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分子生物学常用实验技术(十五)

第十章测序技术 在分子生物学研究中,DNA 的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger 等(1977)发明的双脱氧链末端终止法和Maxam 和Gilbert(1977)发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大,但都是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,产生A,T,C,G 四组不同长度的一系列核苷酸,然后在尿素变性的PAGE 胶上电泳进行检测,从而获得DNA 序列。目前Sanger 测序法得到了广泛的应用。Sanger 法测序的原理就是利用一种DNA 聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP),并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP 缺乏延伸所需要的3-OH 基团,使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、......阅读全文

生化实验讲义(理论部分)——层析技术(一)

  通过生物化学实验应该做到:    ⑴ 学习设计一个实验的基本思路,掌握各个实验的基本原理,学会严密地组织自己的实验,合理地安排实验步骤和时间。    ⑵ 训练实验的动手能力,学会熟练地使用各种生物化学实验仪器,包括各种天平、各

微生物学检验基本技术(六)

二、沉淀反应可溶性抗原(如细菌的培养滤液、含细菌的患者血清、脑脊液及组织浸出液等)与相应抗体相混合,在比例适合和适量电解质的存在等条件下,形成肉眼可见的沉淀物,称沉淀反应。利用沉淀反应进行血清学试验的方法称为沉淀试验。沉淀反应有环状、絮状和琼脂扩散法3种基本类型。1.环状沉淀试验将已知的抗血清加于内

结核病及其实验技术的现状与展望

  结核病是当今全球范围对人类最具威胁性的感染性疾病之一,是单病因所致的感染性疾病中死亡率最高的疾病,是发展中国家的头号传染性杀手,是一个严重的公共卫生问题。一、结核病的严峻形势  由于结核病的生物学特性和社会因素,加之近20年来各国对结核病的忽视,造成结核病疫情呈全球性的回升,引起了国际社会的高度

慢病毒包装实验

慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后,可用于:(1)感染原代培养细胞;(2)制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株;(3)in vivo的基因操作、转基因动物,特别是转基因大鼠的制备。实验方法原理慢病毒是反转录病毒的一种,具有反转录病毒的基本结构和特性:整合入宿主细胞基因组,长期表达,可用于转基因动

慢病毒包装实验

慢病毒包装实验             实验方法原理 慢病毒是反转录病毒的一种,具有反转录病毒的基本结构和特性:整合入宿主

一文读懂分子诊断常用技术

  分子诊断技术是指以DNA和RNA为诊断材料,用分子生物学技术通过检测基因的存在、缺陷或表达异常,从而对人体状态和疾病作出诊断的技术。其基本原理是检测DNA或RNA的结构是否变化、量的多少及表达功能是否异常,以确定受检者有无基因水平的异常变化,对疾病的预防、预测、诊断、治疗和预后具有重要意义。通俗

一文读懂分子诊断技术、PCR技术、基因测序技术

  分子诊断技术是指以DNA和RNA为诊断材料,用分子生物学技术通过检测基因的存在、缺陷或表达异常,从而对人体状态和疾病作出诊断的技术。其基本原理是检测DNA或RNA的结构是否变化、量的多少及表达功能是否异常,以确定受检者有无基因水平的异常变化,对疾病的预防、预测、诊断、治疗和预后具有重要意义。通俗

临床检验技术发展及其在耐药基因检测中的应用进展

刘晓燕 (公安县人民医院检验科,湖北公安434300)王 红 (湖北中医药大学医学检验与技术学院,湖北武汉430065)[关键词] 临床检验技术;耐药基因;分子生物学技术一份准确全面的医学检验报告是医生做出准确诊断与制定正确治疗方案必不可少的依据。因此,临床医学检验是一门极其重要的医学学科

分子生物学实验室的器材配置

   分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器?   1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱。  

分子生物学实验室的器材配置

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分子生物学实验室的器材配置

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分子生物学实验室的构建方案

  分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器。   1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱,最常使用

分子生物学实验室的器材配置

分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器?  1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱。最常使用

分子生物学实验室的构建方案

分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器。  1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温

分子生物学实验室的构建方案

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华大质谱2018校园招聘,多岗位,月薪高达7k!

华大基于成立于1999年,是全球最大的基因组学研发机构。华大基因以“产学研”一体化的创新发展模式引领基因组学的发展,通过遍布全球的分支机构与产业链各方建立广泛的合作,将前沿的多组学科研成果应用于医学健康、农业育种、资源保存等领域,推动基因科技成果转化,实现基因科技造福人类。在未来发展中,华大基因将依

重组质粒的构建设计

基因工程又称遗传工程、DNA 重组技术、分子克隆等。它是七十年代在分子生物学发展的基础上形成的新学科。所谓基因工程,就是在分子水平上,用人工方法提取(或合成)某一生物的遗传物质,在体外切割,拼接和重新组合,然后通过载体把重组的DNA 分子引入受体细胞,使外源DNA 在受体细胞中进行复制和

活体生物发光成像技术的最新进展

活体动物体内光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP, Cyt及dyes等)进

重组质粒的构建设计

基因工程基因工程又称遗传工程、DNA 重组技术、分子克隆等。它是七十年代在分子生物学发展的基础上形成的新学科。所谓基因工程,就是在分子水平上,用人工方法提取(或合成)某一生物的遗传物质,在体外切割,拼接和重新组合,然后通过载体把重组的DNA 分子引入受体细胞,使外源DNA 在受体细胞中进行复制和表达

学做实验的方法初步入门:迷你离心机技术文章

学做实验的方法初步入门-迷你离心机技术文章实验方法:学做实验两者方法有所不同,大概分为两种方法:向别人学习和自学。下面分别介绍一下吧基本操作和基础知识在开始学做实验的时候,最好有人指导。做实验的内容,大概分为基本操作和具体实验的操作。基本操作是具体实验的基础,例如:怎样量取容积,怎样测量和调节PH值

学做实验的方法初步入门-迷你离心机技术文章

实验方法:学做实验两者方法有所不同,大概分为两种方法:向别人学习和自学。下面分别介绍一下吧基本操作和基础知识在开始学做实验的时候,有人指导。做实验的内容,大概分为基本操作和具体实验的操作。基本操作是具体实验的基础,例如:怎样量取容积,怎样测量和调节PH值,怎样清洗实验室器皿,无菌操作技术,怎样使用p

石蜡包埋组织的DNA提取及其应用

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突变和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表达和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。

常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍!

  常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍!   核酸分子杂交技术   由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定

重组质粒的构建设计

基因工程又称遗传工程、DNA 重组技术、分子克隆等。它是七十年代在分子生物学发展的基础上形成的新学科。所谓基因工程,就是在分子水平上,用人工方法提取(或合成)某一生物的遗传物质,在体外切割,拼接和重新组合,然后通过载体把重组的DNA 分子引入受体细胞,使外源DNA 在受体细胞中进行复制和表达。按人们

制胶过程中需要注意的细节及操作指南

说到Western Blotting,估计所有技术员都会联想到蓝底上的黑色条带,或者是仪器扫描的白底黑条图片。经过了漫长的实验流程,得到的会是清晰的、符合实验理论的完美结果,或者更多的是其他让自己略感失望的结局。比起其他分子生物学实验,Western Blotting实验似乎更加冗长、更加考验技术,

微生物学检验基本技术(2)

第六节 自动化技术在微生物检验中的应用   微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。数码分类技术集数学、计算机、信息及自动化分析为一体,采用商品化和标准化的配套鉴定和抗菌药物敏感试验卡或条板,可快速准确地对临床数百种常见分离菌进行自动分析鉴定和药敏试验。目前自动化微生物鉴定和药敏分析系统已

微生物学检验基本技术(2)

第六节 自动化技术在微生物检验中的应用  微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。数码分类技术集数学、计算机、信息及自动化分析为一体,采用商品化和标准化的配套鉴定和抗菌药物敏感试验卡或条板,可快速准确地对临床数百种常见分离菌进行自动分析鉴定和药敏试验。目前自动化微生物鉴定和药敏分析系统已在世界

微生物学检验基本技术(九)

3.16S rRNA同源性分析(1) rRNA-DNA杂交:变性rRNA与变性DNA混合时,rRNA与其互补的DNA链形成杂交双链,rRNA分子与异源DNA杂交时,也能在其同源区形成互补双链,这种杂交双链的稳定性与其同源性成正相关,适于细菌属及属上水平的分类研究。现最常用的是硝酸纤维膜结合法。(

分子生物学实验室中有哪些仪器

分子生物学作为基因工程 的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器。1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱,最常使用的