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在普通宽视野光学显微镜中，整个标本全部都被水银弧光灯或氙灯的光线照明，图像可以用肉眼直接观察 。 同时，来自焦点以外的其他区域的荧光对结构的干扰较大，尤其是标本的厚度在 2um 以上时，其影响更为明显。 激光共聚焦显微镜脱离了传统光学显微镜的场光源和局部平面成像模式采用激光束作光源，激光束经照明针孔，经由分光镜反射至物镜，并聚焦于样品上，对标本焦平面上每一点进行扫描。 组织样品中如果有可被激发的荧光物质，受到激发后发出的荧光经原来入射光路直接反向回到分光镜，通过探测针孔时先聚焦，聚焦后的光被光电倍增管(PMT)探测收集，并将信号输送到计算机，处理后在计算机显示器上显示图像 。 在这个光路中，只有在焦平面的光才能穿过探测针孔，焦平面以外区域射来的光线在探测小孔平面是离焦的，不能通过小孔。因此，非观察点的背景呈黑色，反差增加，成像清晰。由于照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的，焦平面上的点同时聚焦于照明针孔与探测针孔，焦......阅读全文
应用功能 激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope，CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激光荧光探针，利用计算机进行图像处理，不仅可观察固定的细胞、组织切片，还可对活
激光扫描共聚焦显微镜（Confocal laser scanning microscope，CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。目前，激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、动态变化过程等研究，并提供定量荧光测定、定量图像分析等实用研究手段，结合其他相关生物技术，在
一、LSCM常用的检测内容及其荧光探针 LSCM检测内容和应用范围非常广泛，以下仅简单介绍LSCM常用的检测内容及其荧光探针。 1．细胞内游离钙 共聚焦激光扫描显微镜常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等，前两者为单波长激光探针，利用其单波长激发特点可直接测量细胞内Ca
一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展 科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用，研究人员注意到，荧光显微照片的分辨率较低，传统的荧光显微镜使用场光源，因标本邻近结构（细胞或亚细胞结构）产生的衍射光和散射光的干扰，使标本中细
激光共聚焦显微镜工作原理： 奥林巴斯激光共聚焦显微镜是一种能够获取到信号的探测器，它的工作原理是一个点光源经过荧光显微镜后会成像为一个被称为"艾里斑"的扩大的光斑。在一台标准的白光干涉共聚焦显微镜中，焦平面以外的发射光会被针孔挡住，针孔的尺寸决定了有多少艾里斑能够进入探测器内。
激光扫描共聚焦荧光显微镜是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、先进的分子细胞生物学的分析仪器。主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化，定量分析，以及实时定量测定等。 成像原理 采用点光源照射标本，在焦平
1、激光扫描共聚焦显微镜用途 激光扫描共聚焦显微镜（Confocal laser scanning microscope，CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。目前，激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、动态变化过程等研究，并提供定量荧光测定、定量图像分析等实用研
激光扫描共聚焦显微镜（Laser scanning Confocal Microscopy ，简称LSCM）是近代生物医学图像仪器的最重要发展之一，它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激发荧光探针，利用计算机进行图像处理，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像，以及在亚
虽然我们常说的分辨率指的焦平面上的分辨率（即XY方向），决定分辨率高下的决定因素是物镜的数值孔径，但是其实在宽场荧光显微镜中，样本中整个被照亮的区域都会发射出荧光，这些非焦平面上的荧光其实对于焦平面上发射出的荧光，也就是我们真正关注的信息来说就是一种干扰，这也可以理解为在Z方向上，也是有分辨率的
一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用，研究人员注意到，荧光显微照片的分辨率较低，传统的荧光显微镜使用场光源，因标本邻近结构（细胞或亚细胞结构）产生的衍射光和散射光的干扰，使标本中细微结构的成像
需要在高度方向上做扫描，得到一系列的切片图，然后进行图像叠加并得到三维图像，从而提高景深范围。相对于传统的光学显微镜，激光共聚焦显微镜其横向分辨率提高40%以上，优秀可达120nm。激光共聚焦显微镜样品适用性强，非接触测试，无需样品制备和导电性处理，对样品无损伤（粉末、软性样品以及透明样品均可测试）
iFLEX激光器应用——激光扫描共聚焦显微1，什么是激光扫描共聚焦显微共聚焦显微技术是近十几年迅速发展起来的一项高新研究技术，目前应用领域扩展到细胞学、微生物学、发育生物学、遗传学、神经生物学、生理和病理学等学科的研究工作中，成为现代生物学微观研究的重要工具。激光扫描共聚焦显微镜的主要是利用激光扫描
一、激光共聚焦显微镜的基本组成激光扫描共聚焦显微镜（laser scanning confocal microscope，LSCM）是20世纪80年代发展起来的一项具有划时代意义的高科技新产品，是当今世界最先进的细胞生物学分析仪器。激光共聚焦显微镜利用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦
（一）BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液，等份分装后，－20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS（含Ca2+、Mg2+）洗2遍。加入BCECF-AM（终浓度1～5μmol/L），37℃孵育30～60min。PBS（含Ca2+、M
一、激光共聚焦显微镜的基本组成激光扫描共聚焦显微镜（laser scanning confocal microscope，LSCM）是20世纪80年代发展起来的一项具有划时代意义的高科技新产品，是当今世界最先进的细胞生物学分析仪器。激光共聚焦显微镜利用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦
激光扫描共聚焦显微镜是采用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置，并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。把光学成像的分辨率提高了30%~40%，使用紫外或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像，在亚细胞水平上观察生理信号及细
奥林巴斯激光共聚焦显微镜是一种能够获取到信号的探测器，它的工作原理是一个点光源经过荧光显微镜后会成像为一个被称为"艾里斑"的扩大的光斑。在一台标准的白光干涉共聚焦显微镜中，焦平面以外的发射光会被针孔挡住，针孔的尺寸决定了有多少艾里斑能够进入探测器内。针孔缩的越小，得到的图像越
激光共聚焦显微镜厂家LEXT OLS4100 全新的多层模式则可以识别多层样品各层上反射光强度的峰值区域，并将各层设为焦点，这样即可实现对透明样品上表面的观察和测量，而且也可以对多层样品的各层进行分析和厚度测量。激光共聚焦显微镜优点 1、以激光为光源，在相应的荧
实验目的与要求1. 掌握激光扫描共聚焦显微镜的成像基本原理及其在生命科学中的应用。一、激光扫描共聚焦显微镜的成像基本原理1.普通荧光显微镜的不足 使用荧光物质标记细胞中的特定成分或结构，不仅图像与对比度增强，而且由于许多荧光显微镜的光源使用短波长的紫外光，大大提高了分辩率（δ=0.61 λ/ N
2016年寒假生物医学大型仪器理论与实验技术培训班二轮通知（2016年1月20~28日） 中国医学科学院基础医学研究所∕北京协和医学院基础学院在医学领域具有国内一流的影响力和知名度，以尖端的医学研究及出色的理论和实验教学成为著名的医 学科学研究与教育基地。为了培
在科研的战场上，你是否还在苦于寻找更出色的成像技术与手段？你是否还在纠结观察到的实验现象能否真实的反映样品的情况？你是否还在为图像质量差而不能发表高质量的论文而苦恼？“工欲善其事必先利其器”，共聚焦将为你更好的解决这些问题。与传统的宽场成像相比，共聚焦作为一种高端的显微成像术，以其出色的成像质量及三
激光共聚焦显微镜优点1、以激光为光源，在相应的荧光探针标记后，对样本进行逐点扫描，逐层获得二维光学横断面图像，具有“细胞CT”的功能，并可通过计算机三维重建软件支持，获得三维图像，并可以任意角度旋转，观察细胞，组织立体形态和空间关系；2、可以对活细胞和组织进行无损伤的观察，动态测量细胞内的Ca离子浓
原子力激光共焦显微镜的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源，在荧光标记标本的焦平面上逐点扫描，采集点的光信号通过探测针孔到达光电倍增管，再经过信号处理，在计算机监视屏上形成图像。对于物镜焦平面的焦点处发出的光在针孔处可以得到很好的会聚，可以全部通过针孔被探测器接收。而在焦平面上下位置发出的
激光共聚焦显微镜优点 1、以激光为光源，在相应的荧光探针标记后，对样本进行逐点扫描，逐层获得二维光学横断面图像，具有“细胞CT”的功能，并可通过计算机三维重建软件支持，获得三维图像，并可以任意角度旋转，观察细胞，组织立体形态和空间关系；
高内涵成像技术已成为不可缺少的工具，推进我们在细胞水平了解人体是如何工作的。——Anthony Davies，都柏林大学圣三一学院 高内涵研究中心主管 高内涵分析（High Content Analysis，简称HCA）是对高分辨率显微镜所拍摄细胞图像的自动提取和分析。高内涵，意味着丰富
激光扫描共聚焦显微镜是采用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置，并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。把光学成像的分辨率提高了30%~40%，使用紫外或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像，在亚细胞水平上观察生理信号及细
传统的光学显微镜使用的是场光源，标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰; 激光共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描，标本上的被照射点，在探测针孔处成像，由探测针孔后的光点倍增管(PMT)或冷电耦器件(cCCD)逐点或逐线接收，迅速在计算
生物显微镜--激光扫描共聚焦显微镜概述激光扫描共聚焦显微镜（laser sconningconfocal microscope,LSCM）在生物医学领域的主要应用是通过一种或多种荧光探针标记后可对固定的组织或活体标本进行观察研究。当这些标本用普通荧光光学显微镜观察时，来自焦点以外的其他区域的荧光对结
一、细胞凋亡的形态学检测1、光学显微镜和倒置显微镜（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。（2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋
显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。 —、光学显微镜 （一）、普通光学显微镜 普通生物显微镜由3部分构成，即：①照明系统，包括光源和聚光器；②光学放大系统，由物镜和目镜组