原代细胞甲基绿哌咯宁法显示DNA和RNA

基本原理:甲基绿(methyl green)和哌咯宁(pyronin)均为碱性染料,因此可与带负电荷的磷酸根形成盐。甲基绿分子有2个正电荷,易与双链DNA分子结合使原代细胞核内的DNA呈蓝绿色。哌咯宁分子有一个正电荷,易与单链RNA分子结合使原代细胞质和核仁内的RNA显示红色。也有人认为染色原理与核酸分子的空间构型有关。配制试剂:1. 0.2mol/L pH4.8的乙酸缓冲液的配制将1.2ml冰乙酸加蒸馏水定容至100ml,在使用时再加2.72g乙酸钠(NaAc·3H2O),待完全溶解后,即可使用;2. 甲基绿-哌咯宁染色液配制A液:取2g甲基绿加入100ml pH4.8的0.2mol/L的乙酸缓冲液中即可;B液:取1g哌咯宁加入100ml pH4.8的0.2mol/L的乙酸缓冲液中即可;用时将A、B液按5:2混合即可;染色步骤:1. 取培养于盖玻片上的贴壁原代细胞,用Hanks液漂洗三次;2. 70%乙醇溶液固定10min......阅读全文

原代细胞甲基绿哌咯宁法显示DNA和RNA

基本原理:甲基绿(methyl green)和哌咯宁(pyronin)均为碱性染料,因此可与带负电荷的磷酸根形成盐。甲基绿分子有2个正电荷,易与双链DNA分子结合使原代细胞核内的DNA呈蓝绿色。哌咯宁分子有一个正电荷,易与单链RNA分子结合使原代细胞质和核仁内的RNA显示红色。也有人认为染色原理

原代细胞甲基绿哌咯宁法显示DNA和RNA

基本原理:甲基绿(methyl green)和哌咯宁(pyronin)均为碱性染料,因此可与带负电荷的磷酸根形成盐。甲基绿分子有2个正电荷,易与双链DNA分子结合使原代细胞核内的DNA呈蓝绿色。哌咯宁分子有一个正电荷,易与单链RNA分子结合使原代细胞质和核仁内的RNA显示红色。也有人认为染色原理

细胞组分的化学反应实验

Brachet反应细胞内碱性蛋白和酸性蛋白的显示细胞内过氧化物酶的显示过碘酸雪夫反应(PAS)实验方法原理细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后,其中的DNA和RNA出现不同的呈色反应,一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力,且这两种染料的作用有选择性,甲基绿染高聚分子的DNA

细胞组分的化学反应实验

实验方法原理 细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后,其中的DNA和RNA出现不同的呈色反应,一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力,且这两种染料的作用有选择性,甲基绿染高聚分子的DNA呈蓝绿色,呱咯宁染低聚分子的RNA呈红色。由此对细胞中的DNA和RNA进行定位、定性、和定量

细胞组分的化学反应实验——Brachet反应

实验方法原理细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后,其中的DNA和RNA出现不同的呈色反应,一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力,且这两种染料的作用有选择性,甲基绿染高聚分子的DNA呈蓝绿色,呱咯宁染低聚分子的RNA呈红色。由此对细胞中的DNA和RNA进行定位、定性、和定量分

细胞化学染色方法

实验原理1. 细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后,其中的 DNA 和 RNA 出现不同的呈色反应,一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力,且这两种染料的作用有选择性,甲基绿染高聚分子的 DNA 呈蓝绿色,呱咯宁染低聚分子的 RNA 呈红色。由此对细胞中的 DNA

细胞化学染色方法

实验原理1. 细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后,其中的 DNA 和 RNA 出现不同的呈色反应,一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力,且这两种染料的作用有选择性,甲基绿染高聚分子的 DNA 呈蓝绿色,呱咯宁染低聚分子的 RNA 呈红色。由此对细胞中的 DNA 和 RNA

甲基绿哌洛宁染色法的方法介绍

1899年Pappenheim 首创了甲基绿-哌洛宁(mehtyl-green-pyronim)染色法。1902年Unna对这一方法进行了改良。 1940年Brachet研究证明用甲基绿—哌洛宁对DNA和RNA有选择性的染色效果。碱性的甲基绿-哌洛宁混合染料处理细胞后,由于DNA、RNA对染料具有的

原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA

基本原理:显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应生成紫红色产物。原理同PAS反应,使细胞核DNA显紫红色

原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA

原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA 基本原理:显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应生成紫红

细胞组分的化学反应

细胞的组织化学方法,是研究细胞成分常用的方法之一。它是利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应,从而在细胞局部形成有色沉淀物,再通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。    一、Brachet反应一显示细胞内的DNA和RNA    (一)原理    细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处

DNA酶甲基绿琼脂(DTA)

成分  DNA          2.0g  植物蛋白胨       5.0g  胰蛋白胨        15.0g  氯化钠         5.0g  琼脂(1.5%)       15.0g  蒸馏水         1000mL  pH7.3        制法       称取各成分后,加

光学显微镜的使用与细胞化学成分的分析

实验内容 一、显微镜的结构及使用方法 •1、光学显微镜的主要构造机械部分 照明部分 光学部分 •2、光学显微镜的使用方法 对光 → 置片 → 低倍 → 高倍 → 复原 低倍镜使用 高倍镜使用 •3、使用光学显微镜的注意事项二、酸性蛋白和碱性蛋白的显示 1#、2#血涂片→凉干→70%乙醇中固定5分钟→

原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法

基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观

原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法

基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观

dna甲基化与rna甲基化的区别

DNA甲基化和组蛋白修饰的相同点:都有包含甲基化修饰;不同点:修饰对象不同,一个是对DNA修饰,一个是对蛋白:组蛋白修饰。而RNA干扰是对RNA的降解,与前两者差异较大。

DNA显示和细胞有丝分裂相的观察

核酸是生物最重要的组成成分,核酸分为两大类,即脱氧河塘核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。它们在细胞内的分布及化学性质均有所不同。DNA主要分布在核的染色质或有丝分裂过程中出现的染色体内。RNA分布在细胞质和核仁内。但在染色质及染色体中也含有少量的RNA,核仁中也有少量的DNA。在线粒体,叶绿体等细

TRIzol法提取组织和细胞总RNA

(一)试剂准备1 . TRIzol 试剂。2 .氯仿3 .异丙醇4 . 75% 乙醇( DEPC H2O 配制)5 . DEPC H2O (二)操作步骤 1 . 样品处理: (1)培养细胞:收获细胞 1-5×10 7 ,移入 1.5ml 离心管中,加入 1ml Trizol ,混匀,室温

甲基绿安全处理措施

1、作业人员防护措施、防护装备和应急处置程序:2、建议应急处理人员戴携气式呼吸器,穿防静电服,戴橡胶耐油手套。3、禁止接触或跨越泄漏物。4、作业时使用的所有设备应接地。5、尽可能切断泄漏源。6、消除所有点火源。7、根据液体流动、蒸汽或粉尘扩散的影响区域划定警戒区,无关人员从侧风、上风向撤离至安全区。

甲基绿的结构功能

甲基绿(methyl green)以两种形式存在。Ⅰ式:分子式C26H33Cl2N3。分子量458.49。绿色结晶,带金黄色光泽或淡绿色粉末。能溶于水,微溶于乙醇,不溶于醚。通常为氯化锌的复盐。Ⅱ式:分子式C27H35BrClN3。分子量516.98。绿色粉末,能溶于水呈绿蓝色。在pH0.2时溶液呈

甲基绿的应用介绍

用于染印织物及生物体染色 。商品通常为锌复盐C26H33N3Cl2·ZnCl2(称C.I.碱性蓝20)。用于细菌染色(新鲜标本细胞核染色)甲基绿-盐酸混合物用于鉴定精子、淋球菌和肥大细胞染色。甲基绿可用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。

甲基绿的制备方法

由溴乙烷和紫罗兰反应得到。

慢性多潜能性免疫增生综合征的病因及发病机制

  病因  慢性多潜能性免疫增生综合征病因未明,有人认为本病与病毒感染有关,部分病人淋巴结中查出EB病毒的DNA(PCR法)。还有人认为由于感染了人工细胞淋巴瘤病毒的亚型,使机体免疫功能异常而导致本病,因病人淋巴结活检与艾滋病组织学表现相似。  发病机制  慢性多潜能性免疫增生综合征发病机制还不清楚

DNA和RNA提取原理

TRIzol试剂有多组分分离作用,与其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、盐酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特点是可同时分离一个样品的RNA\DNA\蛋白质.TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA的完整性。在加入氯仿离心后,溶液分为水相和有机相,R

RNA-和-DNA-提取:洗脱

DNA 提取方案的还剩余IDE步骤步就是从硅胶中释放纯 DNA 或 RNA。对于 DNA 制备,通常使用 pH 值为 8-9 的 10 mM Tris。DNA 在弱碱性 pH 值下更稳定,在缓冲液中溶解得更快。即使对于 DNA 颗粒也是如此。水的 pH 值往往较低,低至 4-5,并且高分子量 DNA

植物组织和细胞显微化学染色_检测植物细胞中核酸方法

实验步骤(1)脱氧核糖核酸:孚尔根染色法是检定细胞中 DNA 的一种常用方法,主要染色液为希夫试剂。切片材料加入蒸馏水后,在盐酸 (1 mol/L) 中 60℃下保温 5-15 min, 转入室温的盐酸中1min, 蒸馏水清洗,希夫试剂染色 1-5 h, 漂洗液中漂洗 3 次,每次 2-10min,

核酸的染色介绍

核酸染色法一般可将凝胶先用三氯乙酸、甲酸—乙酸混合液、氯化高汞、乙酸、乙酸镧等固定,或者将有关染料与上述溶液配在一起,同时固定与染色。有的染色液同时染DNA及RNA,如stains-all、溴乙锭、掊花青-铬矾法等,也有RNA、DNA各自特殊的染色法。1.RNA染色法(1)荧光染料溴乙锭(ethid

细胞化学词汇DNA甲基化

中文名称:DNA甲基化外文名称:DNA methylation影    响:控制基因表达甲基酶分类:DNM T1、DNM T3a、DNM T3b作    用:修饰DNA序列

肿瘤细胞原代培养实验——脱落细胞法

实验方法原理脱落细胞法是指采集人体各部位,特别是管腔器官表面的脱落细胞进行培养。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒完全培养基洗涤液仪器、耗材刀片培养箱培养皿实验步骤一、将新鲜的肿瘤组织去除脂肪和结缔组织。二、洗液洗2次后,用刀片将肿瘤组织切成细薄片。三、在切割的同时有许多上皮细胞脱落下来,脱落细胞经洗涤后

甲基绿中毒的急救措施

急救1、吸 入:如果吸入,请将患者移到新鲜空气处。2、皮肤接触:脱去污染的衣着,用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。如有不适感,就医。3、眼晴接触:分开眼睑,用流动清水或生理盐水冲洗。立即就医。4、食 入:漱口,禁止催吐。立即就医。对保护施救者的忠告1、将患者转移到安全的场所。2、咨询医生。3、出示此化学品