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HLA分型的方法

①淋巴细胞毒试验:为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T淋巴细胞或外周血淋巴细胞;进行Ⅱ类抗原分型时需用B淋巴细胞。②混合淋巴细胞培养试验:多用于组织相容性方面的研究,临床上主要用于器官移植。③分子生物学技术:一类是PCR为基础的基因分型,一类是以测序为基础的基因分型。......阅读全文

PacBio RS II测序仪革新HLA检测分型技术[创新技巧]

  PacBio RS II测序系统一经推出,其长读长、单分子碱基分辨率及无GC偏好性的特征即受到广大研究者的推崇,尤其是在HLA检测分型领域,国际上权威HLA检测分型机构相继引进PacBio RS II测序技术进行相关服务或试剂盒的研发,推起了PacBio在HLA研究应用领域的高潮。   His

PacBio RS II测序仪革新HLA检测分型技术[创新技巧]

PacBio RS II测序系统一经推出,其长读长、单分子碱基分辨率及无GC偏好性的特征即受到广大研究者的推崇,尤其是在HLA检测分型领域,国际上权威HLA检测分型机构相继引进PacBio RS II测序技术进行相关服务或试剂盒的研发,推起了PacBio在HLA研究应用领域的高潮。His

HLA分型技术(一)

  HLA分型并不只是一种应用性的临床检测指标,免疫遗传学研究的发展,很大程度上依赖于以分型为主要手段的HLA多态性分析。60年代建立的并不断完善的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性;80年代起建立的DNA分型方法则侧重于基因的分型。  一、血清学分型技术  (一)HLA

HLA分型技术

HLA分型技术主要组织相容性复合物(MHC)是脊椎动物体内最复杂且具有高度多态性的基因群。1984年George Snell 首次发现小鼠MHC即H-2,1958年Dausset 发现了人的MHC即HLA基因。MHC的表达产物称为主要组织相容性抗原,MHC抗原是有核细胞表面膜蛋白分子,对抗原递呈和免

分子生物学分型法有哪些?

(一)RFLP与PCR-RFLP分型法 限制性片段长度多态性(RFLP)分析,称为DNA-RFLP。DNA片段进行体外扩增,然后再用限制性内切酶进行酶切分析,可使限制性长度分析的敏感度增加,此类方法称为PCR-RFLP分型法。PCR-RFLP分型法所应用的PCR引物为HLA组特异性的,此法

HLA分型技术(二)

  (二)PCR/SSO技术  此法乃用人工合成的HLA型别特异的寡核苷酸序列作为探针,与待检细胞经PCR扩增的HLA基因片段杂交,从而确定HLA型别,PCR技术可将HLA复合体上指定基因片段特异性地扩增5~6个数量级;而专门设计的SSO(序列特异的寡核苷酸sequencedpecific

生物芯片北京国家工程研究中心:十年磨砺 用“芯”创造

  2010年5月6日,中共中央总书记、国家主席胡锦涛陪同朝鲜劳动党总书记、国防委员会委员长金正日参观博奥生物有限公司。新华社供图  2008年12月27日,中共中央政治局常委、国务院总理温家宝来到北京中关村科技园区,看望广大科技工作者,就园区的创新发展问题进行专题调研。这

液相芯片技术的原理与应用进展

   液相芯片,也称为微球体悬浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible Multi Analyte Profiling)技术的新型生物芯片技术平台,它是在不同荧光编码的微球上进行抗原 抗体、酶 底物、配体 受体的结合

人类白细胞抗原检查

HLA是糖蛋白抗原,又称组织相容性抗原、移植抗原和组织抗原。HLA由一系列紧密连锁的基因编码,这些基因称为组织相容性复合物(MHC),也称为HLA基因,定位在第6号染色体短臂上,共有6个座位,至少含4个与移植有关的基因区:即HLA-A,HLA-B,HLA-C和HLA-D.HLA-D又分为HLA-DR

HLA抗原的检测(二)

  (四)HLA-DP抗原的检测  HLA-DP抗原的检测可采用预处理淋巴细胞分型试验(primed lymphocyte typing test,PLT)基本步骤是首先取有一个单倍体相同的两个个体的淋巴细胞进行混合培养,这在双亲与子女间很容易找到,如亲代a/b,子代a/c。先将a/c

组织相溶性抗原基因分型中三种DNA快速抽提法比较

血液DNA抽提的质量和速度是影响组织相溶性抗原(HLA)基因分型效果的一个主要因素,目前普遍采用的标准酚-氯仿抽提法,因耗时较长,难以满足临床需求。为此,我们建立了NP-40法及辛酸法,进一步缩短时间,简化了操作步骤。现将NP-40法、辛酸法与标准酚-氯仿抽提法对比研究结果报告如下。一、资料和方法本

细胞系错误鉴定:终结的开始

  2010年5月ATCC SDO(Standards Development Organization)工作组在Nature review cancer杂志上发表了题为《Cell line misidentification:the beginning of the end》前瞻性报道。以下是全文

液相芯片技术的原理与应用

液相芯片,也称为微球体悬浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible MultiAnalyte Profiling)技术的新型生物芯片技术平台,它是在不同荧光编码的微球上进行抗原抗体、酶底物、配体

人类白细胞抗原(HLA)检测及临床意义

人类白细胞上有3类抗原:红细胞血型抗原、白细胞特有抗原、与其他组织共有但也是最强的人类白细胞抗原(HLA)。  1.抗原:HLA是糖蛋白抗原,又称组织相容性抗原、移植抗原和组织抗原。HLA由一系列紧密连锁的基因编码,这些基因称为组织相容性复合物(MHC),也称为HLA基因,定位在第6号染色体短臂上,

HLA的分型方法

 HLA的分型方法是检验主管技师考试要求掌握的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。   1.淋巴细胞毒试验:为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ

细胞系错误鉴定:终结的开始(三)

交叉污染检测许多方法已被用来检测交叉污染,包括同工酶分析、核型分析、人类白细胞抗原(HLA)分型,免疫分型和DNA指纹识别。这些方法都可以鉴别出某一种细胞系,但是分辨能力各不一样。然而,这些方法在不同实验室所得到的数据却不尽相同,以致没有任何一种方法可以用来建立一个标准参考数据库。许多实验室利用ST

HLA配型与骨髓移植

一、  骨髓移植概述骨髓移植(bone marrow transplantation ,BMT)的实质是造血干细胞移植,干细胞具有能复制并分化为造血和免疫活性细胞的能力。根据干细胞的来源不同可分为自体、同基因(syngeneic)和异基因(allogeneic)BMT。同基因骨髓

HLA细胞法分型试验介绍

HLA细胞法分型试验介绍: HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原,其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养,也称混合淋巴细胞反应。 1.试验方法将分离的反应细胞(通常是患者的淋巴细胞)与刺激细胞(通常是供者或已知的标准淋巴细胞)配制成1×106/ml浓度的悬液,各加0.

HLA细胞法分型试验介绍

HLA细胞法分型试验介绍:HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原,其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养,也称混合淋巴细胞反应。1.试验方法将分离的反应细胞(通常是患者的淋巴细胞)与刺激细胞(通常是供者或已知的标准淋巴细胞)配制成1×106/ml浓度的悬液,各加0.2ml到反

HLA细胞法分型试验简介

HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原(lymphocytedefinedantigen),其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养(mixedlymphocyteculture,MLC),也称混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereaction,MLR)。

HLA细胞法分型试验简介

HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原(lymphocytedefinedantigen),其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养(mixedlymphocyteculture,MLC),也称混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereaction,MLR)。1.试验

HLA分型的常用方法有哪些?

1.分子生物学技术: 一类是PCR为基础的基因分型,一类是以测序为基础的基因分型。2.淋巴细胞毒试验: 为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T

HLA的分型方法淋巴细胞毒试验培养试验

1.淋巴细胞毒试验:为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T淋巴细胞或外周血淋巴细胞;进行Ⅱ类抗原分型时需用B淋巴细胞。 2.混合淋巴细

HLA-B27检测方法的分析与对比

王向东江苏南通良春中医医院随着网络及媒体的发展,强直性脊柱炎(AS)也越来越多地出现在我们的视野中。从一些著名的演艺明星,到一些普通的患者,都在经历着病痛的折磨。HLA-B27(人类白细胞抗原B27),是强直性脊柱炎(AS)实验室检查的重要指标,在强直性脊柱炎患者中阳性率高达90%。今天,我们从检验

HLA有哪些分型方法?

①淋巴细胞毒试验:为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T淋巴细胞或外周血淋巴细胞;进行Ⅱ类抗原分型时需用B淋巴细胞。②混合淋巴细胞培养试

PacBio测序有望掀起下一场遗传诊断的革命

  从一代到二代再到三代,近年来测序技术的发展势不可挡。单分子测序也逐渐表现出它的优势,在测序舞台上发挥着举足轻重的作用。近日,比利时鲁汶大学和瑞典乌普萨拉大学的研究人员在《Nucleic Acids Research》发表综述文章,介绍了PacBio SMRT测序技术在临床中的应用。  文章简单回

读懂风湿检查:HLA-B27 的那些事儿

HLA 及 HLA-B27 的发现HLA(human leukocyte antigen,人类白细胞抗原)是人类主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)的表达产物,根据 HLA 抗原结构、功能及组织分布的不同,分为 I 类、II 类、III 类

GEN: 先发制人的基因分型或成“新医学”常态

  药物遗传学(pharmacogenetics)是药理学与遗传学相结合的边缘学科,研究遗传因素对药物代谢的影响,特别是遗传因素引起的异常药物反应。药物遗传学的研究丰富了人类遗传学的内容,对临床医学有重要意义。  古往今来关于同病异治,遗传药理学和药物基因组学等多方面的研究已经证实了遗传差异与化疗药

急性白血病实验诊断进展

  急性白血病(Acute Leukemia)的诊断在一般临床实验室主要以形态学(Morphology,M)为主。由于80年代认识到白血病发病过程中的基因和表型变化对各类白血病的诊断与治疗具有重要意义,因此提出了白血病MIC分型。近两年急性白血病分子特征的研究取得了明显进展[1,3],尤其

流式细胞术在血液学中的应用

  DNA倍体分析及细胞周期分析    在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成,但DNA含量仍为2N,为二倍体细胞,;处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N;正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞