Antpedia LOGO WIKI资讯

各种类型的基因编辑鼠如何建系?

《鼠年说鼠》系列文章,每周二更新,专门解答大小鼠铲屎官们在养鼠过程中经常遇到的繁育与鉴定类的问题,同时向大家征集问题,任何基因编辑鼠饲养繁殖或鉴定的困惑统统可以丢给小赛,小赛会给您回复或统一在后面的内容为大家做出详细的解答。今天我们就开始第九期的内容吧~ 完全性基因敲除、基因敲入(点突变)鼠如何建系? 区别:1. 转基因转基因项目具有插入位点及拷贝数不确定的特点,获得的F0代鼠可能各不相同,F0代不能相互交配。需要将F0与野生型多传几代,待基因型稳定后通过其他实验手段筛选出优先传代的品系继续繁殖。 2. CRISPR/Cas9技术构建的完全性基因敲除、基因敲入(点突变)鼠CRISPR/Cas9技术构建的F0代阳性鼠由于切割效率和非同源修复可能会出现不同的line,需要与野生型鼠交配获得稳定基因型的F1代阳性鼠。不同line的后代同样不建议相互交配。 条件性敲除(敲入)鼠如何建系......阅读全文

各种类型的基因编辑鼠如何建系?

《鼠年说鼠》系列文章,每周二更新,专门解答大小鼠铲屎官们在养鼠过程中经常遇到的繁育与鉴定类的问题,同时向大家征集问题,任何基因编辑鼠饲养繁殖或鉴定的困惑统统可以丢给小赛,小赛会给您回复或统一在后面的内容为大家做出详细的解答。今天我们就开始第九期的内容吧~  完全性基因敲除、基因敲入(点突变)鼠如何建

基因编辑鼠 sgRNA表达载体构建

继上次发表的Guide RNA设计和筛选的相关知识之后,希望大家还没有忘记相关的操作和技巧,今天,我们就来和大家聊聊后续的实验,在基因编辑鼠的过程中,sgRNA表达载体是如何构建的呢?在靶点筛选结束之后,下一步就要进行sgRNA载体构建。在构建表达载体前,应根据实验目的选取合适的表达质粒。比如进行实

如何掌握小鼠的繁育生理时间线科普

解答小鼠铲屎官们在养鼠过程中经常遇到的三大类问题: 1、繁殖生理类,比如大小鼠的生长发育时间点,如何辨别大小鼠的性别等 2、繁育类,比如不同类型的基因编辑鼠该如何建系,大小鼠脱毛、打架等问题该如何解决。 3、鉴定类,比如如何选择PCR反应体系,各种类型的基因编辑鼠该如何鉴定等,我们都将为你一一详细作

基因编辑鼠的构建 Guide RNA设计和筛选

众所周知,CRISPR/Cas9被业内誉为“基因剪刀”,它可以高效地实现靶基因的编辑,自问世以来就备受关注和青睐。CRISPR/Cas9系统是由CRISPR相关基因和Cas9组成,Cas9核酸酶会在向导RNA(Guide RNA, gRNA)的指引下,在完整基因组上的特定位点完成切割反应,同

mESCs建系

实验概要mESCs建系主要试剂细胞基础培养液、DPBS、0.25%Trypsin、0.1%明胶、兔抗鼠全血清原液、豚鼠补体、0.5%链蛋白酶、冲胚液、培养液A、mESCs培养液B主要设备35 mm、60 mm、100 mm培养皿、15 mL离心管、50 mL离心管、体视镜、注射器、镊子、虹膜剪实验材

基因编辑技术成功治疗实验鼠血友病

  日本一个研究小组近日报告说,他们利用基因编辑技术成功治疗了实验鼠的血友病。未来有望在此基础上开发出能根治血友病的疗法。  血友病是由于基因异常导致的出血性疾病,其特征是人体无法生成凝血因子或者凝血因子生成不足,导致凝血时间延长,出血难以止住。有的患者为了预防出血,从小就要每周注射1至3次凝血因子

miPS建系protocol

实验概要本实验方法介绍了miPS建系的详细操作流程。主要试剂所用试剂盒: 逆转录病毒体系试剂盒  MIPD0-000-001慢病毒体系试剂盒      MIPD-000-02规格:5次           组分名称货号规格数量逆转录病毒体系/慢病毒体系20ul/支5支助转因子10ul1支小鼠iPS细

如何看待基因编辑技术

基因编辑技术指能够让人类对目标基因进行“编辑”,实现对特定DNA片段的敲除、加入等。而CRISPR/Cas9技术自问世以来,就有着其它基因编辑技术无可比拟的优势,技术不断改进后,更被认为能够在活细胞中最有效、最便捷地“编辑”任何基因。

hESCs的分离及建系

实验概要hESCs的分离及建系主要试剂hESCs培养液、DPBS、0.25%Trypsin、1 mg/mL胶原酶Ⅳ、丝裂霉素C、0.1%明胶、囊胚培养液G2、胚胎冻存液、细胞基础培养液主要设备35 mm培养皿、4孔培养板、滤器、注射器针头;2 mL、5 mL、10 mL、15 mL、25 mL、50

原代细胞的培养与建系

  凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。细胞的纯化或细胞克隆技术是细胞培养工作的基础。  原代细胞的取材  人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件,直接影响细胞的体外培养。  一、取材的基本要求  1.取材要注意新鲜和保鲜  2.应严格无菌