化法。我们研制了rHuIFN-α2a的 McAb 3F1,与CNBr活化的Sepharose 4B交联制成亲和层析柱,经1年60余次较大规模试用表明具有较理想的亲和层析纯化rHuIFN-α2a的性能,达到了国内外同类McAb的水平。由于 McAb 3F1也能和rHuIFN-α2b结合,故极有可能亦适用于rHuIFN-α2b的亲和层析纯化。 一、性能指标 1.McAb的特性:IgG1,间接ELISA效价10-7,对rHuIFN-α2a具中和活性。 2.洗脱的rHuIFN-α2a纯度:>90%。 3.洗脱的rHuIFN-α2a比活性:≥1×......阅读全文

McAb(单克隆抗体)亲和层析柱纯化

重组人α干扰素作为一种具有广谱抗病毒、抑制肿瘤细胞生长及免疫调节作用的细胞因子新型药物,已在国内外广泛投入临床应用,并取得了显著的疗效。国际上对用于临床的重组干扰素的纯度要求很高,美国NIH规定必须在90%以上,因此生产者普遍采用亲和层析纯化法。我们研制了rHuIFN-α2a的 McAb 3F1

单克隆抗体(McAb)亲和层析柱纯化

重组人α干扰素作为一种具有广谱抗病毒、抑制肿瘤细胞生长及免疫调节作用的细胞因子新型药物,已在国内外广泛投入临床应用,并取得了显著的疗效。国际上对用于临床的重组干扰素的纯度要求很高,美国NIH规定必须在90%以上,因此生产者普遍采用亲和层析纯化法。我们研制了rHuIFN-α2a的McAb 3F1,

一文了解亲和层析柱装柱注意事项

  亲和层析 一般用于纯化蛋白质和核酸等大分子物质的方法的主要依据是各种大分子物质之间理化特性的差异性。下面我们来分析一下亲和层析过程中的注意事项。  1.上样  亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短,通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件,包括上样流速、缓冲液种类、

层析柱的介绍

  层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。

层析柱的介绍

层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。

层析柱的规格

  层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形

层析柱的简介

  层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。

层析柱高径比对层析柱分离效果有什么影响

层析柱高径比是指层析柱的高度与内径之比。层析柱高径比对层析柱分离效果有着重要的影响,一般来说,高径比越大,分离效果越好。高径比的提高可以带来以下几个方面的优势:提高分离效率:高径比的提高可以增加层析柱的理论板数,提高分离效率。提高分离精度:高径比的提高可以减少色谱柱床颗粒的翻滚、流动等运动,从而减小

层析柱如何来选择

层析柱的质量关键要考虑以下几点:两端的4F塞是否密封质量好,中间的玻璃管的透明度以及耐压度,是否有相应的转换接头来控制进料高度,

层析柱如何来选择

层析柱的质量关键要考虑以下几点:两端的4F塞是否密封质量好,中间的玻璃管的透明度以及耐压度,是否有相应的转换接头来控制进料高度,我们研究所用的是同兴玻璃的。

层析柱柱体积如何计算

柱体积就是根据层析柱内径和长度求出,你内径有了,长度应该是13cm,这样就好算了。给你一个估计的方法:柱体积=填充物质量(g)×2

层析柱的操作方法

  以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例:  1.吸附剂的处理及柱子装填  将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中,于105。C活化2H后,取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按丙酮一石油醚(5:95)比例泵入溶剂,至溶剂流出止。  2.上样 

层析柱柱体积如何计算

柱体积就是根据层析柱内径和长度求出,你内径有了,长度应该是13cm,这样就好算了。给你一个估计的方法:柱体积=填充物质量(g)×2

层析柱原理和使用方法

柱层析技术(Columnchromatography)又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相

层析柱原理和使用方法

柱层析技术又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中

生物素亲合素系统的生物素与亲和层析介绍

  亲和层析是将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液, 改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来。  生

黄曲霉毒素M1柱CH09003

  华安麦科生物技术有限公司是国内首家将免疫亲和层析柱(IAC)系列产品化的公司   一、用途:    免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素M1,从而对黄曲霉毒素M1样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行黄曲霉毒素M1含量的检测。亲和层析柱与HPLC配合使用

黄曲霉毒素M1柱CH09003

  华安麦科生物技术有限公司是国内首家将免疫亲和层析柱(IAC)系列产品化的公司   一、用途:    免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素M1,从而对黄曲霉毒素M1样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行黄曲霉毒素M1含量的检测。亲和层析柱与HPLC配合使用

T2毒素免疫层析亲和柱说明

1、 用途:免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的T2毒素,从而对T2毒素样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行T2毒素含量的检测。亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。2、 概述:T2毒素(T2)是由多种镰刀菌产生的一种霉

T2毒素免疫层析亲和柱

  1、 用途:   免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的T2毒素,从而对T2毒素样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行T2毒素含量的检测。   亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。   2、 概述:   T2毒

亲和层析常见亲和对及支持物介绍

在一对有专一的相互作用的物质中,把其中之一联结在支持物上,用于纯化相对的另一物质。常见的亲和对如:酶和抑制剂,抗原和抗体,激素和受体等。支持物为琼脂糖或纤维素等。

层析柱与液相柱的区别

  1、压力  液相色谱柱(尤其是分析性高效液相色谱):压力较高,一般为10-20Mpa  层析柱:一般为常压,或使用真空泵(0.1Mpa左右)  2、填料  液相色谱柱:粒径较小(常规5-20um)  层析柱:粒径较大  3、分离度  由第二项决定,粒径越小,单位长度下理论塔板数越高  液相色谱柱

实验室检验检测设备层析柱

层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大

构建cDNA文库的层析柱cDNA分级

  这一步稍不注意会影响成功性或影响获得的cDNA的片段分布特点。这一步的操作要小心,尤其要在加入cDNA之前通过反复悬浮和试滴保证柱子能正常工作,cDNA的加入和收集要精力集中。获得的每一级的cDNA量很少,检测时带型很暗,所以要用新鲜做的透明薄胶检测,根据检测结果一定要舍弃太短的cDNA(一般4

层析柱的规格及操作方法

  规格  层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高

亲和层析技术简介

  将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液,改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来,这种分离纯化蛋白质

黄曲霉毒素M1柱CH09003说明书

一、用途: 免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素M1,从而对黄曲霉毒素M1样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行黄曲霉毒素M1含量的检测。亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。二、概述: 黄曲霉毒素是一类真菌(如

黄曲霉毒素B1柱说明

[用途]: 免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素B1, 从而对黄曲霉毒素B1样品起到非常针对性的纯化作用, 过柱净化后的样品液可直接用于液相进行黄曲霉毒素B1含量的检测。 亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的, 以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。[概述]: 黄曲霉毒素是一类

亲和标记的意义

亲和标记(affinity labeling):指对酶的活性部位、受体的结合位点进行特异标记的方法。试剂A-X的A基团和X基团可分别与不同的位点进行结合,从而将两种物质交联在一起。

亲和色谱法

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。中文名:亲和色谱法外文名:affinity chromatography所属学科:生物应用领域:实验例如利用酶与基质(或抑制剂)